• 한국어병학회지
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• 제33권2호
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• pp.171-175
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• 2020

We developed and subsequently characterized mouse monoclonal antibodies (mAbs) against marine birnavirus (MABV). Eight hybridoma clones secreting mAbs against MABV were established. All eight mAbs (8G6, 11C3, 15E3, 17H6, 32A6, 35A7, 38B5, and 47E3) were reacted with viral protein 3 of MABV in MABV-infected CHSE-214, whereas, no reactivity was observed in normal CHSE-214 by western blot analysis. Moreover, these eight mAbs were strongly reacted with MABV, and no cross-reactivity has been observed against other five fish viruses (hirame rhabdovirus, infectious hematopoietic necrosis virus, nervous necrosis virus, spring viraemia of carp virus, and viral hemorrhagic septicemia virus), although five mAb (11C3, 15E3, 17H6, 32A6, and 38B5) reacted with both MABV and infectious pancreatic necrosis virus by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). These results indicate that the mAbs can be of value in MABV detection.

• 미생물학회지
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• 제42권4호
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• pp.271-276
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• 2006

이전의 연구 결과 어류 rhabdovirus에 감염된 세포에서 virus-inducible stress protein (VISP)의 발현이 증가함을 확인하였다. 본 연구에서는 VISP의 세포내 위치를 확인하였으며, 또한 세포내 위치 결정에 중요한 역할을 담당하는 VISP의 부위를 확인하였다. 먼저 endogenous VISP의 세포내 위치를 확인하기 위하여 CHSE-214 세포를 VISP에 대한 단클론항체를 사용하여 염색한 후 confocal microscope로 관찰하였다. 그 결과 VISP가 세포의 핵 주변에 점구조를 형성함이 확인되었다. 이를 확인하기 위하여 VISP에 enhanced green fluorescent protein (EGFP)이 붙은 fusion gene을 발현하는 plasmid를 제조하였다. EGFP-VISP를 발현하는 plasmid 벡터를 세포에 transfection 시킨 후 confocal microscope로 관찰한 결과 핵 주변에 점구조를 형성함이 확인되었다. VISP의 아미노산서열 중 핵 주변의 점구조 형성에 관여하는 부분을 확인하기 위하여 VISP의 다양한 deletion mutant들을 제조하였다. 이 mutant를 사용한 transfection 실험 결과 VISP의 C-terminal 부위(aa 612-710)가 핵주변의 점구조 형성에 중요한 역할을 담당함이 확인되었으며, 이 부분의 functional motif 분석결과 691-TLTSLLL-697 부위에 nuclear receptor binding motif가 존재함이 확인되었다. 이와 같은 결과들을 종합하면, VISP는 핵 주변에 존재하며 VISP의 C-terminal부위가 혀 주위 분포에 중요한 역할을 담당함을 알 수 있었다. 이후의 연구로부터 VISP의 핵 주위 분포가 IHNV의 성장에 미치는 영향이 확인되면 IHNV 병원성의 새로운 기작을 밝혀내는 중요한 자료가 될 것이다.

• 한국어업기술학회:학술대회논문집
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• 한국어업기술학회 1996년도 수산관련공동학술대회발표요지집
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• pp.197-198
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• 1996

• 한국동물위생학회지
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• 제25권3호
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• pp.295-297
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• 2002

This experiment was done to set up the immunohistochemical detection method for infectious hematopoietic necrosis virus(IHNV) antigens in the monolayers of CHSE-214 cell cultures inoculated with IHNV. Specific identification of IHNV antigens was detected in the cytoplasms of infected cells by the use of monoclonal antibodies to glycoproteins. The specific positive signal was observed as a distinct red color. The result showed that streptavidin alkaline phosphatase immunohistochemistry specifically identified IHNV antigens in infected cultured cells.

• Journal of Microbiology
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• 제40권4호
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• pp.295-300
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• 2002

Previously, we reported induced expression of developmentally regulated CTP-binding protein 2 (DRG2) in fish cells at the late stage of rhabdovirus infection. To investigate the biological role of fish DRG2 (fDRG2), we transfected CHSE-214 cells with an expression vector containing complete fDRG2 fused to the N-terminal end of an enhanced green fluorescent protein (EGFP). Low level expression of fDRG2-EGFP did not induce morphological change or cell death. However, a high level expression of fDRG2-EGFP induced cell rounding and caused depletion of the cell population in FACS analysis. Several truncated fragments were fused to EGFP. FACS analysis was conducted to determine the presence of cells expressing high levels of the resulting chimera. While cells expressing a high level of N-terminus were detected, those expressing high levels of the C-terminal fragment 243-290 containing the G4 motif were absent in FACS analysis. Based on these observations, we propose that overexpression of fDRG2 may induce cell rounding, a representative cytopathic effect of virus-infected cells in the late stage of infection and the C-terminus of the fDRG2 is essential for this function.

• 한국어병학회지
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• 제12권1호
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• pp.56-62
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• 1999

1998년 12월에서 1999년 3월에 걸쳐 바이러스의 감염에 의한 넙치 치어의 대량 폐사가 일어났다. 감염어 샘플을 CHSE-214에 접종한 3일 후부터 세포의 구형화, 용해를 특징으로 하는 CPE가 나타났으며, 전자현미경 관찰에서는 크기가 52-56 nm의 구형의 바이러스입자가 세포질 내에서 관찰되었다. RT-PCR에 의한 버나바이러스 특이적 검출의 결과 양성이었다. 어류주화세포를 이용한 바이러스 배양 특성을 확인한 결과 분리바이러스는 MBV와 유사한 세포선택성을 나타내었으나 IPNV와는 세포내 배양특성이 다르게 나타났다. 바이러스 중화 시험에서 항MBV Y-6혈청과 완전히 중화되었으나, IPNV Ab, Sp, VR-299치 항혈청과는 중화 항체가가 낮게 나타나났다. 본 바이러스는 한국의 넙치에서 분리된 IPNV와 다른 새로운 버나바이러스로서 marine birnavirus(MBV)에 속한다.

• 한국어병학회지
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• 제7권2호
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• pp.161-171
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• 1994

뱀장어의 울혈증 발병 원인구명을 위하여 서해안 지역 5 개 양만장을 대상으로 아가미 울혈증 발병현황과 수질등 역학조사를 실시하였고, 한편으로는 스트레스(handling 과 수온차) 및 병어에서 분리한 아가미 마쇄액을 건강어의 복강에 주사하여 울혈증 발병률과 CHSE-214 에 접종하여 세포변성을 조사하였다. 조사한 양만장의 아가미 울혈증 발병률은 30-80%로서 사육시의 수온과 선별시의 수온차가 클수록 발병률이 높았으며, 수질환경과 본증의 발병과는 뚜렷한 상관관계가 없었다. 또한 발병률이 높은 양만장의 뱀장어는 Ht, Hb, Tp, Alb, Mg 및 Glu 치등이 낮은 반면 GOT, GPT, Ca 및 Met-Hb 치등은 높게 나타나는 경향을 보였으나, 반드시 아가미 울혈증에 비례하여 증감되지는 않았다. 스트레스(handling 과 수온차)를 가함에 따라 아가미 울혈증이 실험적으로 유발되어졌으며, 발병률은 50-70% 이었다. 이러한 스트레스 조건하의 어류의 혈액학적인 성상은 울혈증 발병빈도에 비례하여 Ht, GOT, GPT, Met-Hb, Alb 및 Glu 치등은 증가되었으나, Tp, Hb 및 Mg 은 감소하는 경향을 보였으며, 온도차가 클수록 cortisol 량이 증가되는 경향을 보였다. 그러나, 병어의 아가미 마쇄액을 복강주사 및 CHSE-214 에 접종하였던 바 각각 울혈증의 발병 및 세포변성이 전혀 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 선별시 handling 과 수온의 급변이 혈중 cortisol을 상승시켜 혈액의 전해질 변화를 초래케하므로써 혈액의 흐름을 완만하게 되고 동정맥계로의 혈액유입량이 증가하게 되어 중심정맥동이 확장되므로써 울혈이 형성되는 것임을 시사한다.

• 한국양식학회지
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• 제21권1호
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• pp.7-12
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• 2008

본 연구는 시판되는 10종의 소독제(hydrogen peroxide, sodium hypochlorite, chlorine dioxide, povidon iodine, formaldehyde, glutaraldehyde, quaternary ammonium compounds(QAC), didecyl dimethyl ammonium chloride(DDAC), ortho-dichlorobenzene, and copper sulfate)에 대한 CHSE-214 cell line과 넙치 Paralichthys olivaceus, 조피볼락 Sebastes pachycephalus, 감성돔 Acanthopagrus schlegelii에 대한 24 h $LC_{50}$ 농도를 측정하였다. 시험에 사용된 시판용 소독제에 대한 CHSE-214 cell line의 24 h 독성 농도는 시판액을 기준으로 hydrogen peroxide 0.955 ppm, sodium hypochlorite 12.5 ppm, chlorine dioxide 62.5 ppm, povidon iodine 50 ppm, formaldehyde 4 ppm, glutaraldehyde 1 ppm, quaternary ammonium compounds 10 ppm, didecyl dimethyl ammonium chloride 0.4 ppm, ortho-dichlorobenzene 6.2 ppm 이었다. 10종의 소독제의 독성 농도는 어종에 뿐만 아니라 각 소독제에 따라서도 매우 다양하게 관찰되었다. Hydrogen peroxide는 소독제 중에서 가장 높은 농도에서 어류에 대한 독성을 보였는데 넙치, 조피볼락 및 감성돔에 각각 201, 269 및 139 ppm에서 $LD_{50}$을 나타내었다. DDAC는 가장 낮은 농도에서 어류에 대한 독성을 보였는데 넙치, 조피볼락 및 감성돔에서 각각 2.1, 1.0 및 1.5 ppm에서 $LD_{50}$을 나타내었다. Copper sulfate는 어종에 따라 독성을 보이는 농도가 가장 크게 나타났다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제3권1호
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• pp.49-51
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• 2000

This study was performed to confirm the relationship between viral propagation and apoptosis by the infection of marine birnavirus strain (MABV NF-4) on chinook salmon embryo (CHSE-214) cells. After 6 hr viral infection, MABV was detected by PCR method. Also, as a result of DNA assay on the cells, MABV infection resulted in a typical feature of apoptosis, DNA fragmentation. The results suggest that MABV replicated to high concentrations during the early stage of infection induces apoptosis.

• 한국수의병리학회지
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• 제3권1호
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• pp.1-5
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• 1999

This experiment was carried out to establish the immunohistochemical diagnostic method for infectious pancreatic necrosis in the monolayers of CHSE-214 cell cultures and paraffin-embedded tissue sections from rainbow trout infected with infectious pancreatic necrosis virus(IPNV). Specific identification of IPNV antigens was often demonstrated in the pancreatic exocrine cells, and less in the intestinal mucous epithelia and the renal hemopoietic tissues by the use of monoclonal antibodies against capsid protein VP2. The specific reaction was seen as a distinct red cytoplasmic color, often as small granules of various sizes. The result showed that streptavidin alkaline phosphatase immunohistochemisry specifically identified IPNV antigens in both infected cell cultures and tissue sections.