우리 나라에 서식하는 뱀목 중 뱀과의 유혈목이, 능구렁이 및 무자치와 살모사과의 살모사, 까치살모사 및 쇠살모사를 재료로 하여 그 위장관에 출현하는 장내분비세포들 중 bombesin, CCK-8, gastrin, glucagon, insulin, PP, serotonin, somatostatin, substance P 및 VIP 등 10종류의 세포를 면역세포화학적 방법으로 염색한 후 광학현미경하에서 세포의 분포, 출현빈도, 모양 및 특징 등을 관찰하였던 바 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 능구렁이, 유혈목이, 무자치, 까치살모사 및 쇠살모사의 위장관 점막상피에서는 CCK-8, gastrin, PP 및 serotonin 등 4종류의 분비세포가 관찰되었으며 동물의 종 및 위장관 각 부위별에 따라 내분비세포의 다과의 차이는 다소 있었다. 2. 살모사의 위장관 점막상피에서는 CCK-8, gastrin 및 serotonin 등 3종류의 분비세포가 관찰되었다. CCK-8, gastrin 및 serotonin 세포는 위장관 전반에 걸쳐 관찰되었으며 gastrin세포는 유문부와 소장 점막에 출현하였으며 각 부위에 따른 수의 차이가 있음을 알게 되었다. 3. 위장관 점막상피에서 관찰된 장내분비세포들의 모양은 위에서는 추체형 및 난원형을 띠었고 폐쇄형이었으며 소장 및 대장 전부에서는 주로 방추형을 띤 개구형이었으나 소수는 폐쇄형도 있었다. 대장 후부 및 직장에서는 난원형의 폐쇄형이었다. 4. 본 실험에서 사용된 10종류의 항혈청 중에서 bombesin, glucagon, insulin, somatostatin, subsatance P 및 vasoactive intestinal polypeptide 항체 등에 양성반응을 보인 장내분비세포들은 관찰되지 않았다.
CCK and cholinergic agonist stimulate enzyme release from the pancreatic acini via G-protein-mediated activation of phospholipase C, In contrast secretin and related peptides increase the level of cAMP and activate cAMP-dependent protein kinase. Camostat, a synthetic protease inhibitor, causes pancreatic hypertrophy and hyperplasia by increasing the CCK release. In this study, the secretagogue-induced changes of intracellular proteins were examined in the dispersed pancreatic acini of rats with or without camostat treatment. Camostat(FOY-305, 200 mg/kg, p.o.) was given for 4 days twice daily and the dispersed acini were prepared at 12 bouts after last treatment. The profiles of Intracellular phosphoproteins were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis after incubating the acini with $^{32}P$. The amylase release from the dispersed acini was measured. The pancreatic weight was increased to 126% of control, while amylase activity per mg acinar protein decreased to 41% of control, The maximum response of amylase release from dispersed acini to CCK-8 or carbachol was markedly decreased(65% or 46% of control, respectively). The group of intracellular proteins(24 kD, pI $4.5{\sim}8.5$) was increased in quantity by camostat. CCK-8 or secretin increased phosphorylation of a protein(34 kD, pI 4.7) in camostat-treated as well as control rats. CCK-8 increased tyrosine phosphoryiation in the acini of control rats. However, in camostat-treated rats, the basal level of tyrosine phosphorylation was increased and it was rather decreased by CCK-8. Secretin had no effect on the level of tyrosine phosphorylation in acini. These results indicate that both phospholipase C and adenylate cyclase induce phosphorylation of an intracellular acinar protein(34 kD, pI 4.7) and camostat treatment increases the basal level of tyrosine phosphorylation in acinar cells. And these results suggest that not only serine/threonine protein kinase but also protein tyrosine kinase/phosphatase are involved in the process of CCK receptor mediated stimulation-secrelion coupling.
고양이 담낭근에서 효소학적으로 분리한 평활근 세포는 cholecystokinin octapeptide (CCK-8), acetylcholine (ACh) 및 KCl에 의하여 용량에 의존하여 수축하였다. 이들 효현제 (CCK-5, ACh 및 KCl)에 의한 평활근 세포의 최대수축은 각각$10^{-9}M$, $10^{-5}M$ 및 20mM 농도에서 야기되었다. CCK-8에 의하여 야기되는 이들 평활근 세포의 수축은 HEPES 완충액에 $Ca^{2+}$을 제거시킴에 의하여 영향을 받지 아니하였으나, $Ca^{2+}$ 대신에 strontium을 첨가시켰을때 수축반응이 완전하게 억제되었다 (p<0.001). 이와는 반대로 KCl에 의한 수축반응은 strontium 치환에 의하여 영향을 받지 아니하고 HEPES 완충액에 $Ca^{2+}$을 제거시킴에 의하여 억제되었다 (p<0.01). ACh에 의하여 야기되는 수축반응은 세포 외액의 $Ca^{2+}$을 제거시킴에 의하여 중등도의 억제반응이 야기되었으나 (p<0.05) strontium에 의하여 영향을 받지 아니하였다. Saponin으로 세포 투과성 변동을 야기시킨 근세포에서 inositol 1,4,5-trisphosphate $(IP_3)$와 CCK-8은 수축반응을 일으켰고, 이러한 수축반응은 calmodulin 길항제인 CGS 9343B에 의하여 차단되었으며 (p<0.001), heparin은 CCK-8 및 $IP_3$의 작용을 완전하게 봉쇄하였다 (p<0.001). 그러나 이러한 수축반응에 있어서 protein kinase C 길항제인 H7은 아무런 작용을 나타내지 못하였다. 이러한 결과로 볼 때 CCK-8에 의하여 야기된 고양이 담낭근 세포의 수축반응은 $IP_3$에 의하여 세포내 저장소로부터 유리된 $Ca^{2+}$과 calmodulin에 의존적인 과정에 의하여 매개되어 지는 것으로 생각된다. 또한 ACh는 세포외액의 $Ca^{2+}$ 뿐만 아니라 세포내 저장소의 $Ca^{2+}$ 모두를 이용하며, KCl은 전적으로 세포외액의 $Ca^{2+}$에 의존적인 형태로 calmodulin과는 무관하게 고양이 담낭근 세포의 수축반응을 야기시키는 것으로 사료된다.
Park, Min;Kim, Kyong;Lee, Yu Mi;Rhyu, Mee Ra;Kim, Hye Young
Nutrition Research and Practice
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제8권2호
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pp.146-150
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2014
BACKGROUND/OBJECTIVES: Cholecystokinin (CCK), a hormone or neuropeptide, is secreted in response to intraluminal nutrients by enteroendocrine I-cells of the intestine and has important physiological actions related to appetite regulation and satiety. The stimulation on CCK secretion from the intestine is of potential relevance for body weight management. Naringenin (4',5,7-trihydroxyflavanone) and its glycoside naringin (naringenin 7-rhamnoglucoside) have been reported to have many biological functions. In the current study, we investigated the question of whether naringenin and naringin could stimulate CCK secretion and then examined the mechanisms involved in CCK release. MATERIALS/METHODS: STC-1 cells were used as a model of enteroendocrine cells. CCK release and changes in intracellular $Ca^{2+}$ ($[Ca^{2+}]_i$) were measured after incubation of cells with naringenin and naringin for 1 h. RESULTS: Naringenin caused significant (P < 0.05) stimulation of CCK secretion, but naringin did not. In addition, regarding the secretory mechanisms, naringenin-induced CCK secretion involved increases in $[Ca^{2+}]_i$, influx of extracellular $Ca^{2+}$, at least in part, and activation of TRP channels, including TRPA1. CONCLUSION: Findings of this study suggest that naringenin could have a role in appetite regulation and satiety.
ICR 마우스 위장관 8개 부위(위저부, 유문부, 십이지장, 공장, 회장, 맹장, 결장 및 직장)에서 위장관내분비 세포의 부위별 분포 및 상대적 빈도를 somatostain, serotonin, glucagon, chloecystokinin(CCK)-8, secretin, pancreatic polypeptide(PP) 및 gastrin 등 총 7종류의 항혈청을 이용한 면역조직화학적 방법으로 관찰하였던 결과 somatostain, serotonin, glucagon, CCK-8, secretin, 및 gastrin 면역반응세포의 7종류의 내분비세포가 관찰되었다. 본 실험의 결과 장관부위에서는 주로 타원형 또는 방추형의 개방형 세포(open-typed cell)들이 관찰된 반면 위저부와 유문부에서는 주로 원형의 폐쇄형 세포(close-typed cell)을이 관찰되었다. 이들 면역반응세포들의 부위별 분포는 위장관 각 부위에 따라 매우 다양하게 관찰되었다. Somatostain 면역반응세포들은 대장을 제외한 위장관에서 전 부위에서 관찰되었고, serotonin 면역반응세포들은 전 위장관에 걸쳐 관찰되었으며, ICR 마우스에서 가장 높은 빈도를 나타내었다. Glucagon 면역반응세포들은 위저부와 직장에 국한되어 관찰되었으며, 각각 중등도 및 소수의 빈도를 나타내었다. CCK-8 면역반응세포들은 유문부, 십이지장 및 회장에서 각각 다수, 중등도 및 극소수의 빈도로 관찰되었다. 한편 secretin 면역반응세포들은 각각 소수 및 극소수의 빈도로 십이지장과 회장에 국한되어 출현하였고, gastrin 면역반응세포들은 유문부에 국한되어 다수 관찰되었다. 그러나 PP 면역반응세포들은 전 위장관에 걸쳐 관찰되지 않았다. 결론적으로 ICR 마우스의 위장관내분비세포의 부위별 분포 및 상대적 빈도는 다른 포유동물과 유사하게 관찰되었으나, 일부 특이한 양상을 나타내기도 하였다.
Aminoglycoside antibiotics are reported to enhance the amylase release from isolated slices of pancreas in vitro and the mode of action of aminoglycosides on amylase release is considered different from those of acetylcholine or cholecystokinin(CCK), i.e., electronmicroscopically intact zymogen granules are appeared in the lumen of pancreatic acini by treatment of aminoglycosides. It is known that atropine blocks the secretagogue effect of acetylcholine, and phenoxybenzamine is reported to block the effects of CCK or its analogue caerulein. Present study was undertaken to investigate the mode of action of aminoglycosides on the amylase release using atropine, phenoxybenzamine and propranolol as a membrane stabilizing agent in slices of chicken pancreas. The results are summarized as follows : 1) Streptomycin and kanamycin increased the amylase release significantly from slices of chicken pancreas. 2) The effect of streptomycin was inhibited by atropine but not by phenoxybenzamine or propranolol. 3) The amylase release by acetylcholine was blocked by atropine tut the effect of cholecystokinin octapeptide(CCK-8) was not influenced by atropine, phenoxybenzamine or propranolol. 4) Pretreatment of streptomycin enhanced the secretagogue effect of acetylcholine or CCK-8. From these results it is suggested that amylase releasing effects of aminoglycosides are mediated in part by cholinergic stimulation and in part by membrane alteration and these effects are enhanced by acetylcholine or cholecystokinin.
Park, Jun-Beom;Lee, Ji-Eun;Jin, Seong-Ho;Ko, Youngkyung;Jeong, Su-Hyeon
대한한의학회지
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제37권2호
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pp.85-92
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2016
Objectives: Asiasari radix (A. radix) is a traditional herb medicine that has been used as an analgesic, antitussive, or anti-allergic remedy. This study was performed to evaluate the effects of low concentration of the Asiasarum heterotropoides extract on the morphology and proliferation of the human mesenchymal stem cells derived from periodontal tissue. Methods: Stem cells derived from gingiva were grown in the presence of A. radix at final concentrations that ranged from 0.001 to $0.01{\mu}g/mL$. The morphology of the cells was viewed under an inverted microscope and the analysis of cell proliferation was performed by using Cell Counting Kit-8 (CCK-8) on days 1 and 3. Results: The control group showed fibroblast morphology. The shapes of the cells in 0.001 and $0.01{\mu}g/mL$ of A. radix were similar to that of the untreated control group. The cultures growing in the presence of A. radix at day 1 showed an increase in the CCK-8 value. The relative values of CCK-8 assays of 0.001 and $0.01{\mu}g/mL$ of A. radix are $130.6%{\pm}1.8%$ and $129.3%{\pm}1.5%$, respectively, when the CCK-8 result of the untreated control group at day 1 is considered 100% (P = 0.051). Conclusions: Within the limits of this study, low concentrations of A. radix seemed to increase the proliferation of the stem cells that were derived from the gingiva and did not have adverse effects on the morphology of the cells.
Histological changes, distributions and relative frequencies of bovine Sp-1/chromogranin (bCG)-, serotonin-, gastrin-, cholecystokinin-8(CCK-8)-, somatostatin-, S-100 protein-, polypeptide YY(PYY)- and glucagon-immunoreactive cells were investigated in the gizzard and pylorus of the chicken embryos from 10 days of incubation to hatching. Histologically, the pseudostratified columnar epithelium were observed from 10 days of incubation to 15 days of incubation, thereafter these epithelium were differentiated to simple columnar epithelium, gastric gland and/or mucosal gland. In the gizzard, bCG-immunoreactive cells were observed from 19 days of incubation and S-100 protein-immunoreactive cells were detected from 15 days of incubation to 18 days of incubation. No serotonin-, gastrin-, CCK-8-, somatostatin-, PYY- and glucagon-immunoreactive cells were found in this region. In the pylorus, bCG-, gastrin- and somatostatin-immunoreactive cells were observed from 16 days of incubation respectively, thereafter these cells were increased with ages. CCK-8-immunoreactive cells were detected on hatching and S-100 protein-immunoreactive cells were detected from 16 days of incubation to 18 days of incubation. No serotonin-, PYY- and glucagon-immunoreactive cells were observed in this region.
In order to study the effects of Jengjengamiyjintang on the duodenal ulcer induced by HCl-aspirin in rats, the changes of histological profiles, goblet cells(PAS-positive cells), and the distribution and frequency of cholecystokinin(CCK)-8 and serotonin-producing gastro-entero-endocrine cells were observed after oral administration of Jengjengamiyjintang. Histologically, very severe injury to duodenal epithelium were observed in control groups and these injuries were increased with time intervals. But in the Jengjengamiyjintang administrated groups, no gross lesion of ulcer were demonstrated and histologically minor injury to the mucosal epithelium were observed. PAS-positive cells were increased in the Jengjengamiyjintang administrated groups compared to that of control groups. Severe degranulation of CCK-8- and serotonin-immunoreactive cells were observed in control groups but these phenomenon was seldom in the Jengjengamiyjintang administrated groups. Serotonin-immunoreactive cells were significantly decreased in control groups but increased in Jengjengamiyjintang administrated groups compared with control groups. According to these result, it is suggested that Jengjengamiyjintang would accelerat the healing of the duodenal ulcer but the functional mechanisms were unknown.
Ku, Sae-Kwang;Lee, Hyeung-Sik;Park, Ki-Dae;Lee, Jae-Hyun
Animal cells and systems
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제4권4호
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pp.375-379
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2000
The appearance of some gastrointestinal endocrine cells in the Meckel's diverticulum (MD) of the bean goose, Anser fabalis Latham was observed using specific antisera against serotonin, gastrin, cholecystokinin (CCK)-8, glucagon, secretin, somatostatin and human pancreatic polypeptide (HPP) with the peroxidase antiperoxidase (PAP) method. Among these specific antisera, serotonin-, gastrin-, CCK-8-, somatostatin- and HPP-immunoreactive cells were demonstrated in this study. Serotonin-, gastrin- and somatostatin-immunoreactive cells were detected at moderate frequency and CCK-8- and HPP-immunoreactive cells was rare and low frequencies, respectively. These immunoreactive cells were located in the superficial epithelium, intestinal crvpt and intestinal glands with spherical or spindle shaped cells having long cytoplasmic processes (open typed-cell). Mucosal layer of MD was composed of simple columnar epithelium and numerous intestinal glands. In addition, numerous lymphatic tissues were also demonstrated. In conclusion, histological profiles of MD were similar to any parts of the large intestine, especially the cecum, but the appearance, distribution and relative frequency of gastrointestinal endocrine cells were similar to those of upper parts of the small intestine. Although the exact digestive functions were unknown, the finding that the appearance, distribution and relative frequency of gastrointestinal endocrine cells in MD is similar to small intestine may be considered as distinct evidence that this organ may have some digestive functions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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