• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제5권1호
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• pp.32-35
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• 2002

In this study, we investigated the mechanism of cell death in rhabdovirus-infected cells, chinook salmon embryonic cell line (CHSE-2l4) infected with hirame rhabdovirus (HIRRV). Studies using light microscopy, fluorescence microscopy, TUNEL method, electron microscopy, and agarose gel electrophoresis revealed changes in the cell morphology and DNA fragmentation indicative of apoptosis in early infection. It was observed that HIRRV induced apoptosis as well as necrosis in infected cells.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권2호
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• pp.354-361
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• 2005

Vibrio fluvialis, an enteropathogenic bacterium, produces a phospholipase which is thought to be an important factor in the pathogenesis of disease. In this study, the phospholipase gene (vfp) was identified from V fluvialis (KCTC 2473) and its sequence was determined. The entire open reading frame was composed of 1,689 nuc1eotides and 563 amino acids. The phospholipase gene (vfp) was overexpressed in Escherichia coli as a his-tag fused protein. This recombinant protein (rVFP58) was solubilized with 6 M urea and purified by Ni-NTA affinity chromatography. The action mode of rVFP58 was determined by TLC and GC-MS, and it showed phospholipase B activity, which had both phospholipase A and lysophospholipase activities. The rVFP58 showed a maximum activity at pH around 9- 10 and temperature of about 40OC, and it was stable under alkaline condition over pH 9. The cytotoxicity of rVFP58 was evaluated, using a fish cell line, CHSE-2l4, and was found to cause significant cell death after 14 h of exposure to 250 $\mu$g of the protein.

• 한국어병학회지
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• 제11권2호
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• pp.129-136
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• 1998

1997년 3월 전라남도 및 경상남도의 해산어 육상 및 가두리 양식장에서 양성 중이던 넙치가 HRV(hirame rhabdovirus, Rhabdovirus olivaceus) 감염증과 유사한 증상을 나타내어 그 원인을 조사한 결과 새로운 rhabdovirus가 분리 되었다. 분리 바이러스(DF-9708)는 RTG-2 및 EPC 세포주에서 $15^{\circ}C$로 배양하였을 때 랩도바이러스 특유의 세포변성효과(CPE)를 나타내었으나 CHSE-214에서는 증식되지 않았다. 투과전자현미경으로 감염 세포내의 바이러스 입자 형태를 관찰해본 결과 bullet-shape의 크기 $70nm{\times}100\sim150nm$으로 인벨롭을 가진 바이러스였다. 분리바이러스는 pH 3 및 diethyl ether의 처리 조건에서는 감염성을 상실하였고, 열($50^{\circ}C$ 5 min, $60^{\circ}C$ 1 min)에도 약한 성상을 나타내었다. DNA 저해제인 IUdR $10^{-4}$M 처리에 의해서는 바이러스 감염가에 영향을 받지 않았다. 분리 바이러스는 Anti-HRV(8401-H) rabbit serum에 의해서만 중화 되었고, 전염성 조혈기 괴사증 바이러스(IHNV), 연어과 레오바이러스(CSV), 바이러스성 선회병 바이러스(RVS) 및 전염성 췌장괴사증 바이러스(IPNV) 등의 국내에서 분리되어지는 바이러스 항체로는 중화되지 않았다. 초원심법으로 정제한 분리 바이러스를 전기영동 한 결과 polymerase(L), glycoprotein(G), nucleoprotein(N) 및 2개의 matrix proteins(M1 및 M2)으로 구성되어져 있었으며, 각 단백질의 분자량은 L, 160 kDa; G, 55 kDa; N, 45 kDa; M1, 26 kDa; M2, 22 kDa의 크기로 계산되었다. 새롭게 분리된 바이러스는 외부증상으로는 기존의 HRV 감염과 유사한 점을 나타내었으나 그 바이러스학적 특성에 있어 약간의 차이점이 있어 본 분리바이러스를 우선 Nubchi rhabdovirus(NRV)(HRV-like)로 부르기로 한다.

• 한국어병학회지
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• 제18권2호
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• pp.167-178
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• 2005

본 연구에서는 S. iniae의 병원성 요인으로 작용할 수 있는 capsule의 존재 여부를 확인하고 그에 따른 capsule과 병원성과의 상관 관계를 조사하였다. 즉, 집락의 형태학적 특성에 따라 viscous form (V+)과 non-viscous form (V-)의 균주로 구분하여 그 특성을 비교 분석하였다. 분리균의 생리학적 및 생화학적 특성으로는 숙주의 방어 기작에 대한 저항성이나 병원성 차이를 구분할 수 없었으나 형태학적으로 큰 차이를 있음을 알 수 있었다. 즉, V+인 경우 cell wall 표면에 capsule이 존재하지만 V-에서는 capsule이 존재하지 않는 것으로 확인되었다. V+는 넙치 혈청에서 증식할 수 있지만 V-는 넙치 혈청에 의해 살균되는 것으로 나타나 capsule의 유무에 따라 넙치의 체액성 면역 요소에 대한 저항력에서 차이가 나는 것을 알 수 있었다. 또한, V+는 넙치 신선 혈청으로 감작한 경우에도 V-에 비해 macrophage의 식균율이 낮았으며 식균된 이후에는 균 수가 지속적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었고 일반 어류 주화 세포 내로 침입하여 생존 및 증식할 수 있는 것으로 나타났다. 이들 결과는 앞으로의 백신 개발에 유용한 기초 자료로 사용될 수 있을 것으로 사료되었다.