• 제목/요약/키워드: CM-chitin

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Angelica gigas Nakai 뿌리배양에 의한 decursin 유도체 생산 증진을 위한 연구

  • 조지숙;김명환;김지연;이경선;전수환;김익환;김동일
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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    • pp.155-158
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    • 2000
  • Angelica gigas Nakai 뿌리배양을 통한 decursinol angelate생산을 증대시키기 위하여 여러 가지 elicitor들을 처리하여 생산 증진을 도모하였다. 가장 효과적인 elicitor로는 hydrogen peroxide와 $CM-\;{\beta}\;-chitin$이었으며, 이때의 g당 생산되는 decursinol angelate 양은 각각 대조구에 비해 2.12, 1.62배 증대된 값이다.

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Chitin과 Cellulose 복합체로부터 새로운 생분해성 CHITULOSE film의 개발 (Development of New Biodegradable CHITULOSE film from Composite of Chitin and Cellulose)

  • 류영석;이충우홍범식윤정원
    • KSBB Journal
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    • 제8권3호
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    • pp.230-236
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    • 1993
  • Chitin과 cellulose를 dimethylacetamide/LiCl 용매에 용해시켜 유리판 위에서 Chitulose film을 제조 하였다. 이 film은 토양속에서 20일 후에 거의 분해 되었고, 토양 미생물을 16-26hr 후에 투과시켰다. 한편, 필름의 투과도를 검토해 본 결과 물의 투과도는 Chitulose film에서 chitin, cellulose의 혼합 비율에 따라 0~187,500ml/$m^2$/day로 cellulose 함량이 높을 수록 투과도가 낮게 나타났으며, 풍건보다는 중탕에 의한 필름건조방법으로 제조된 것이 우수하였다. 각종 유기물의 최대, 최소투과도는 Chitulose film 의 종류에 따라 달리 나타나 chitin과 cellulose의 조성에 따라 선택적 투과성을 나타내였다. $Na^+$ 이온에 대한 투과도도 달리 나타나 보였고, 산소 투과도도 역시 Chitulose film의 조성에 따라 14-17,850 c $cm^3/m_2$/day로 큰 차이를 보였다. 2~3도 화상을 입힌 쥐에다 Chitulose film을 인조피부로 사용한 결과 염증없이 14일 후에 딱지가 떨어졌고, 31일 후에 완치되는 것이 관찰되었다.

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Streptomyces속 균주로 부터 생산되는 Chitinase의 정제 및 그 성질 (Purification and Properties of an Extracellular Chitinase from Streptomyces sp.)

  • Hong, Yong-Ki;Seu, Jung-Hwn
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제7권3호
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    • pp.149-155
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    • 1979
  • 자연계에서 진균류와 절족동물의 외피를 이루는 주된 다당류인 chitin(N-acetyl glucosamine polymer)의 $\beta$-1, 4-lingkage를 가수분해하는 Strepto-myces sp. 115-5 균주로부터 생성되는 chitinase를 정제하여 그 성질을 조사하였다. 48시간 진탕배양하여 생성된 chitinase를 ammonium sulfate처리, 1차 Sephadex G-100, DEAE-Cellulose, 2차 Sephadex G-100 column chromatography하여 정제하였으며 그 순도를 CM-Sephadex C-50 column chromatography 및 polyacryla-mide gel electrophoresis로서 확인하였다. 이 chitinase는 chitin과 chitosan을 가수분해 할수 있었으나 cellulose는 분해할수 없었고 chitin을 기질로서 사용하였을 경우 Km value가 3.6mg/ml이며 Vmax가 100 $\mu$mole/hr였다. Activation energy는 산 가수분해보다 훨씬 낮은 3.66kca1/mole이었고 분자량은 Sephadex G-100을 사용한 column chromatography에서 56,000 daltons으로 나타났으며, 이 chitinase의 등전점은 pH3.0에서 보여졌다.

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에탄올 내에서 $\alpha$-Chymotrypsin에 의한 Acetyltyrosine의 에스테르화 반응 (The Esterification of Acetyltyrosine by $\alpha$-Chymotrypsin in EtOH/Water Mixture)

  • 전유진;김세권
    • KSBB Journal
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    • 제9권3호
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    • pp.312-318
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    • 1994
  • Ac-Tyr-OH의 에스테르화 반응은 water/water­m miscible organic solvent를 이용하여 단일상계 (one phase system) 조건 하에서 ${\alpha}$-chymotrypsin의 촉 매작용으로 진행하였으며, 그 결과는 다음과 같다. Ac- Tyr-OH(1OmM)이 함유된 에탄올(lOml)[ 4 % %(v/v) buffer 함유] 용액에서 ${\alpha}$-chymotrypsin의 촉매작용에 의한 에스테르화 반응에 영향을 마치는 흡착물질 chitin, chitosan, Sephadex G-25 및 G-50, CM 및 DEAE-Sephadex, CM 및 DEAE cellulose 중 chitin을 첨가하였을 경우, 에스테르화 수율이 62%로 가장 높았다. 그리고 에스테르화 수 율에 마치는 최적반응조건은 chitin/${\alpha}$-chymotry psm의 비가 20(w/w), 온도 $35^{\circ}C$, pH 8.0 빛 유기 용매에 첨가된 수용액의 농도는 2%(v/v)였다. 또한, water/water-miscible organic solvent system 에서 chitin의 첨가는 효소의 안정성에 기여하는 것으로 나타났다. 최적반응조건 하에서 에스테르화 반응의 수율, Km 및 Vmax 값은 각각 93%, 3.093mM 및 1.088mM/mg/hr이었다.

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Effect of Chitin Sources on Production of Chitinase and Chitosanase by Streptomyces griseus HUT 6037

  • Kim, Kwang;Ji, Hong-Seok
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제6권1호
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    • pp.18-24
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    • 2001
  • The advantage of using Streptomyces griseus HUT 6037 in the production of chitinase or chitosanase is that the organism is capable of hydrolyzing amorphous or crystalline chitin and chitosan according to the type of the substrate used. We investigated the effects of the enzyme induction time and chitin sources, CM-chitosan and deacetylated chitosan (degree of deacetylation 75-99%), on production of chitosanase. We found that this strain accumulated chitosanase when cells were grown in the culture medium containing chitosanaceous substrates instead of chitinaceous substrates. The highest chitosanase activity was obtained at 4 dyas of cultivation with 99% deacetylated chitosan. The specific activities of chitinase and chitosanase were 0.91 and 1.33 U/mg protein at 3 and 5 days, respectively. From the study of the enzymatic digestibility of various degrees of deacetylated chitosan, it was found that (GlcN)$_3$, (GlcN)$_4$and (GlcN)(sub)5 were produced during the enzymatic hydrolysis reaction. The results of this study suggested that the sugar composition of (GlcN)$_3$was homogeneous and those of (GlcN)$_4$and (GlcN)(sub)5 were heterogeneous.

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Chitinase Produced by Streptomyces sp.

  • 홍용기;서정훈
    • 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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    • 한국미생물생명공학회 1978년도 추계학술대회
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    • pp.208.4-209
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    • 1978
  • The Chitinase which hydrolyzes the chitin, $\beta-1,$ 4-polymer of N-acetyl glucosamine, was purified from the culture broth of Streptomyces sp. 115-5 strain. The homogeneity of enzyme was reveali by CM-Sephadex C-50 column chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. The purified enzyme hydrolyzed chitin and chitosan, but not cellulose. And with chitin as the substrate, a Km value of 3.6mg per ml and a Vmax of $100\mu$ mole per hr were found. The activation energy for the reaction was 3.66 Kcal per mole. The M. W. was estimated 56,000 daltons, and PI as 3.0. The chitinase was inhibited by the addition of glucose, glucuronic acid, sorbitol and xylose as product inhibitors and its inhibition pattern by glucose was estimated pure competitive type.

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Streptococcus mutans Ingbritt sucrose-glucan glucosyltransferase 특성과 그 활성에 미치는 키틴 유도체들의 효과 (Characterization of Streptococcus mutans Ingbritt Sucrose-glucan Glucosyltransferase and the Inhibition Effect of Chitin Derivatives on its Activity)

  • 주완택;지명심;박노동
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제55권3호
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    • pp.173-178
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    • 2012
  • 충치 형성 과정에 중요한 불용성 글루칸의 합성과 관련된 sucrose-glucan glucosyltransferase (Gtf)를 Streptococcus mutans Ingbritt 의 배양액에서 염석과, Sephadex G-150, CM-Sephadex, DEAE-Sephadex column을 통과시켜 정제하였다. 회수율 6.3%였으며, 정제율 13배였다. sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE)에서 이 효소의 분자량은 66 kDa이며, 최적 pH와 온도는 각각 6.0과 $40^{\circ}C$이였다. 이 효소는 0.1 mM $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Al^{3+}$에 의하여 22-59% 저해되었다. 이 효소는 2 mM 자이리톨에 의하여 40% 저해 받았으며, 0.05% 수용성 키토산, 글리콜 키토산, 글리콜 키틴에 의하여 35-45% 저해되었다. 키틴 유도체가 Gtf 활성을 억제한다는 보고는 본 연구가 최초이며, 이는 키틴 유도체를 구강청결제의 소재로 활용할 수 있음을 제시한다.

꽃게 껍질에서 분리제조한 키틴산 필름의 물성에 관한 연구 (Physical Properties of Chitosan Film made from Crab Shell)

  • 조정숙;한정준;이철호
    • 한국식품과학회지
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    • 제24권6호
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    • pp.574-580
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    • 1992
  • 꽃게(portunus trituberculatus)의 껍질로부터 chitin을 분리한 후 탈아세틸화하여 만든 chitosan 용액의 물성 및 film 형성 특성을 조사하였고 chitosan film의 기능성을 cellophane, PVC 및 PE film과 비교 실험하였다. 분리한 chitin의 화학적 조성은 질소 6.95%, 조회분 0.3% 및 수분 4.57%이었으며 수율은 건조 꽃게 폐기물의 12.8%이었다. IR spectroscopy에 의한 chitosan의 탈아세틸화도는 $79{\sim}92%$였고 colloide 적정법에서는 $70{\sim}86%$측정되었다. 1% 초산용액에 용해시킨 0.4%와 0.8% chitosan 용액은 뚜렷한 의사가소성 유통 거동을 나타냈으며 유동거동지수와 점조도지수는 0.4% chitosan 용액에서 0.8886과 0.2084 $MPa{\cdot}s^n$이었고 0.8% chitosan 용액에서는 0.8498과 0.6190 $MPa{\cdot}s^n$을 나타냈다. Film의 물성측정에서 chitosan film은 인장강도$(888\;kg/cm^2)$와 투습도 $(110\;g/m^2{\cdot}24\;hr)$에서 높게 나타났으며 낮은 신장율을 보였다. 인열강도와 광선투과율은 PVC 및 PE film과 유사하였고 haziness에서 가장 높게 나타났다. Chitosan film의 두께가 0.025에서 0.050 mm로 증가함에 따라 인장강도는 급격히 감소하였고 신장율과 인열강도 및 투습도는 완만히 감소했으며 반면에 광선투과율은 거의 변하지 않았으며 hazines는 증가하는 경향을 나타냈다.

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토양으로부터 단리한 Bacillus subtilis NSC 유래 Cellulase의 특성 규명 (Characterization of Cellulase from Bacillus subtilis NSC Isolated from Soil)

  • 김상진;박창수
    • 한국키틴키토산학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.228-233
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    • 2018
  • 삼림 토양 시료를 이용하여 cellulase 생산균주를 단리한 결과, Carboxymethylcellulose (CM-cellulose)를 기질로 첨가한 고체배지상에서 명확한 활성환을 형성하는 총 6종류의 cellulase 생산균주를 단리하여, 단리한 균주 유래의 16S rDNA유전자 염기서열 분석을 통하여 균주 동정을 진행하였다. 그 결과 본 연구에서 단리된 균주는 Bacillus subtilis 4종류, Bacillus amyloliquefaciens 1종류, Bacillus cereus 1종류로 동정되었다. 이 중에서 CM-cellulose에 대한 가장 높은 cellulase 활성을 보이는 Bacillus subtilis를 선정하여 Bacillus subtilis NSC로 명명하였다. Bacillus subtilis NSC 유래 cellulase는 균주 배양 36~48시간에서 가장 높은 cellulase 생산성을 보였으며, 최적 pH 및 온도를 검토한 결과, 본 균주 유래 cellulase는 pH 5.0과 $40^{\circ}C$에서 가장 높은 효소 활성을 나타내었다. 그리고, pH 4.0~5.0 조건에서 30분간 효소처리를 하여도 효소활성의 감소가 없었으며, $40^{\circ}C$까지는 30분간의 열처리에도 효소활성의 저하 없이 안정한 특성을 보였다. CM-cellulose, Alkali swollen cellulose, Sigmacell-cellulose, Alpha-cellulose, 그리고 Avicel을 기질로 기질 특이성을 한 결과 CM-cellulose에 대하여 가장 높은 효소 활성을 나타내었으며, cellulose 결정구조를 보유하고 있지않는 CM-cellulose와 Alkali swollen cellulose에 대해서는 명확한 효소활성을 보였다. 하지만, cellulose 결정구조를 보유하고 있는 Sigmacell Cellulose, Alpha-cellulose, 그리고 Avicel 기질에 대해서는 CM-cellulose 활성의 각각 8%, 8%, 그리고 4%의 매우 낮은 효소활성을 나타내었다. Bacillus subtilis NSC 유래 cellulase의 0.26 U/ml 조효소액과 0.52 U/ml 조효소액을 이용하여 CM-cellulose의 분해 특성을 검토하였을 때 두 조효소액 모두 반응 CM-cellulose에 대해 반응 120분 후에 0.43 U/ml와 0.76 U/ml의 효소 활성을 나타내었다.