• 생명과학회지
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• 제33권2호
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• pp.115-128
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• 2023

정금나무 열매(Fruit of Vaccinum oldhami)를 분리 정제하여 클로로겐산(CA), 퀘르세틴(QT) 및 퀘르시트린(QR)을 얻었다. 전자공여능 측정 결과, CA, QT, QR은 각각 1,000 ㎍/ml의 농도에서 91.9%, 89.9%, 77.4%의 효과를 나타내었다. ABTS⁺ 라디칼 소거능 측정 결과, QT 및 QR은 1,000 ㎍/ml의 농도에서 각각 99.5%, 91.4%를 나타내었으며, CA는 100 ㎍/ml의 농도에서 90% 이상의 소거능을 나타내었다. Tyrosinase 억제 활성 측정 결과, CA, QT, QR은 각각 1,000 ㎍/ml이 농도에서 29.5%, 34.7%, 23.7%의 저해율을 나타내었다. MTT assay를 통해 B16F10의 세포 생존율을 측정한 결과, CA, QT, QR 모두 100 ㎍/ml의 농도에서 80% 이상의 생존율을 나타내었다. 단백질 발현을 측정한 결과, 농도가 증가함에 따라 CA에서 TRP-1, TRP-2의 단백질 발현이 억제되는 것을 확인할 수 있었으며 QT에서는 TRP-1, TRP-2 및 tyrosinase에서 우수한 단백질 발현 억제율을 나타내었다. CA의 mRNA 발현 억제율을 측정한 결과, MITF의 mRNA 발현 억제 효과가 우수함을 확인하였으며, TRP-1, TRP-2 및 tyrosinase의 mRNA 발현량은 농도가 증가할수록 감소하였다. QT는 농도가 증가할수록 MITF, TRP-2, tyrosinase의 mRNA 발현이 감소하였다. QR의 mRNA 발현 억제율을 측정한 결과, 농도가 증가할수록 mRNA 발현량이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 이하의 결과에 따라 CA, QT, QR의 항산화 및 미백 효과를 확인할 수 있었다.

• Animal cells and systems
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• 제12권3호
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• pp.137-141
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• 2008

Molecular cloning revealed the three isoforms($Ca_v3.1,\;Ca_v3.2,\;and\;Ca_v3.3$) of the T-type calcium channel subfamily. Expression studies exhibited their distinctive electrophysiological and pharmacological properties, accounting for diverse properties of T-type calcium channel currents previously characterized from isolated cells. However, electrophysiological properties of ion channels have shown to be more diversified by their splice variants. We here searched splice variants of rat $Ca_v3.1$ T-type channel by reverse-transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) to further explore diversity of $Ca_v3.1$. Interestingly, analyses of cloned RT-PCR products displayed that there were at least four splicing variants of rat $Ca_v3.1$ in the loop connecting repeats III and IV. Southern blot analyses indicated that the predominantly detected variant in brain was $Ca_v3.1a$(492 bp), which were rarely detected in most of peripheral tissues. Other two variants($Ca_v3.1c$, 546 bp; $Ca_v3.1d$, 525 bp) were detected in most of the tissues examined. The smallest isoform($Ca_v3.1b$, 471 bp) was rarely detected all the tissues. Electrophysiological characterization of the splicing variants indicated that the splice variants differ in inactivation kinetics and the voltage dependence of activation and inactivation as well.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제1권6호
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• pp.783-796
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• 1997

The relaxation induced by stimulation of the inhibitory non-adrenergic, non-cholinergic (iNANC) nerve is mediated by the release of iNANC neurotransmitters such as nitric oxide (NO), vasoactive intestinal peptide (VIP) and adenosine triphosphate (ATP). The mechanisms of NO, VIP or ATP-induced relaxation have been partly determined in previous studies, but the detailed mechanism remains unknown. We tried to identify the nature of iNANC neurotransmitters in the smooth muscle of guinea pig ileum and to determine the mechanism of the inhibitory effect of nitric oxide. We measured the effect of NO-donors VIP and ATP on the intracellular $Ca^{2+}$ concentration$([Ca^{2+}]_i)$, by means of a fluorescence dye(fura 2) and tension simultaneously in the isolated guinea pig ileal smooth muscle. Following are the results obtained. 1. Sodium nitroprusside $(SNP:10^{-5}\;M)$ or S -nitro-N-acetyl-penicillamine $(SNP:10^{-5}\;M)$ decreased resting $[Ca^{2+}]_i$ I and tension of muscle. SNP or SNAP also inhibited rhythmic oscillation of $[Ca^{2+}]_i$ and tension. In 40mM $K^+$ solution or carbachol ($(CCh:10^{-6}\;M)$-induced precontracted muscle, SNP decreased muscle tension. VIP did not change $[Ca^{2+}]_i$ and tension in the resting or precontracted muscle, but ATP increased resting $[Ca^{2+}]_i$ and tension in the resting muscle. 2. 1H-[1,2,4]oxadiazol(4,3-a)quinoxalin-1-one $(ODQ:1\;{\mu}M)$, a specific inhibitor of soluble guanylate cyclase, limited the inhibitory effect of SNP 3. Glibenclamide $(10\;{\mu}M)$, a blocker of $K_{ATP}$ channel, and 4-aminopyridine (4-AP:5 mM), a blocker of delayed rectifier K channel, apamin $(0.1\;{\mu}M)$, a blocker of small conductance $K_{Ca}$ channel had no effect on the inhibitory effect of SNP. Iberiotoxin $(0.1\;{\mu}M)$, a blocker of large conductance $K_{Ca}$ channel, significantly increased the resting $[Ca^{2+}]_i$, and tension, and limited the inhibitory effect of SNP. 4. Nifedipine $(1\;{\mu}M)$ or elimination of external $Ca^{2+}$ decreased not only resting $[Ca^{2+}]_i$ and tension but also oscillation of $[Ca^{2+}]_i$ and tension. Ryanodine $(5\;{\mu}M)$ and cyclopiazonic acid $(10\;{\mu}M)$ decreased oscillation of $[Ca^{2+}]_i$ and tension. 5. SNP decreased $Ca^{2+}$ sensitivity of contractile protein. In conclusion, these results suggest that 1) NO is an inhibitory neurotransmitter in the guinea pig ileum, 2) the inhibitory effect of SNP on the $[Ca^{2+}]_i$ and tension of the muscle is due to a decrease in $[Ca^{2+}]_i$ by activation of the large conductance $K_{Ca}$ channel and a decrease in the sensitivity of contractile elements to $Ca^{2+}$ through activation of G-kinase.

• 자연과학논문집
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• 제9권1호
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• pp.1-7
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• 1997

칼슘/calmodulin-의존적 단백질 인산화 효소 II (CaMK-II)는 세포의 여러 기능을 조절하는 다양한 단백질들을 인산화시키는 효소이다. 세포 내부의 칼슘의 농도는 세포의 주기에 따라 변하므로 CaMK-II의 활성도 역시 세포주기에 따라 변하는 지를 조사함으로 세포주기에서의 CaMK-II의 역할을 알아보려 하였다. NIH3T3 세포를 CaMK-II의 활성도에는 전혀 영향을 주지 않는 여러 가지 약제로 처리하여 세포주기상의 특정한 시점에 동일하게 정지시킨 후, 세포내의 CaMK-II 활성도를 합성 펩타이드기질을 이용하여 측정하였다. 또한 일정 시점으로부터 동조화된 세포내의 CaMK-II의 활성도의 변화를 측정하여 한 세포주기 동안 효소의 활성도 변화의 양상을 조사하였다. 세포주기상 각각 G0, G1, G1/S, G2/M기에 정지된 세포내의 CaMK-II 총활성도는 대조군과 차이가 없었으나 M기에서는 낮았다. 그러나 자가인산화에 의한 CaMK-II의 칼슘-비의존성 활성도는 M기에서 가장 높았다. 이러한 양상은 G1기에서부터 동조화된 세포내 CaMK-II의 칼슘-비의존성 활성도 변화 양상과도 일치하였다. CaMK-II의 생리학적 의미를 지닌 활성도는 인산화에 의한 calcium-비의존성 활성도임을 비추어 볼 때 M기에서 CaMK-II가 세포분열의 과정에서 중요한 기능을 하고 있음을 보여주고 있다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제9권1호
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• pp.29-35
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• 2005

To prove the buffering contribution of mitochondria to the increase of intracellular $Ca^{2+}$ level ($[Ca^{2+}]_i$) via background nonselective cation channel (background NSCC), we examined whether inhibition of mitochondria by protonophore carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP) affects endothelial $Ca^{2+}$ entry and $Ca^{2+}$ buffering in freshly isolated rabbit aortic endothelial cells (RAECs). The ratio of fluorescence by fura-2 AM ($R_{340/380}$) was measured in RAECs. Biological state was checked by application of acetylcholine (ACh) and ACh ($10{\mu}M$) increased $R_{340/380}$ by $1.1{\pm}0.15$ ($mean{\pm}S.E.$, n=6). When the external $Na^+$ was totally replaced by $NMDG^+$, $R_{340/380}$ was increased by $1.19{\pm}0.17$ in a reversible manner (n=27). $NMDG^+$-induced $[Ca^{2+}]_i$ increase was followed by oscillatory decay after $[Ca^{2+}]_i$ reached the peak level. The increase of $[Ca^{2+}]_i$ by $NMDG^+$ was completely suppressed by replacement with $Cs^+$. When $1{\mu}M$ CCCP was applied to bath solution, the ratio of $[Ca^{2+}]_i$ was increased by $0.4{\pm}0.06$ (n=31). When $1{\mu}M$ CCCP was used for pretreatment before application of $NMDG^+$, oscillatory decay of $[Ca^{2+}]_i$ by $NMDG^+$ was significantly inhibited compared to the control (p＜0.05). In addition, $NMDG^+-induced$ increase of $[Ca^{2+}]_i$ was highly enhanced by pretreatment with $2{\mu}M$ CCCP by $320{\pm}93.7$%, compared to the control ($mean{\pm}S.E.$, n=12). From these results, it is concluded that mitochondria might have buffering contribution to the $[Ca^{2+}]_i$ increase through regulation of the background NSCC in RAECs.

• 한국식품영양과학회지
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• 제40권5호
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• pp.665-672
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• 2011

본 연구는 유청 단백질과 칼슘이 킬레이트된 새로운 유기태 칼슘 보충제를 난소절제와 저칼슘 식이로 유도된 골다공증 모델 흰쥐에게 급여하여 유기태 칼슘 보충제의 칼슘 이용성과 생리기능에 미치는 영향을 평가하기 위해 수행되었다. 실험은 8주령 된 암컷 흰쥐(Sprague-Dawley)를 난소절제술을 실시한 후, 저수준(0.1%)의 탄산칼슘을 4주간 급여하여 골다공증 모델을 설정하고, 탄산칼슘의 함량이 저수준(0.1%), 유기태 칼슘의 함량이 저수준(0.1%), 정상수준(0.5 %), 고수준(1.5%)으로 한 실험식이를 4주간 급여하였다. 식이섭취량 및 체중, 혈청의 칼슘 및 ALP 활성, 대퇴골과 요추골의 무게, 길이, 회분양, 칼슘과 인의 함량, 대퇴골의 파단력 및 칼슘의 체내 이용성 등을 측정하였다. 그 결과 유기태 칼슘군의 식이섭취량은 8주 저탄산 칼슘군에 비해 유의적으로 증가하였고, 체중 증가는 유기태 정상 및 고칼슘군에서 유의적으로 높았다. 혈청 칼슘 농도는 유기태 칼슘의 섭취량이 증가할수록 감소하였다. 혈청 ALP의 활성은 유기태 칼슘군에서 유의적으로 낮아졌다. 유기태 칼슘 섭취수준이 증가 할수록 대퇴골의 무게가 증가하는 경향을 보였다. 대퇴골의 파단력은 유기태 정상칼슘군 및 고칼슘군에서 유의적으로 높았다. 대퇴골의 회분양은 유기태 정상칼슘군에서 유의적으로 증가하였고, 칼슘 함량은 칼슘 섭취가 증가할수록 높은 경향을 나타냈다. 요추골의 무게는 유기태 칼슘의 섭취 수준에 따라 증가하였다. 대퇴골의 길이는 4주군에 비해 8주 저탄산 칼슘군이 유의적으로 증가한 반면, 요추골의 경우는 유의적으로 감소하였다. 요추골의 회분양은 유기태 정상칼슘군에서 가장 높았으며, 칼슘 함량은 유기태 고칼슘군에서 유의적으로 증가하였다. 칼슘의 섭취량 및 분 중의 칼슘 배설량은 칼슘섭취 수준이 증가함에 따라 증가하였다. 칼슘의 흡수량은 유기태 저칼슘군에 비해 유기태 정상 및 고칼슘군이 각각 5배, 10배 증가하였고, 칼슘의 흡수율은 유기태 저칼슘 및 정상칼슘군에서 유의적으로 증가하였다. 결론적으로 유기태 칼슘 섭취 수준에 따라 정상 혈청 칼슘 농도는 유지되었으나, 혈청 ALP의 활성은 유의적으로 낮아지는 결과를 보였다. 또한 유기태 칼슘의 섭취가 증가할수록 대퇴골, 요추골의 무게 및 칼슘 함량이 증가하였고, 대퇴골의 파단력이 유의적으로 증가하였다. 칼슘 흡수율은 유기태 저칼슘군과 정상칼슘군이 유의적으로 높게 평가되었다. 따라서 유청 단백질과 킬레이트된 유기태 칼슘소재가 골격 대사면에서 골다공증의 예방 및 치료를 위해 새로운 칼슘 보충제의 급원으로 추천할 만하다고 본다.

• 대한화학회지
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• 제10권1호
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• pp.32-42
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• 1966

$CaCl_2$, CaO 및 $WO_3$로 構成되는 熔融鹽을 黑鉛 陽極과 鐵 陰極으로 電解하여 순수한 金屬텅스텐을 얻는 方法에 관하여 실험하였다. 電氣分解에 적합한 熔融浴을 選定하기 위하여 $CaCl_2$-CaO系와 $CaCl_2-CaWO_4$系에 관한 二相 狀態圖를 작성하였으며 同時에 $CaCl_2$와 $WO_3$와의 高溫下에서의 化學反應을 검토하여 安定한 電解浴을 얻기 위해서는 一定量의 CaO가 添加되어야 할 것임을 알 수 있었다. 炭素陽極을 사용하여 $WO_3$를 W와 CO로 분해시킬 때의 分解電壓은 -0.1 volt이었으며 熱力學的 計算에 의한 것은 -0.3 volt이었다. 熔融鹽을 電氣分解한 結果 金屬텅스텐이 100%에 가까운 電流效率로 電極에 析出되나 이는 陽極에서 二次的으로 발생하는 CO가스에 의하여 쉽게 WC등으로 변화하므로 순수한 텅스텐을 얻기 위해서는 電解浴의 溫度를 $1100^{\circ}C$이상으로 유지하여야 된다는 것을 알게 되었다. 電解浴의 組成은 可及的 低融點과 $WO_3$의 分解, $CaCl_2$의 蒸發 등을 억제하기 위해서는 $CaCl_2$ 100分에 대하여 CaO와 $WO_3$가 각 10 乃至 20分이 適切하였으며 CaO와 $WO_3$의 몰比率은 1이상이 요구되었다. 陰極 電流密度를 1~5 $amp/cm^2$의 範圍에서 變化시켜도 電流效率에 큰 影響이 없었다.

• 한국토양비료학회지
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• 제32권4호
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• pp.333-343
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• 1999

본 연구는 호염성(胡鹽性) 이면서 호칼슘 식물로 알려진 사탕무에서 일가이온인 K와 Na 그리고 이가 이온인 Ca와 Sr 및 Mg의 식물체내 수송과 분포를 밝히고자 수행하였다. Sr의 흡수와 재분배과정은 근권의 이온농도와 생육단계와 밀접한 관계가 있었다. Ca 4 mM과 Sr 1 mM을 처리했을 때 체내 Ca 함량이 가장 높았던 반면 Sr의 함량은 1mM Ca와 4 mM Sr을 혼합처리 했을 때 가장높았다. 즉 낮은 농도의 Sr을 처리했을 때 Ca의 흡수가 가장 높았다. 이러한 결과는 Ca와 Sr의 상가적 흡수기작 때문으로 추정되었다. Mg함량에 대한 Ca와 Sr총 함량은 고도의 부의 상관을 나타냈다. 결과적으로 Mg와 Sr 및 Ca는 상호 길항적으로 흡수되는 것을 알수 있었다. 5mM Sr 존재 하에서만 K와 Na의 흡수가 증가하는 반면 Ca와 Sr의 혼합처리는 이들 이온과는 무관하였다. 따라서 K/Na Ratio 또한 변화되지 않았다. 소량(1mM)의 Sr 첨가는 Chlorophyll 분해를 저지하는 효과를 보였다.

• 한국재료학회지
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• 제4권7호
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• pp.798-807
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• 1994

$BaTio_{3}$에 Ca가 첨가되면 상온 저항을 증가시키며 이는 $Ca^{2+}$가 $Ti^{4+}$를 치환하여 acceptor 불순물을 형성하기 때문이라고 생각된다. 그러나 $Ca^{2+}$는 $Ti^{4+}$보다 이온 반경이 크므로 그 자리를 치환하지 않는다는 주장도 있다. 본 실험에서는 $BaTiO_{3}$에 의한 acceptor가 존재하는지 알아보기 위하여 Ba/(Ti+Ca+Nb)=1이 되도록 Ca와 Nb를 첨가하여 산소 분압의 변화에 따른 고온 평형 전기 전도도를 측정하였다. 측정은 $1000^{\circ}C$에서 행하였으며 산소 분압은 $10^{-15}$ ~ 1 기압의 범위에서 조절하였다. 첨가된 Ca와 Nb의 농도를 변화시킨 결과, acceptor와 donor의 상호 보상 효과가 나타났다. 즉, Nb에 의한 donor를 보상하는 acceptor가 존재함을 확일하였고, 전도도 곡선의 결함 화학적인 해석에 의하여 Ca가 Ti자리를 치환함을 알았다. 이러한 acceptor의 존재는 ICTS에 의해서도 확인되었다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제6권2호
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• pp.93-99
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• 2002

Effects of oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL), $1-{\alpha}-stearoyl-lysophosphatidylcholine$ (LPC), on intracellular $Ca^{2+}$ concentration were examined in mouse endothelial cells by measuring intracellular $Ca^{2+}$ concentration $([Ca^{2+}]_i)$ with fura 2-AM and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). LPC increased $[Ca^{2+}]_i$ under the condition of 1.5 mM $[Ca^{2+}]_o$ but did not show any effect under the nominally $Ca^{2+}-free$ condition. Even after the store depletion with $30{\mu}M$ 2,5-di-tert- butylhydroquinone (BHQ) or $30{\mu}M$ ATP, LPC could still increase the $[Ca^{2+}]_i$ under the condition of 1.5 mM $[Ca^{2+}]_o.$ The time required to increase [$Ca{2+}$]i (about 1 minute) was longer than that for ATP-induced $[Ca^{2+}]_i$ increase $(10{\sim}30\;seconds).$ LPC-induced $[Ca^{2+}]_i$ increase was completely blocked by $1{\mu}M\;La^{3+}.$ Transient receptor potential channel(trpc) 4 mRNA was detected with RT-PCR. From these results, we suggest that LPC increased $[Ca^{2+}]_i$ via the increase of $Ca^{2+}$ influx through the $Ca^{2+}$ routes which exist in the plasma membrane.