IPSKCDNA gene(1.8 kbp) encoding rat brain IP3K enzyme contained Not I restric site in open reading frame. The Not I sequence, GCGGCCGC, was converted to GCAGCCGC by site-directed mutagenesis. The mutated IP3KcDNA was digested with EcoR I and ligated with EcoR I-restricted psp72·Not2 vector. The resulting psp72 · Not2-IP3KCDNA was digested with the Not I restriction enzyme and then subcloned into the Not I -digested PZIP · NeoSV(X) mammalian expression vector. The PZIP · NeoSV(X) -IPSKCDNA was transfected into CCL39 hamster lung fibroblast cells. The efficiency of the expressed IPSKCDNA gene was significantly higher than expected generally, not only a mean 5-fold increase in the amount of enzyme, but also 16-fold increase in enzyme activity from tractsfected CCL39 cells by the method of Western blot using anti-lP3K antibodies. Both distribution of IPSK in various rat tissues and biochemical properties were discussed.
This study was devised to investigate the effects of flavonoids on carbon tetrachloride toxicity of rats. Through the experiments, the contents of total cholesterol, transaminase(GOT, GPT) and alkaline phosphatase(Alk. P) activities in the liver and serum were determined. The results obtained are summarized as follows; (1) The liver cholesterol concentration of flavonoid injected groups were remarkably increased up to 45% at 2 days after $CCl_4$ injection and then the values were almost recovered to the level of control group at 4 days after $CCl_4$ injection. The increase of serum cholesterol content was inhibited by the flavonoids after $CCl_4$ injection, but the result was not significant. (2) Flavonoids injection was found to have the ability to decrease the elevated serum GOT, Alk. P activities resulting from injection of $CCl_4$ and induce rapid recovery from such an elevated level and the extent of such a decreasing action was greatest in hesperidin injection group. The liver microsomal Alk. P and GOT activities were not affected by the treatment of flavonoids. (3) The elevated serum and liver microsomal GPT activities induced by $CCl_4$ injection were inhibited by the injection of flavonoids.
Jeong, Ji Young;Son, Younghae;Kim, Bo-Young;Eo, Seong-Kug;Rhim, Byung-Yong;Kim, Koanhoi
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.19
no.6
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pp.549-555
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2015
We attempted to investigate molecular mechanisms underlying phenotypic change of vascular smooth muscle cells (VSMCs) by determining signaling molecules involved in chemokine production. Treatment of human aortic smooth muscle cells (HAoSMCs) with thrombin resulted not only in elevated transcription of the (C-C motif) ligand 11 (CCL11) gene but also in enhanced secretion of CCL11 protein. Co-treatment of HAoSMCs with GF109230X, an inhibitor of protein kinase C, or GW5074, an inhibitor of Raf-1 kinase, caused inhibition of ERK1/2 phosphorylation and significantly attenuated expression of CCL11 at transcriptional and protein levels induced by thrombin. Both Akt phosphorylation and CCL11 expression induced by thrombin were attenuated in the presence of pertussis toxin (PTX), an inhibitor of Gi protein-coupled receptor, or LY294002, a PI3K inhibitor. In addition, thrombin-induced production of CCL11 was significantly attenuated by pharmacological inhibition of Akt or MEK which phosphorylates ERK1/2. These results indicate that thrombin is likely to promote expression of CCL11 via PKC/Raf-1/ERK1/2 and PTX-sensitive protease-activated receptors /PI3K/Akt pathways in HAoSMCs. We propose that multiple signaling pathways are involved in change of VSMCs to a secretory phenotype.
A nuclear, biological, chemical (NBC) canister was indigenously developed using active carbon impregnated with ammoniacal salts of copper (II), chromium (VI) and silver (I), and high efficiency particulate aerosol filter media. The NBC canister was evaluated against carbon tetra chloride ($CCl_4$) vapours, which were used as a simulant for persistent chemical warfare agents under dynamic conditions for testing breakthrough times of canisters of gas masks in the National Approval Test of Respirators. The effects of $CCl_4$ concentration, test flow rate, temperature, and relative humidity (RH) on the breakthrough time of the NBC canister against $CCl_4$ vapour were also studied. The impregnated carbon that filled the NBC canister was characterized for surface area and pore volume by $N_2$ adsorption-desorption isotherm at liquid nitrogen temperature. The study clearly indicated that the NBC canister provides adequate protection against $CCl_4$ vapours. The breakthrough time decreased with the increase of the $CCl_4$ concentration and flow rate. The variation in temperature and RH did not significantly affect the breakthrough behaviour of the NBC canister at high vapour concentration of $CCl_4$, whereas the breakthrough time of the NBC canister was reduced by an increase of RH at low $CCl_4$ vapour concentration.
Near-IR spectra for $ν_{\alpha}$+ Amide Ⅱ combination band of thioamides, and very dilute thioamide-DMSO solution in CCl4 were recorded in the temperature range of $5^{\circ}C$ to $55^{\circ}C$. This combination band was resolved by the computer program into two Lorentzian-Gaussian product function which have been identified with monomeric thioamide and thioamide-DMSO 1 : 1 complex. Equilibrium constants and thermodynamic parameters for the thioamide-DMSO hydrogen bonding were elucidated by the analysis of conce ntration and temperature dependent spectra. The hydrogen bonding strength between thioacetamide (TA) and DMSO in $CCl_4$ is stronger than that between thiopropionamide (TPA) and DMSO in CCl4. The ${\Delta}H^{\circ}$ for the TA-DMSO and TPA-DMSO 1 : 1 complex in CCl4 were -15.3 kJ${\cdot}$$mol^{-1}$ and -14.2 kj${\cdot}$$mol^{-1}$, respectively.
Objectives : Recently the case of lactobacillus mixture culture fluid appliment was reported. In this study, anti-inflamation effects and anti-allergy effects were studied by stimulus of lactobacillus mixture culture fluid extracts in HaCaT cells. Methods : The atopic dermatitis were induced by TNF-${\alpha}$ and interferon-${\gamma}$ in HaCaT cells. TARC/CCL17, MDC/CCL22, RANTES/CCL5 and ROS production were investigated to explain anti-inflamation and allergy effects of lactobacillus mixture culture fluid with cell-enzyme-linked Immunosorbent assay in 450 nm, 485 nm, 535 nm with spectro-fluorometer. Results : The extracts of lactobacillus mixture culture fluid were decreased TARC/CCL17, MDC/CCL22, RANTES/CCL5 expressions and ROS production with a concentration dependent manner. Conclusions : The effects mechanism of Lactobacillus mixed culture fluid for atopic dermatitis symptoms were considered to be explain anti-inflamation and allergy effects via control of cytokine, chemokine and ROS production, and the fluid could be applied in skin cells directly. But classified AD symptom degrees reported in clinical case before as Reaction Period, Reduction Period, Effect Period, Reproduction Period and Rebound Period could not be explained. Further study will be expected.
In oriental medicine, Artemisia Iwayomogi(Compositae) has been used clinically for jaundice, hepatitis, liver cirrhosis etc. The purposes of present study were to examine pharmacological effects of Artemisia lwayomogi water extract(AIWE) on weights of body, liver, kidney, spleen and adrenal, and on biochemical parameters (activities of AST, ALT and LDH, contents of cholesterol and triacylglycerol, and levels of hepatic lipid peroxide) against hepatic injury by carbon tetrachloride($CCl_4$) in rats. The results were as follow; 1. Body weights were reduced by $CCl_4$. In AIWE pretreatment groups, reduction of body weights was inhibited at 48 hours. Increased liver weights by $CCl_4$ were reduced in proportion to numbers of treatment of AIWE in AIWE pre- and posttreatment groups. Increased kidney weights by $CCl_4$ were reduced in AIWE pretreatment groups at 72 hours. Increased weights of spleen and adrenal by $CCl_4$ were not affected by AIWE treament. 2. Increased AST activities by $CCl_4$ were significantly (p<0.05) decreased in AIWE posttreatment groups at 48 and 72 hours. Increased ALT activities by $CCl_4$ were significantly(p<0.05) decreased in AIWE posttreatment groups at 48 hours. Increased LDH activities by $CCl_4$ were very significantly (p<0.01, p<0.001) decreased in AIWE posttreatment groups at 48 and 72 hours, respectively. 3. Increased cholesterol contents by $CCl_4$ were significantly (p<0.05) decreased in AIWE posttreatment groups at 24 and 48 hours. Decreased triacylglycerol contents by $CCl_4$ were significantly (p<0.05) increased in AIWE posttreatment at 48 and 72 hours. 4. Increased hepatic lipid peroxide levels by $CCl_4$ were significantly (p<0.05, p<0.01) decreased in AIWE posttreatment groups at 48 and 72 hours, respectively. In conclusion, AIWE did not affect normal liver function and had property of antioxidant, due to reduced lipid peroxidation by $CCl_4$. AIWE seems to have hepatoprotective effects rather than direct preventive effects to $CCl_4$-induced necrotic degeneration of liver cell, cholestasis and damages in metabolism of lipid.
The metabolism of many drugs and also of steroid hormones is mediated by enzymes located in the microsomal fraction in smooth surfaced endoplasmic reticulum of mammalian liver. The duration and intensity of action of many drugs are largely determined by the speed at which they are metabolized in the body. Repeated administration of phenobarbital results in the induction of enzymes that metabolize a number of drugs. Lee et al. reported that daily administration of phenobarbital in rats significantly increased the activities of amylase in the pancreatobiliary juice, but the concentration of cholate in the bile was significantly lower in the treated group than that in the control group. After animals were treated with $CCl_4$, histological changes were shown in the endoplasmic reticulum, decreased microsomal enzyme activity and decreased hepatic protein synthesis were apparent. The purpose of the present report was to study the interaction between a 'microsomal-stimulating' agent such as phenobarbital and a 'microsomal- depressing' agent such as $CCl_4$ on hepatic and pancreatic functions in rats. The results obtained are summarized as follows: 1. The mortality rate of $CCl_4$ treated group was 34% and was decreased this figure to 15% with phenobarbital pretreatment. 2. In animals treated with phenobarbital the volume of biliary-pancreatic secretion was markedly elevated but the volume was decreased significantly in animals treated with $CCl_4$. 3. Total bilirubin output was elevated markedly in the $CCl_4$ treated group of rats pretreated with phenobarbital. The bilirubin concentration was increased in $CCl_4$ treated group and decreased in the group treated phenobarbital alone. 4. The concentration and total output of cholate in the bile were significantly lower in the all experimental group than control group. 5. In the animals treated with phenobarbital alone and phenobarbital plus $CCl_4$, the activity of lipase in pancreatobiliary juice was elevated, while in the animals treated with $CCl_4$ alone no change was observed. 6. The activity of amylase in the pancreatobiliary juice was decreased in the $CCl_4$ treated group, but elevated markedly in phenobarbital group and also elevated in phenobarbital-$CCl_4$ group. By the above results, it is concluded, when the liver was damaged by $CCl_4$, the exocrine function of pancreas and liver was decreased simultaneously. However, in the animals pretreated with phenobarbital, the toxicity of $CCl_4$ on the liver and pancreas was reduced.
Fifty percent ethanol extract of Lythrum salicaria Linne root (LSR) was tested in vitro on antioxidant activity, and furthermore was investigated on antioxidative and fibrosis protecting activities in $CCL_4$-induced liver fibrosis rat model. Ratio of hepatic GSH/GSSG (reduced glutathione/oxidized glutathione) as bio-parameter of antioxidant level in $CCL_4$ plus LSR-treated rats for 6 weeks significantly increased from 2.8- to 5.7-fold than that of $CCL_4$-treated rats at p < 0.05. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) contents in $CCL_4$ plus LSR-treated rats ranged from 1.57- to 2.19-fold of normal rats and were lower than those in $CCL_4$ plus silymarin-treated rats ($1.78{\sim}2.46$-fold of normal rats) (p < 0.05). Amounts of hydroxyproline of liver tissue showing the content of total collagen, a parameter of fibrosis, in $CCL_4$ plus LSR-administrated rat livers were $4.9{\sim}8.8{\mu}g$/mg ($-47{\sim}-71%$, compared with that in $CCL_4$-treated rat livers ($16.6{\mu}g$/mg tissue), which were significantly lower than those in $CCL_4$ plus silymarin-administrated rats being $8.4{\sim}11.7{\mu}g$/mg ($-30{\sim}-50%$). This collagen reducing effect of liver tissue in $CCL_4$ plus LSR-treated rats was supported by histological observation using microscopy assay. From the results, we conclude that the root of L. salicaria have efficient antioxidant potential and effective antifibrotic activities.
The antilipidperoxidative and hepatopreventive effects of Aloe water extract (30 mg, 50 mg, 100 mg) were investigated at the levels of liver-total homogenates and the sera of SDrats intoxicated with CCl4 (0.5 cc/100g) and 50% ethanol. We measured MDA (Malondialdehyde) in the liver homogenate, AST (L-Aspartate-2-oxoglutarate aminotransferase) and ALT(L-Alanine-2-oxo-glutraate aminotransferase) in the serum. The analysis of the measurement indicated that Aloe water extract reduced MDA, ALT and AST significantly and their reduction was in relation to dose dependence. In rat liver homogenate intoxicated with ethanol and CCl4, Aloe treatment group markedly inhibited lipidperoxidation by 30%∼70%. In rat serum intoxicated with ethanol and CCl4, Aloe treatment group inhibited AST, ALT by 40%∼90%. In these data Aloe may be used to inhibit or prevent the hapatic toxicity with results from the environmental and alcohlic factors through the further study of its exact antihepatotoxic mechanism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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