Four halophilic bacteria were isolated from a salt water tank of more than 25% above salinity used for production of salt. HJS1 and HJS6 strains were identified as having ${\beta}$-glucosidase producing capabilities at high salinity. ${\beta}$-Glucosidase produced from these bacterial strains showed the best activity at 56-79 U/ml in NaCl (0-5%), showing the highest ${\beta}$-glucosidase activity at NaCl 3%. A salt tolerant ${\beta}$-glucosidase can maintain at least 75% activity of the enzyme in 0-20% NaCl concentration. The 16S rRNA gene sequences of strains HJS1 and HJS6 shows 99.8% similarity with Roseivivax roseus $BH87090^T$. Those sequences were registered as AB971835 and AB971836 in the NCBI GenBank. DNA-DNA hybridization test revealed that both strains showed 90.1 to 90.3% hybridization values with R. roseus $BH87090^T$, which was the closest phylogenetic neighbor. Major Cellular fatty acids of strains HJS1 and HJS6 were $C_{16:0}$, $C_{18:1}$${\omega}7c$, $C_{19:0}$ cyclo ${\omega}8c$ and 11-methyl $C_{18:1}$ and the major quinone was Q-10. Their fatty acid composition and quinone were very similar to Roseivivax roseus $BH87090^T$. Meanwhile, Roseivivax roseus $BH87090^T$ did not produce any ${\beta}$-glucosidase. Based on the molecular and chemotaxonomic properties, strains HJS1 and HJS6 were identified as members of Roseivivax roseus.
Lacava Paulo Teixeira;Araujo Welington Luiz;Azevedo Joao Lucio
Journal of Microbiology
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v.45
no.1
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pp.11-14
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2007
Over the last few years, the endophytic bacterial community associated with citrus has been studied as an important component interacting with Xylella fastidiosa, the causal agent of citrus variegated chlorosis(CVC). This bacterium may also colonize some model plants, such as Catharanthus roseus and Nicotiana clevelandii. In the present study, we compared the endophytic colonization of Citrus sinensis and Catharanthus rose us using the endophytic bacteria Klebsiella pneumoniae. We chose an appropriate strain, K. pneumoniae 342 (Kp342), labeled with the GFP gene. This strain was inoculated onto seedlings of C. sinensis and C. roseus. The isolation frequency was determined one week after the inoculation and the endophytic colonization of K. pneumoniae was observed using fluorescence microscopy. Although the endophytic bacterium was more frequently isolated from C. roseus than from C. sinensis, the colonization profiles for both host plants were similar, suggesting that C. roseus could be used as a model plant to study the interaction between endophytic bacteria and X. fastidiosa.
We established an efficient plant regeneration system for Catharanthus roseus L. (G.) Don through somatic embryogenesis. Embryogenic callus was induced from hypocotyl of seed germinated in vitro. Somatic embryogenesis in Catharanthus has been categorized into three distinct stages: (1) initiation and proliferation of embryo; (2) maturation, and; (3) germination or plantlet conversion. Beside plant growth regulators, various stages of embryogenesis were screened for their response to a wide variety of factors (pH, gelrite, light, sugar alcohols, polyethyleneglycol and amino acids), which affect embryogenesis. All of the tested factors had a small to marked influence on embryogeny and eventual conversion to plantlets. The plantlets were acclimatized successfully in a greenhouse. To our knowledge, this is the first report describing a detailed study of various cultural factors which regulate embryogenesis in C. roseus. The results discussed in this paper may be used in mass propagation to produce medicinal raw material, and the embryo precursor cells could be used in genetic modification programmes that aim to improve the alkaloid yield as well.
Chung, Ill-Min;Park, Han-Young;Ali, Mohd;San, Ka Yiu;Peebles, Christie A. M.;Hong, Seung-Beom;Ahmad, Ateeque
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.28
no.2
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pp.229-234
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2007
One new compound, 3,7,11,19,23,27-hexamethyl-15-hydroxymethylene-n-octacos-5,8,20-triene-10β,18α- diol-10β-D-glucopyranoside (1), along with the three known compounds, 3-epibetulinic acid (2), n-pentadecanyl octa-dec-19-en-oate (3) and β-sitosterol (4) were isolated from the methanolic extract of the cultured Catharanthus roseus hairy roots. The structures of the one new and three known compounds were elucidated using one- and two-dimensional NMR in combination with IR, EI/MS, FAB/MS. To the best of our knowledge, 3,7,11,19,23,27-hexamethyl-15-hydroxymethylene-n-octacos-5,8,20-triene-10β,18α-diol-10β-D-glucopyranoside, 3-epibetulinic acid and n-pentadecanyl octa-dec-19-en-oate were identified for the first time from the hairy roots of C. roseus.
Vinblastine, an anticancer agent was produced by chemical coupling of two different monomeric indole alkaloids, vinblastine and catharanthine in the presence of ferric ion. Vindoline was efficiently extracted from the leaves of vinca (Cafharanthus roseus) by using supercritical carbon dioxide, whereas catharanthine was chemically extracted from the in vitro cultured hairy roots. The extracted crude monomeric precursors were purified by a two-step preparative TLC. The coupling reaction was carried out in the 0.1M glycine buffer(pH 2.0, 5ml) containing 40mM FeC13 with purified vindoline(0.3mg) and catharanthine(0.3mg) at 4$^{\circ}C$. The production yields (weight %) of vinblastine and 3', 4'-anhy-drovinblastine in the products were 23.2 and 26.0, respectively. The produced vinblastine was confirmed by FAB-MS.
A disease causing blights on leaves, stems, flowers, and pods of Vinca (Catharanthus roseus L.) was occurred in Aug. 2003 in Chengdo Peach Experiment Station. A species of Phytophthora was isolated from the diseased tissues. The causal fungus was identified as Phytophthora nicotianae on the basis of mycological characteristics and pathogenicity. Sporangia were ovoid to spherical, noncaducous, prominently papillate and averaged 38.0${\times}$31.0 ${\mu}{\textrm}{m}$ in dimension. Chlamydospores were abundantly produced on agar media and sized about 30.5 fm in diameter, The fungus was heterothallic and Al mating type. Oospores were measured 23.1 ${\mu}{\textrm}{m}$ in size. Optimum temperature for growth of the fungus was 25 to 3$0^{\circ}C$. This is the first report of occurrence of foliage blight of Vinca caused by P. nicotianae in Korea.
The present research work reports in-vitro anti-cancer activity of biologically synthesized ZnO nanoparticles (ZnO NPs) against human carcinoma cells viz SCC-40, SK-MEL-2 and SCC-29B using Sulforhodamine-B (SRB) Assay. ZnO NPs were synthesized by a unique and novel biological route using Temperature-gradient phenomenon where the extract of combination of Catharanthus roseus (L.) G. Don (C. roseus), Azadirachta indica (A. indica), Ficus religiosa (F. religiosa) and NaOH solution were used as synthesis medium. The morphology of the ZnO NPs was characterized by Transmission Electron Microscopy (TEM). TEM images reveal that particle size of the samples reduces from 76 nm to 53 nm with the increase in reaction temperature and 68 nm to 38 nm with the increase in molar concentration of NaOH respectively. XRD study confirms the presence of elements and reduction in crystallite size with increase in reaction temperature and NaOH concentration. The diffraction peaks show broadening and a slight shift towards lower Bragg angle ($2{\theta}$) which represents the reduction in crystallite size as well as presence of uniform strain. The FTIR spectra of the extract show transmittance peak fingerprint of Zn-O bond and presence of bioactive molecules These NPs exhibit inhibition greater than 50% for SCC-40, SK-MEL-2 and SCC-29B cell lines and more than 50% cell kill for SCC-29B cells at concentrations < $80{\mu}g/ml$. Nanoparticles with smallest size have shown better anti-cancer activity and peculiar cell-selectivity. The combination of extracts of these plants with ZnO NPs can be used in targeted drug delivery as an effective anti-cancer agent, a potential application in cancer treatment.
This study was conducted to investigate diversity of orchid endophytic fungi from roots of two terrestrial orchids, Cypripedium japonicum and Cypripedium macranthum in Korea. The endophytic fungi were identified using morphological and DNA sequences isolated from the roots. Totally, 11 taxa of the endophytic fungi were identified from the roots of C. japonicum and 15 taxa from C. macranthum. Three species of the fungi were common in both host species; Leptodontidium orchidicola, Humicola fuscoatra var. fuscoatra, Umbelopsis dimorpha. Six species of the fungal isolates were the first report in Korea; Oidiodendron echinulatum, Pseudogymnoascus roseus, Geomyces vinaceus, Cryptosporiopsis ericae, U. dimorpha, Chaetomium cupreum.
Lacava, Paulo Teixeira;Li, Wenbin;Araujo, Welington Luiz;Azevedo, Joao Lucio;Hartung, John Stephen
Journal of Microbiology
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v.45
no.5
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pp.388-393
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2007
Citrus variegated chlorosis (CVC) is a disease of the sweet orange [Citrus sinensis (L.)], which is caused by Xylella fastidiosa subsp. pauca, a phytopathogenic bacterium that has been shown to infect all sweet orange cultivars. Sweet orange trees have been occasionally observed to be infected by Xylella fastidiosa without evidencing severe disease symptoms, whereas other trees in the same grove may exhibit severe disease symptoms. The principal endophytic bacterial species isolated from such CVC-asymptomatic citrus plants is Curtobacterium flaccumfaciens. The Madagascar periwinkle [Citrus sinensis (L.)] is a model plant which has been used to study X. fastidiosa in greenhouse environments. In order to characterize the interactions of X. fastidiosa and C. flaccumfaciens, periwinkle plants were inoculated separately with C. flaccumfaciens, X. fastidiosa, and both bacteria together. The number of flowers produced by the plants, the heights of the plants, and the exhibited disease symptoms were evaluated. PCR-primers for C. flaccumfaciens were designed in order to verify the presence of this endophytic bacterium in plant tissue, and to complement an existing assay for X. fastidiosa. These primers were capable of detecting C. flaccumfaciens in the periwinkle in the presence of X. fastidiosa. X. fastidiosa induced stunting and reduced the number of flowers produced by the periwinkle. When C. flaccumfaciens was inoculated together with X. fastidiosa, no stunting was observed. The number of flowers produced by our doubly- inoculated plants was an intermediate between the number produced by the plants inoculated with either of the bacteria separately. Our data indicate that C. flaccumfaciens interacted with X. fastidiosa in C. roseus, and reduced the severity of the disease symptoms induced by X. fastidiosa. Periwinkle is considered to be an excellent experimental system by which the interaction of C. flaccumfaciens and other endophytic bacteria with X. fastidiosa can be studied.
Four strains of Sporobolomyces genera were isolated from soy sauce mashes at the fermentating and aging periods and identified. Their salt-resistance and color formation were examined in order to improve the color density and nutrition of red pepper paste preparations. The results obtained were as follows; a) The strain L1, L2, L3 and L4 isolated were identified as Sporobolomyces gracilis, Sporobolomyces roseus, Sporobolomyes gracilis and Sporobolomyces roseus respectively. b) The yeasts isolated were grown on the media containing $0{\sim}10$ percent of sodium chloride but their growth were almost restrained on the media containing $15{\sim}18$ per cent of sodium chloride. And the strain L2 and L3 were more salt-resistant as compared with L1 and L4. c) The strain L3 were the best among the 4 strains of yeasts comparison with their salt-resistance, color and flavour formation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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