The objective of this study was to determine the infection patterns of etiological agents causing calf diarrhea in the Gyeongnam province, Korea. In this study, from January 2011 to December 2011, feces and necropsy specimens from 249 calves diagnosed with diarrhea (<7 months old) were examined by reverse transcriptase-polymerase chain reaction assay and bacteria & coccidium isolation for detection pathogenic organism. The results of this study showed that 78 cases (31.3%) in spring, 71 cases (28.5) in summer, 62 cases (24.9%) in fall and 38 cases (15.3%) in winter were diagnosed with calf diarrhea, respectively. Calf diarrhea-causing pathogens were diagnosed as bacteria 113 (45.4%), viruses 97 (39.0%), coccidium 1 (0.4%), unknown cases 13 (5.2%), and mixed infections 25 (10.0%). We isolated three virus types from fecal samples (97), which were classified as BVD 64 (66.0%), BRV 21 (21.6%), and BCV 12 (12.4%). Moreover, co-infected pathogens were 25 cases, consisting with BVD & BRV 11 (44%), BVD & BCV& BRV 7 (28.0%), E. coli & BCV 3 (12%), and BVD & IBR 1 (4.0%). In summary, we demonstrated that the enteropathogens of bacteria, viruses, and parasite were detected in samples from cattle with diarrhea, principally in young calves less than 7 months of age. Future studies of infectious diarrhea in cattle should include assays for this etiologic agent.
Presently, viral isolation in the diarrheal feces can be reached by many tools such as fluorescent antibody test(FA), negative contrast electron microscopy(NCEM), virus neutralization test, cell culture, and so on. The purpose of the study was to aimed at the establishment of simplified NCEM technique which can be efficiently applied for diarrheal feces and also the understanding on prevalence of viral-induced diarrhea in calves. One hundred fourty-seven korean indigenous calves with diarrhea were examined to their feces by the modified NCEM. Among them, 98(66.7%) were confirmed to have one or more viruses in feces. The viruses detected were identified as rotavirus(33.3%), coronavirus(16.3% ), togavirus(10.2%) and herpesvirus(0.7%). Ten cases of combined viral infection were consisted of 8 with rotavirus+coronavirus, one with rotavirus+togavlrus and one with rotavirus+herpesvirus. Dirrheal types could classified by yello-wish watery(44.9a ), blood-tinged(19.7% ), white watery(17.7% ) , brownish watery(14.3%), greenish watery(3.4%) diarrhea, respectively. Yellowish watery diarrhea(66cases) was frequently included rotavirus(31.8%), coronavirus(15.2%), and togavirus(13.6%), respectively. Consequently, these results suggest that the modified NCEM is reliable and efficient diagnostic tool for detection of viruses in the diarrheal feces and many calves rearing in Chonnam province have been exposed to some enteric viral agents mainly including rotavirus and coronavirus.
가토 자궁 근충에서 분리한 상피세포를 10% 송아지혈청, 3mM glutamine이 함유한 Basal Eagle 배지에서 배양한 결과 세포 성장 시간은 53시간이 소요되었고, estrogen에 insulin을 첨가했을 때는 40시간으로 감소하였다. Creatine kinase 활성 단위는 단백질 mg당 0.019 unit이었다. 활성의 30%가 이온상태가 높은 완충액에서 추출되었고, plasminogen 활성 인자는 세포 백만당 140 CTA unit였다.
In this study, we isolated and characterized the acid-soluble skin collagen of Pacific bluefin tuna (PBT, Thunnus orientalis). The PBT skin collagen was composed of two ${\alpha}$ chains (${\alpha}1$ and ${\alpha}2$) and one ${\beta}$ chain. The denaturation temperature of PBT collagen was low although it was rich in proline and hydroxyproline. The primary structure of PBT skin collagen was almost identical to that of calf and salmon skin collagen; however, it differed with respect to the epitope recognition of the antibody against salmon type I collagen. These results suggest that the primary structure of skin collagen was highly conserved among animal species, although partial sequences that included the epitope structure differed among collagens.
Fecal samples of calf diarrhea were taken on farms in Jeju island, rotavirus was isolated and cytopathic effect (CPE) was determined after infection to MA104 cell. Morphological evaluation on electron microscopy proved it as rotavirus. Also, its infection to MA104 cell was reidentified using a fluorescence antibody method. Genotype of Jeju island bovine rotavirus (JBR) analyzed through PAGE was 4: 2: 3: 2 pattern, which was unique in bovine and that analyzed through general PAGE was somewhat different from NCDV, UK, KK3, A5-3A, 61A, B223 and similar to N stool-5, N culture-5 and Kawatabi (Japan). By titration after plaquing, the level was $1-3\;{\times}\;10^6\;PFU/ml$, which was lower than those of NCDV and UK. Electrophoresis analysis of RNA-RNA hybridization, ELISA, and first and second PCR products of VP7 and VP4 in 1% agarose ($TAE+1{\mu}l$ EtBr) revealed that the rotavirus was a serotype of G6P11.
Importance: Neonatal calf diarrhea is a major cause of mortality in newborn calves worldwide, posing a significant challenge in bovine herds. Group A Bovine Rotaviruses (BRVA) are the primary contributors to severe gastroenteritis in calves under two months old. Objectives: This study examined the prevalence and molecular characterization of BRVA in neonatal calves in Gujarat, India. Methods: Sixty-nine diarrheic fecal samples were collected and subjected to various molecular methods of BRVA detection, isolation, and characterization. Results: The latex agglutination test (LAT), electropherotyping (RNA-PAGE), and reverse transcription polymerase chain reaction revealed positivity rates of 39.13%, 20.30%, and 37.70%, respectively. RNA-PAGE identified 11 bands with a 4:2:3:2 migration pattern, indicative of the segmented genome of BRVA. BRVA was successfully isolated from LATpositive samples, with 26 samples exhibiting clear cytopathic effects upon passage in MA-104 cell lines. Genotyping identified G10 as the predominant G genotype, with P[11] genotypes comprising 76.92% of the isolates. The most common G/P combination was G10P[11], highlighting its zoonotic potential. Conclusions and Relevance: These findings underscore the importance of molecular detection and genotyping for effective vaccine development. This study provides crucial insights into the prevalent G and P genotypes of BRVA in Gujarat, India, aiding in the development of targeted control measures.
한우와 홀스타인의 분변으로부터 MRS 배지와 LAPT 배지를 이용하여 무작위 선발법으로 54균주의 유산균을 1차로 분리하였다. 1차로 분리된 54균주에 대해 내담즙성이 우수한 10균주를 분리한 다음 내산성을 조사한 결과 인공위액 pH 2.5에서 LS1, LS15 및 LL6 균주가 각각 66.5%, 82.6% 및 80.7%의 생존율을 나타내었다. Sal. typhimurium, Sta. aureus 및 Cl. perfringens의 병원균에 대해 가장 큰 항균력을 보인 균주는 LL6와 LL7이었다. API CHL kit로 동정한 결과 LS1, LS2 및 LMI 균주는 모두 L. fermentum, LL6와 LL7 균주는 L. acidophilus, LS3 균주는 L. plantarum으로 각각 동정되었고, 나머지 4균주는 Lactobacillus spp. 로 동정되어 분리된 10균주 모두 안전성 있는 유산간균임을 확인하였다. 10종류의 항생제에 대한 내성을 조사한 결과 ampicillin, amoxicillin과 erythromycin에 대해서는 감수성이 있으나 colistin과 ciprofloxacin에 대해 모두 내성을 나타내었다. LB1, LL6 및 LL7 균주는 gentamicin과 neomycin에 대해 내성을 보여 주었다. 분리 동정된 균주 중에 내산성, 내담즙성 및 병원성 균에 대한 특성을 기준으로 판단할 경우 probiotic 유산균으로 사용 가능성이 높은 것은 LL6인 L. acidophilus로 나타났다.
Autogenous bone grafts have been considered the gold standard for maxillofacial bony defects. However, this procedure could entail a complicated surgical procedure as well as potential donor site morbidity. Possibly the best solution for bone-defect regeneration is a tissue engineering approach, i.e. the use of a combination of a suitable scaffold with osteogenic cells. A major source of osteogenic cells is the bone marrow. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells are multipotent and have the ability to differentiate into osteoblastic, chondrocytic, and adipocytic lineage cells. However, the isolation of cells from bone marrow has someproblems when used in clinical setting. Bone marrow aspiration is sometimes potentially more invasive and painful procedure and carries of a risk of morbidity and infection. A minimally invasive, easily accessible alternative would be cells derived from periosteum. The periosteum also contains multipotent cells that have the potential to differentiate into osteoblasts and chondrocytes. In the present study, we evaluated the osteogenic activity and mineralization of cultured human periosteal-derived cells. Periosteal explants were harvested from mandibule during surgical extraction of lower impacted third molar. The periosteal cells were cultured in the osteogenic inductive medium consisting of DMEM supplemented with 10% fetal calf serum, 50g/ml L-ascorbic acid 2-phosphate, 10 nmol dexamethasone and 10 mM -glycerophosphate for 42 days. Periosteal-derived cells showed positive alkaline phosphatase (ALP) staining during 42 days of culture period. The formation of ALP stain showed its maximal manifestation at day 14 of culture period, then decreased in intensity during the culture period. ALP mRNA expression increased up to day 14 with a decrease thereafter. Osteocalcin mRNA expression appeared at day 7 in culture, after that its expression continuously increased in a time-dependent manner up to the entire duration of culture. Von Kossa-positive mineralization nodules were first present at day 14 in culture followed by an increased number of positive nodules during the entire duration of the culture period. In conclusion, our study showed that cultured human periosteal-derived cells differentiated into active osteoblastic cells that were involved in synthesis of bone matrix and the subsequent mineralization of the matrix. As the periosteal-derived cells, easily harvested from intraoral procedure such as surgical extraction of impacted third molar, has the excellent potential of osteogenic capacity, tissue-engineered bone using periosteal-derived cells could be the best choice in reconstruction of maxillofacial bony defects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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