Park, Moung-Won;Kim, Kwang-Hyuk;Kim, So-Hee;Park, Kin-Young
Preventive Nutrition and Food Science
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제2권3호
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pp.241-245
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1997
Inhibitory effects of kimchi extracts on arcinogen-induced cytotoxicity and transformation in C3H/10T1/2 cells were studied. The methanol extract (500㎍/ml) of fresh (unfermented kimchi), and 3-week-fermented kimchi (properly ripened kimchi at 5℃) inhibited 3-methylcholanthrene (MCA)-induced cytotoxicity in C3H/10T1/2 cells by 84 and 99%, respectively. The inhibitory effect of 3-week-fermented kimchi was higher than that of the fresh kimchi at same test condition. The methanol soluble fraction, and haxane extract of 3-week fermented kimchi also surpressed the cytotoxicity of FC3H/10T1/2 cells mediated by 7,12-dimethylbenz[a]anthracene(DMBA) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG). Furthermore, MCA-induced transformation of C3H/10T/1/2 cells was significantly inhibited by the methanol soluble fraction of 3-week fermented kimchi. With these results, we suggest that kimchi might have anticarcinogenic effect in part due to inhibition of carcinogen-induced cytotoxicity and transformation of C3H/10T/1/2 cells.
The anticarcinogenic effects of the methanol extracts from leek (buchu in Korean) kimchi and Korean cabbage kimchi were evaluated using cytotoxicity and transformation tests in C3H/10T1/2 cells. Various fractions of the 6-day fermented leek kimchi at 15$^{\circ}C$, hexane, methanol soluble, dichloromethane, ethyl acetate, butanol and aqueous fraction, were also studied in the same system. The inhibitory effect of the leek kimchi(6-day fermented at 15$^{\circ}C$, pH 4.29) was higher than that of the Korean cabbage kimchi(4-day fermented at 15$^{\circ}C$, pH 4.21) on the cytotoxicity induced by 3-methylcholanthrane (MCA) in the C3H/10T1/2 cell system. While the MCA-treated culture(control) formed 21.0 foci of type II plus III in C3H/10T1/2 cells, 100$\mu\textrm{g}$/ml of the methanol extract of the leek kimchi and that of the 4-day fermented Korean cabbage kimchi treated cultures reduced the formation of type II plus III foci to 7.4 and 11.3, respectively. Among the fractions of the leek kimchi, the dichloromethane fraction showed the highest inhibitory effect on MCA-induced cytotoxicity in C3H/10T1/2 cells. Fifty $\mu\textrm{g}$/ml of dichloromethane fraction from the leek kimchi suppressed the MCA-induced cytotoxicity by 77%. On the transformation test using MCA, the dichloromethane fraction considerably reduced the formation of type II plus III foci, especially thpe III foci. When 50$\mu\textrm{g}$/ml of dichloromethane fraction from the leek kimchi was treated, the numbers of type III foci mediated by MCA were decreased to 1.7 compared to 10 for the control. These results indicate that leek kimchi has stronger anticarcinogenic effects than Korean cabbage kimchi and that the dichloromethane fraction of the leek kimchi may contain the major compound(s) that suppress the carcinogenesis in the eukaryotic cells.
Inhibitory effects of cockle extracts on carcinogen-induced cytotoxicity in C3H/10T1/2 cells were studied. Soup (62$\mu\textrm{g}$/mL), solubility (28$\mu\textrm{g}$/mL) and liposolubility (9 $\mu\textrm{g}$/mL) of the cockle inhibited 3-methyl-cholanthrene(MCA)-induced cytotoxicity in C3H/10T1/2 cells by 53 and 94%, respectively. These results suggest that the extracts cockle might have anticarcinogen-induced cytotoxicity of C3H/10T1/2 cells. The effects of cockle extracts on the immune response related to its antitumor activity in vitro and in vivo were investigated. The cockle extracts showed a direct cytotoxic effect on sarcoma-180 cells, tumor cells in vitro. Soup (0.49 mg/mL), solubility (0.11 mg/mL) and liposolubiliy (0.05 mg/mL) of the cockle markedly decreased the total numbers of sarcoma-180 cells, but not their viability. The phagocytic acitivity of peritoneal macrophage of mice was significantly augmented by these extracts of the cockle compared with that of control in vivo. These extracts also raised the phagocuytic index, indicating that the number of phagocytize dmicrobes per macrophage increased. Thus, cockle extracts might show a antitumor activity by enhancing the phagocytic cell activities.
Antimutagenic and anticarcinogenic effects of alginic acids extracted from sea mustard(SM) and sporophyII of sea mustard(SSM) were studied by Salmonella typhimurium assay system and cytotoxicity and transformation tests using C3H/10T1/2 cells, respectively. alginic acid-SM andalginic acid-SSM showed antimutagenic effects on aflatoxin B1(AFB1)and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Salmonella typhimurium TA100 strain. The antimutagenic effect showed concentration dependent manner. At the 2.5mg/plate concentration , alginic acid-SSM exhibited 92% antimutagenicity against AFB1 ,while alginic acid-SM revealed 54% antimutagenictity ,s howing effectiveness of the alginic acid-SSM for the antimutagenicity. Alginic acidSSm also significantly decreased the cytotoxicity induced by 3-methylcholanthrene(MCA) and MNNG in C3H/10T1/2 cells (p<0.05). The type II and type IIItransformation foci formation by MCA and MNNG were also decreased when the alginic acid-SSM was treated, indicating that the alginic acid -SSM reduces the carcinogenesis induced by these carcinogens. The MCA-treated culture produced 10.5foci of type II +III in C3H/10T1/2 cells, however, MCA + 0.2mg/ml alginic acid-SSM treated culture formed only 1.8 foci of the types II + III in C3H/10T1/2 cells, however , MCA+0.2mg/ml alginic acid -SSM treated culture formed only 1.8 foci of the types II+ III(p<0.05). While MNNG-treated culture formed 13.0 foci, MNNG + 0.2mg/ml alginic acid -SSM treated one produced 3.0 foci of type II+III(p<0.05). These results suggest that alginic acid-SSM can effectively prevent the mutagenicities and also decrease cytotoxicity and transformation induced by some carcinogens.
Although previous studies have demonstrated that BMP9 is highly capable of inducing osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells, the molecular mechanism involved remains to be fully elucidated. In this study, we showed that BMP9 simultaneously promotes the activation of Smad1/5/8, p38 and ERK1/2 in C3H10T1/2 cells. Knockdown of Smad4 with RNA interference reduced nuclear translocation of Smad1/5/8, and disrupted BMP9-induced osteogenic differentiation. BMP9-induced osteogenic differentiation was blocked by p38 inhibitor SB203580, whereas enhanced by ERK1/2 inhibitor PD98059. SB203580 decreased BMP9-activated Smads singling, and yet PD98059 stimulated Smads singling in C3H10T1/2 cells. The effects of inhibitor were reproduced with adenovirus expressing siRNA targeted p38 and ERK1/2, respectively. Taken together, our findings revealed that Smads, p38 and ERK1/2 are involved in BMP9-induced osteogenic differentiation. Also, it is noteworthy that p38 and ERK1/2 may play opposing regulatory roles in mediating BMP9-induced osteogenic differentiation of C3H10T1/2 cells.
Exposure to ultraviolet light (UV) induces apoptosis in mammalian cells, The caspase group of proteases is required for the appotosis. This pathway is initiated by a release of cytochrome c from the mitochondria into the cytosol. Several Bcl-2 family proteins can regulate the release of cytochrome c by stabilizing the mitochondrial membrane. Here we show that expression of the endogenous bcl-xL was strongly downregulated in NIH3T3 cells within 2 h after UV-C irradiation, and that of bax was upregulated from 8 h after irradiation. Apoptosis was induced in more than 50% of the NIH3T3 cells 48 h after irradiation. Constitutive overexpression of bcl-xL in NIH3T3 cells protected the UV-induced apoptosis by preventing the loss of mitochondrial membrane potential and the activation of caspase 9. There results suggest that downregulation of Bcl-xL is relevant to UV-induced apoptosis of tibroblasts.
Fat mass and obesity-associated (FTO) gene helps to regulate energy homeostasis in mammals by controlling energy expenditure. In addition, FTO functions in the regulation of obesity and adipogenic differentiation; however, a role in osteogenic differentiation is unknown. This study investigated the effects of FTO on osteogenic differentiation of C3H10T1/2 cells and the underlying mechanism. Expression of osteogenic and endoplasmic reticulum (ER) stress markers were characterized by reverse-transcriptase polymerase chain reaction and western blotting. Alkaline phosphatase (ALP) staining was performed to assess ALP activity. BMP2 treatment increased mRNA expression of osteogenic genes and FTO. Overexpression of FTO increased expression of the osteogenic genes distal-less homeobox5 (Dlx5) and runt-related transcription factor 2 (Runx2). Activation of adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK) increased FTO expression, and there was a positive feedback loop between FTO and p-AMPK. p-AMPK and FTO induced mild ER stress; however, tunicamycin-induced severe ER stress suppressed FTO expression and AMPK activation. In summary, FTO induces osteogenic differentiation of C3H10T1/2 cells upon BMP2 treatment by inducing mild ER stress via a positive feedback loop with p-AMPK. FTO expression and AMPK activation induce mild ER stress. By contrast, severe ER stress inhibits osteogenic differentiation by suppressing FTO expression and AMPK activation.
Vanadium is an essential trace element but has not been identified with a specific biogical role. To study the direct effects of vanadium on osteoblast, we incubated murin osteoblast-like (MC3T3-El) cells with various corcentration of vanadium oxide & sodium orthovanadate. This study was designed to investigate the effect of vanadium on DNA synthesis, alkaline phosphatase (ALP) activity, cAMP formation responsive to parathormone(PTH) and type I $\alpha$ 2 collagen ribonucleic acid (mRNA) level in murin osteoblast-like (MC3T3-El) cells. The cells were cultured in $\alpha-minimal$ essential medium$(\alpha-MEM)$ supplemented with $10\%$ fetal bovine serum (FBS) and then changed to $0.1\%$ FBS with various concenoation of vanadium oxide & sodium orthovanadate. Quiescent cultured MC3T3-El cells incubated for 24 hours with 2,5,10,15,20 ${\mu}M$ vanadium oxide incorporated $[^3H]Thymidine;$ every concentration showed increases in $[^3H]Thymidine$ incorporations dose dependant manner, the greatest response occurred at $20{\mu}M$. Quiescent cultured MC3T3-E1 cells incubated for 3days with 2,5,10,15,20 ${\mu}M$ vanadium oxide, for 2days with sodium orthovanadate and alkaline phosphatase was assayed with disodium phenyl phosphate as substrate. Vanadium oxide increased the alkaline phosphatase content in MC3T3-El cells at $2{\mu}M\;&\;6{\mu}M$ ; the greatest response occurred at $2{\mu}M$. But decreased at other content sodium orthovanadate increased alkaline phosphatase content in MC3T3-El cells at all concenoation ; the greatest response occurred at $4{\mu}M$. Quiescent cultured MC3T3-El cells incubated for 3days with $5,10{\mu}M$ vanadium oxide , with $5,8{\mu}M$ sodium orthovanadate and cAMP formation was measured by Radioimmunoassay(RIA). Vanadium oxide & sodium orthovanadate showed the tendency of inhibitory effects on cAMP responsiveness to PTH in MC3T3-El cells. Quiescent cultured MC3T3-El cells incubated for 24hours with $10,20{\mu}M$ vanadium oxide, with $5,10{\mu}M$ sodium orthovanadate and Type I $\alpha$ 2 collagen ribonucleic acid (mRNA) expression was studied by Nothern blot analysis. Northern blot analysis of vanadium oxide treated cells showed decreasing effects 0& sodium orthovanadate revealed increasing effects in type I $\alpha$ 2 collagen ribonucleic acid (mRNA) level.
Polymer:nonfullerene solar cells with an inverted-type device structure were fabricated by employing the bulk heterojunction (BHJ) active layers, which are composed of poly[(2,6-(4,8-bis(5-(2-ethylhexyl)thiophene-2-yl)-benzo[1,2-b:4,5-b']dithiophene))-alt-(5,5-(1',3'-di-2-thienyl-5',7-bis(2-ethylhexyl)benzo[1',2'-c:4',5'-c']dithiophene-4,8-dione))] (PBDB-T) and 3,9-bis(6-methyl-2-methylene-(3-(1,1-dicyanomethylene)-indanone))-5,5,11,11-tetrakis(4-hexylphenyl)-dithieno[2,3-d:2',3-d']-s-indaceno[1,2-b:5,6-b']dithiophene (IT-M). The BHJ layers were formed on a pre-patterned indium-tin oxide (ITO)-coated glass substrate by spin-coating using the blend solutions of PBDB-T and IT-M. The solar cell performances were investigated with respect to the cell position on the ITO-glass substrates. In addition, the short-term shelf lifetime of solar cells was tested by storing the PBDB-T:IT-M solar cells in a glovebox filled with inert gas. The results showed that the performance of solar cells was relatively higher for the cells close to the center of substrates, which was maintained even after storage for 24 h. In particular, the PCE of PBDB-T:IT-M solar cells was marginally decreased after storage for 24 h owing to the slightly reduced fill factor, even though the open circuit voltage was unchanged after 24 h.
Caicedo Rivas, R.E.;Nieto, M. Paz-Calderon;Kamiyoshi, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권4호
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pp.487-499
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2016
The aim of the present study was to examine the effects of testosterone (T) and estradiol-$17{\beta}$ ($E_2$) on the production of progesterone ($P_4$) by granulosa cells, and of the $E_2$ on the production of $P_4$ and T by theca internal cells. In the first experiment, granulosa cells isolated from the largest ($F_1$) and third largest ($F_3$) preovulatory follicle were incubated for 4 h in short-term culture system, $P_4$ production by granulosa cells of both $F_1$ and $F_3$ was increased in a dose-dependent manner by ovine luteinizing hormone (oLH), but not T or $E_2$. In the second experiment, $F_1$ and $F_3$ granulosa cells cultured for 48 h in the developed monolayer culture system were recultured for an additional 48 h with increasing doses of various physiological active substances existing in the ovary, including T and $E_2$. Basal $P_4$ production for 48 h during 48 to 96 h of the cultured was about nine fold greater by $F_1$ granulosa cells than by $F_3$ granulosa cells. In substances examined oLH, chicken vasoactive intestinal polypeptide (cVIP) and T, but not $E_2$, stimulated in a dose-dependent manner $P_4$ production in both $F_1$ and $F_3$ granulosa cells. In addition, when the time course of $P_4$ production by $F_1$ granulosa cells in response to oLH, cVIP, T and $E_2$ was examined for 48 h during 48 to 96 h of culture, although $E_2$ had no effect on $P_4$ production by granulosa cells of $F_1$ during the period from 48 to 96 h of culture, $P_4$ production with oLH was found to be increased at 4 h of the culture, with a maximal 9.14 fold level at 6 h. By contrast, $P_4$ production with cVIP and T increased significantly (p<0.05) from 8 and 12 h of the culture, respectively, with maximal 6.50 fold response at 12 h and 6, 48 fold responses at 36 h. Furthermore, when $F_1$ granulosa cells were precultured with $E_2$ for various times before 4 h culture with oLH at 96 h of culture, the increase in $P_4$ production in response to oLH with a dose-related manner was only found at a pretreatment time of more than 12 h. In the third experiment, theca internal cells of $F_1$, $F_2$ and the largest third to fifth preovulatory follicles ($F_{3-5}$) were incubated for 4 h in short-term culture system with increasing doses of $E_2$. The production of $P_4$ and T by theca internal cells were increased with the addition of $E_2$ of $10^{-6}M$. These increases were greater in smaller follicles. These results indicate that, in granulosa cells of the hen, T may have a direct stimulatory action in the long term on $P_4$ production, and on $E_2$ in long-term action which may enhance the sensitivity to LH for $P_4$ production, and thus, in theca internal cells, $E_2$ in short term action may stimulate the production of $P_4$ and T.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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