To isolate antifungal substances from Korean radish (Raphanus Sativus L.) seeds, various purification techniques such as DE52 cellulose anion exchange, SP-Sephadex C-25 cation exchange, and Sephadex G-50 gel filtration chromatographies were used. The molecular masses of two purified R. sativus antifungal proteins (RAPs) were estimated to be about 6.1 kDa (RAP-1) and 6.2 kDa (RAP-2) by SDS-PAGE, and 5.8 kDa(RAP-1) and 6.2 kDa (RAP-2 by a gel filtration chromatography, respectively. Purified proteins RAP-1 and 2 clearly exhibited different growth inhibitory activities against other microorganisms like Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae. Although they have similar molecular masses, both RAP-1 and 2 proteins are not identical because their microbial inhibitory actions were different. Therefore, RAP-1 could be a new antifungal protein when compared with the antifungal activities of 2S albumins, Rs-AFPs, Mj-AMPs, chitinase, glucanase, permatin, and ribosome inactivating proteins, all of which are anifungal proteins of plants.
Among the bacteria isolated from compost piles of cattle excretion in a pasture located at the suburbs of Chunchon city, Pseudomonas aeruginosa KMCS-1 was selected for the test of antifungal substances produced. Six fractions were separated by silica gel column chromatography, and then the antifungal activity of each fraction was assayed against Escherichia coli, Bacillus subtilis, Candida albicans, Rhizopus sp., Aspergillus nidulans, Coprinus cinereus, and Pyricularia oryzae by paper disc method. Two fractions showed significant suppressive activities against A. nidulans, C. cinereus, and P. oryzae however, their mycelial growth was not affected by neither of these fractions. Inhibitory activities of these fractions to sporulation was assayed at the concentration of 50. 25, 12. 5, and 6.25 $\mu$g/ml and the average inhibition rates against sporulation of A. nidulans, C. cinereus, and P. oryzae were 94.0, 98.3, and 77.9%, respectively. Further purification and analysis of active substances are now being conducted.
Islam, Md. Rafiqul;Islam, S.M. Rafiqul;Noman, Abu Shadat Mohammod;Khanam, Jahan Ara;Ali, Shaikh Mohammad Mohsin;Alam, Shahidul;Lee, Min-Woong
Mycobiology
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v.35
no.1
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pp.25-29
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2007
A newly synthesized Nickel (II) tyrosine complex was screened as potential antimicrobial agent against a number of medically important bacteria (Bacillus subtilis, Streptococcus ${\beta}$-haemolytica, Escherichia coli, Shigella dysenterae) and fungi (Aspergillus fumigatus, Candida albicans, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Penicillium sp.) strains. were used for antifungal activity. The antimicrobial activity was evaluated using the Agar Disc method. Moreover, the minimum inhibitory concentration of the complexes was determined against the same pathogenic bacteria and the values were found between $4{\sim}64\;{\mu}g\;ml^{-1}$. Brine shrimp bioassay was carried out for cytotoxicity measurements of the complexes. The $LC_{50}$ values were calculated after probit transformation of the resulting mortality data and found to be 6 ${\mu}g\;ml^{-1}$.
Yeasts were isolated from wild flowers of some islands and mountains such as Jeju-do, Ulleungdo, Yokjido, Seonyudo and Gyejoksan, Oseosan, Beakamsan and Deogyusan in Korea and were identified by comparison of nucleotide sequences for PCR-amplified D1/D2 region of 26S rDNA or internal transcribed pacer(ITS) 1 and 2 including 5.8S rDNA using BLAST. Seventy two yeast strains of two hundred eighty nine species were isolated from wild flowers in islands and mountains, Korea. Among them, Cryptococcus species were isolated the most dominantly, and Metschnikowia reukaufii were also isolated thirty species, 10.3% of total strains. Twenty-three species including Cryptococcus aureus were overlapped between yeast strains of the islands and mountains. Some physiological functionality of the culture broth and cell-free extracts from two hundred eighty nine yeast strains were determined. The supernatant of Candida sp. 78-J-2 showed antioxidant activity of 22.5%, and supernatant of Metschnilowia reukaufii SY44-6 showed anti-gout xanthine oxidase inhibitory activity of 49.6% and whitening tyrosinase inhibitory activity of 38.4%, respectively.
The Actinomycete strain KH29 is antagonistic to the multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Based on the diaminopimelic acid (DAP) type, and the morphological and physiological characteristics observed through the use of scanning electron microscopy (SEM), KH29 was confirmed as belonging to the genus Streptomyces. By way of its noted 16S rDNA nucleotide sequences, KH29 was found to have a relationship with Streptomyces cinnamonensis. The production of an antibiotic from this strain was found to be most favorable when cultured with glucose, polypeptone, and yeast extract (PY) medium for 6 days at $27^{\circ}C$. The antibiotic produced was identified, through comparisons with reported spectral data including MS and NMR as a cyclo(L-tryptophanyl-L-tryptophanyl). Cyclo(L-Trp-L-Trp), from the PY cultures of KH29, was seen to be highly effective against 41 of 49 multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. Furthermore, cyclo(L-Trp-L-Trp) had antimicrobial activity against Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger, and Candida albicans, However, it was ineffective against Streptomyces murinus.
Agricultural waste products, beech wood and walnut shells, were hydrolyzed at 40$^{\circ}C$ using mixed crude enzymes produced by Penicillium sp. AHT-1 and Rhizomucor pusillus HHT-1. D-xylose, 4.1 g and 15.1 g was produced from the hydrolysis of 100 g of beech wood and walnut shells, respectively. For xylitol production, Candida tropicalis IFO0618 and the waste product hydrolyzed solutions were used. The effects on xylitol production, of adding glucose as a NADPH source, D-xylose and yeast extract, were examined. Finally, a 50% yield of xylitol was obtained by using the beech wood hydrolyzed solution with the addition of 1% yeast extract and 1% glucose at an initial concentration.
I isolated the actinomycete strain KH223 from soil samples collected from the Kye Ryong mountain area. This strain is antagonistic to the multidrug-resistant Acinetobacter baumannii. KH223 was confirmed as belonging to the genus Streptomyces based on the scanning electronmicroscopy(SEM) observations of the diaminopimelicacid(DAP) type and morphological and physiological characteristics. Comparison of the 16S rDNA nucleotide sequences revealed that KH223 has a relationship with Streptomyces galbus. Production of antibiotics by KH223 was most favorable when cultured on a glucose, polypeptone, and yeast extract(PY) medium for 6 days at 27$^{\circ}C$. The supernatant was found to exhibit an antimicrobial effect on various kinds of bacteria and fungi. Particularly, butanol and ethylacetate extracts of KH223 and cyclo(trp-trp) exhibited significant activity against A. baumannii at concentration ranges of 0.8-12.5 ${\mu}g$/mL, 5.0-25 ${\mu}g$/mL and 12.5${\rightarrow}$100 ${\mu}g$/mL, respectively. Moreover, in contrast to cyclo(trp-trp) had shown to activity against Micrococcus luteus JCM 1464 at the concentration of 12.5 ${\mu}g$/mL, the butanol extract of KH223 showed significant activity against Bacillus subtilis IAM 1069 and Micrococcus luteus JCM 1464 at the concentration of 0.4 and 0.8 ${\mu}g$/mL, respectively. These results suggest that KH223 may have a great potential in the production of new antibiotics to combat multidrug-resistant pathogens and further studies may be warranted for the same.
Kim, Hye-Ryun;Lee, Ae Ran;Kim, Jae-Ho;Ahn, Byung-Hak
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.8
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pp.1101-1106
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2012
Market fresh makgeolli was stored at different temperatures of $4^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$ to assess the change of the microbial diversity according to the storage temperature and period. Yeast counts increased until day 3 of storage and decreased thereafter. General and lactic acid bacterial counts continuously increased during storage. The data indicated that the control of growth of microorganisms, particularly general bacteria and lactic acid bacteria (LAB), is essential. Total acid levels started to decrease in the makgeolli stored at $4^{\circ}C$, and increased from day 6 of storage in the makgeolli stored at $25^{\circ}C$. The increase of total acid in the non-refrigerated condition greatly affected the quality of makgeolli. In both the fresh makgeolli samples stored at $4^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$, yeast (Saccharomyces cerevisiae) and molds (Aspergillus tubingensis, Candida glaebosa, and Aspergillus niger) were noted. Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) band patterns were almost constant regardless of the storage period. As for bacteria, Lactobacillus crustorum, L. brevis, and Microlaena stipoides were found in the makgeolli stored at $4^{\circ}C$, and L. crustorum, Lactobacillus sp., L. plantarum, L. brevis, L. rhamnosus, and L. similis were found in the makgeolli stored at $25^{\circ}C$. In particular, in the makgeolli stored at $25^{\circ}C$, L. crustorum and L. plantarum presented dark bands and were identified as the primary microorganisms that affected spoilage of fresh makgeolli.
This work aims to utilize wastes from the potato starch industry to produce single-cell protein (SCP) with high lysine content as animal feed. In this work, S-(2-aminoethyl)-L-cysteine hydrochloride-resistant Bacillus pumilus E1 was used to produce SCP with high lysine content, whereas Aspergillus niger was used to degrade cellulose biomass and Candida utilis was used to improve the smell and palatability of the feed. An orthogonal design was used to optimize the process of fermentation for maximal lysine content. The optimum fermentation conditions were as follows: temperature of 40℃, substrate concentration of 3%, and natural pH of about 7.0. For unsterilized potato starch wastes, the microbial communities in the fermentation process were determined by terminal restriction fragment length polymorphism analysis of bacterial 16S rRNA genes. Results showed that the dominant population was Bacillus sp. The protein quality as well as the amino acid profile of the final product was found to be significantly higher compared with the untreated waste product at day 0. Additionally, acute toxicity test showed that the SCP product was non-toxic, indicating that it can be used for commercial processing.
Park, Myoung-Ho;Lee, Hwa-Sik;Bae, Bong-Jin;Kim, Joung
Journal of Technologic Dentistry
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v.22
no.1
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pp.145-152
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2000
In order to select an effective antibiotic substance against oral resident bacteria, we were isolated from soil and texonomically analyzed. Seven hundred and eighteen strains were isolated on humic acid- vitamin agar(HV agar) and 220 strains were on methanol medium from three each paddy forest, field and riverside soil samples. So, during the screening of antibiotics from soil, we isolated microorganisms showing powerful antagonistic activity against oral resident bacteria. Microorganism was tested against 25 strains of bacteria, yeast and fungi. Among them, No. 248 strain exhibited the most strongly growth inhibition. So, the taxonomical analysis the isolated strain was found to be unknown Actinomyces sp. and was named No 248. A production of the antibiotics from No. 248 begins at the early exponential phase developed at the 72th hour under the optinum conditions. The property of No. 248 antimicrobial compound was very stable under acid(pH 3.0) and alkali(pH 10.0) treatment, but it was instable in heat treatment at $120^{\circ}C$. For the improvement of antibiotic activity, two mutants were isolated from strain No. 248 by the treatment of mutagenic agents, NTG and hydroxylamine. As a result, the mutant strains excreted the potent antibiotics to inhibit the growth of Candida albicans.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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