소금생산을 위해 25% 이상의 함수를 저장해 놓는 염전의 해주로부터 호염성 세균 4균주를 분리하고 높은 염분농도에서도 ${\beta}$-glucosidase를 생성하는 HJS1과 HJS6 균주를 선발하였다. 이들 ${\beta}$-glucosidase 생성세균은 NaCl 1-10%에서 70-79U/mg의 최적 활성을 나타내었고, NaCl 3%에서 최대 활성을 나타내었으며 NaCl 0-20% 농도에서 최대 효소 활성대비 75%이상의 효소활성을 유지하는 내염성 ${\beta}$-glucosidase를 생성하는 것으로 확인되었다. 내염성 ${\beta}$-glucosidase 생성 HJS1과 HJS6 균주의 16S rRNA 유전자 염기서열을 검토한 결과, Roseivivax roseus $BH87090^T$ (FJ897782)와 99.8%의 상동성을 나타내었고 상기 균주들의 염기서열은 NCBI GenBank에 각각 AB971835와 AB971836로 등록하였다. 계통학적으로 근연종인 Roseivivax roseus $BH87090^T$와의 DNA-DNA 상동성을 비교 검토한 결과, 90.1-90.3%를 나타내었다. 이들 균주의 주요 균체지방산은 $C_{16:0}$, $C_{18:1}$${\omega}7c$, $C_{19:0}$ cyclo ${\omega}8c$ 그리고 11-methyl $C_{18:1}$${\omega}7c$를 함유하고 Quinone종은 Q-10로 근연종 Roseivivax roseus $BH87090^T$ 균주와 동일한 특징을 나타내어 Roseivivax roseus로 동정되었다. 반면, 비교 균주 Roseivivax roseus $BH87090^T$는 ${\beta}$-glucosidase 생성하지 않는 것으로 나타났다. 본 연구에서 분리된 Roseivivax roseus HJS1과 HJS6 균주는 내염성 ${\beta}$-glucosidase 효소 개발을 위한 유전자원으로 활용 가능하리라 사료된다.
Lacava Paulo Teixeira;Araujo Welington Luiz;Azevedo Joao Lucio
Journal of Microbiology
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제45권1호
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pp.11-14
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2007
Over the last few years, the endophytic bacterial community associated with citrus has been studied as an important component interacting with Xylella fastidiosa, the causal agent of citrus variegated chlorosis(CVC). This bacterium may also colonize some model plants, such as Catharanthus roseus and Nicotiana clevelandii. In the present study, we compared the endophytic colonization of Citrus sinensis and Catharanthus rose us using the endophytic bacteria Klebsiella pneumoniae. We chose an appropriate strain, K. pneumoniae 342 (Kp342), labeled with the GFP gene. This strain was inoculated onto seedlings of C. sinensis and C. roseus. The isolation frequency was determined one week after the inoculation and the endophytic colonization of K. pneumoniae was observed using fluorescence microscopy. Although the endophytic bacterium was more frequently isolated from C. roseus than from C. sinensis, the colonization profiles for both host plants were similar, suggesting that C. roseus could be used as a model plant to study the interaction between endophytic bacteria and X. fastidiosa.
We established an efficient plant regeneration system for Catharanthus roseus L. (G.) Don through somatic embryogenesis. Embryogenic callus was induced from hypocotyl of seed germinated in vitro. Somatic embryogenesis in Catharanthus has been categorized into three distinct stages: (1) initiation and proliferation of embryo; (2) maturation, and; (3) germination or plantlet conversion. Beside plant growth regulators, various stages of embryogenesis were screened for their response to a wide variety of factors (pH, gelrite, light, sugar alcohols, polyethyleneglycol and amino acids), which affect embryogenesis. All of the tested factors had a small to marked influence on embryogeny and eventual conversion to plantlets. The plantlets were acclimatized successfully in a greenhouse. To our knowledge, this is the first report describing a detailed study of various cultural factors which regulate embryogenesis in C. roseus. The results discussed in this paper may be used in mass propagation to produce medicinal raw material, and the embryo precursor cells could be used in genetic modification programmes that aim to improve the alkaloid yield as well.
Chung, Ill-Min;Park, Han-Young;Ali, Mohd;San, Ka Yiu;Peebles, Christie A. M.;Hong, Seung-Beom;Ahmad, Ateeque
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제28권2호
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pp.229-234
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2007
One new compound, 3,7,11,19,23,27-hexamethyl-15-hydroxymethylene-n-octacos-5,8,20-triene-10β,18α- diol-10β-D-glucopyranoside (1), along with the three known compounds, 3-epibetulinic acid (2), n-pentadecanyl octa-dec-19-en-oate (3) and β-sitosterol (4) were isolated from the methanolic extract of the cultured Catharanthus roseus hairy roots. The structures of the one new and three known compounds were elucidated using one- and two-dimensional NMR in combination with IR, EI/MS, FAB/MS. To the best of our knowledge, 3,7,11,19,23,27-hexamethyl-15-hydroxymethylene-n-octacos-5,8,20-triene-10β,18α-diol-10β-D-glucopyranoside, 3-epibetulinic acid and n-pentadecanyl octa-dec-19-en-oate were identified for the first time from the hairy roots of C. roseus.
Vinblastine, an anticancer agent was produced by chemical coupling of two different monomeric indole alkaloids, vinblastine and catharanthine in the presence of ferric ion. Vindoline was efficiently extracted from the leaves of vinca (Cafharanthus roseus) by using supercritical carbon dioxide, whereas catharanthine was chemically extracted from the in vitro cultured hairy roots. The extracted crude monomeric precursors were purified by a two-step preparative TLC. The coupling reaction was carried out in the 0.1M glycine buffer(pH 2.0, 5ml) containing 40mM FeC13 with purified vindoline(0.3mg) and catharanthine(0.3mg) at 4$^{\circ}C$. The production yields (weight %) of vinblastine and 3', 4'-anhy-drovinblastine in the products were 23.2 and 26.0, respectively. The produced vinblastine was confirmed by FAB-MS.
2003년 8월 청도시험장의 화분재배한 일일초에서 잎, 꽃, 꼬투리 및 줄기가 검게 시들고 말라죽는 증상으로부터 병원균을 분리$.$동정한 결과 Phytophthora nicotianae로 동정되었다 병원균의 형태적 특성은 뚜렷한 유두돌기를 가지고 비탈락성인 원형 혹은 난형의 유주자낭을 형성하였고, 크기는 31.0${\times}$38.0$\mu\textrm{m}$였고 다량의 후막포자를 형성하였으며 크기는 평균 직경이 30.5 $\mu\textrm{m}$였다 유성생식형은 자웅이주로 Al mating type이 관찰되었고 난포자의 크기는 직경 23.1 $\mu\textrm{m}$였다. 균사의 생육적온은 25∼3$0^{\circ}C$였다. 이상과 같이 국내 최초의 P. nicorianae에 의한 일일초 역병의 발생을 보고하는 바이다.
The present research work reports in-vitro anti-cancer activity of biologically synthesized ZnO nanoparticles (ZnO NPs) against human carcinoma cells viz SCC-40, SK-MEL-2 and SCC-29B using Sulforhodamine-B (SRB) Assay. ZnO NPs were synthesized by a unique and novel biological route using Temperature-gradient phenomenon where the extract of combination of Catharanthus roseus (L.) G. Don (C. roseus), Azadirachta indica (A. indica), Ficus religiosa (F. religiosa) and NaOH solution were used as synthesis medium. The morphology of the ZnO NPs was characterized by Transmission Electron Microscopy (TEM). TEM images reveal that particle size of the samples reduces from 76 nm to 53 nm with the increase in reaction temperature and 68 nm to 38 nm with the increase in molar concentration of NaOH respectively. XRD study confirms the presence of elements and reduction in crystallite size with increase in reaction temperature and NaOH concentration. The diffraction peaks show broadening and a slight shift towards lower Bragg angle ($2{\theta}$) which represents the reduction in crystallite size as well as presence of uniform strain. The FTIR spectra of the extract show transmittance peak fingerprint of Zn-O bond and presence of bioactive molecules These NPs exhibit inhibition greater than 50% for SCC-40, SK-MEL-2 and SCC-29B cell lines and more than 50% cell kill for SCC-29B cells at concentrations < $80{\mu}g/ml$. Nanoparticles with smallest size have shown better anti-cancer activity and peculiar cell-selectivity. The combination of extracts of these plants with ZnO NPs can be used in targeted drug delivery as an effective anti-cancer agent, a potential application in cancer treatment.
본 연구에서는 경기도 포천과 강원도 춘천에 자생하는 광릉요강꽃과 강원도 삼척에서 자생하는 복주머니란의 뿌리에서 내생균을 순수 분리하였고, 분리된 균주의 ITS 부위의 염기서열을 이용하여 계통 분석하였다. 그 결과 광릉요강꽃에서는 11종의 균주가 분리되었고, 복주머니란에서는 15종의 균주가 분리되었으며, Leptodontidium orchidicola, Humicola fuscoatra var. fuscoatra, Umbelopsis dimorpha 등의 균주는 공통으로 분리되었다. 분리된 균주 중 Oidiodendron echinulatum, Pseudogymnoascus roseus, Geomyces vinaceus, Cryptosporiopsis ericae, Umbelopsis dimorpha, Chaetomium cupreum 은 국내 미기록종으로 확인하였다.
Lacava, Paulo Teixeira;Li, Wenbin;Araujo, Welington Luiz;Azevedo, Joao Lucio;Hartung, John Stephen
Journal of Microbiology
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제45권5호
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pp.388-393
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2007
Citrus variegated chlorosis (CVC) is a disease of the sweet orange [Citrus sinensis (L.)], which is caused by Xylella fastidiosa subsp. pauca, a phytopathogenic bacterium that has been shown to infect all sweet orange cultivars. Sweet orange trees have been occasionally observed to be infected by Xylella fastidiosa without evidencing severe disease symptoms, whereas other trees in the same grove may exhibit severe disease symptoms. The principal endophytic bacterial species isolated from such CVC-asymptomatic citrus plants is Curtobacterium flaccumfaciens. The Madagascar periwinkle [Citrus sinensis (L.)] is a model plant which has been used to study X. fastidiosa in greenhouse environments. In order to characterize the interactions of X. fastidiosa and C. flaccumfaciens, periwinkle plants were inoculated separately with C. flaccumfaciens, X. fastidiosa, and both bacteria together. The number of flowers produced by the plants, the heights of the plants, and the exhibited disease symptoms were evaluated. PCR-primers for C. flaccumfaciens were designed in order to verify the presence of this endophytic bacterium in plant tissue, and to complement an existing assay for X. fastidiosa. These primers were capable of detecting C. flaccumfaciens in the periwinkle in the presence of X. fastidiosa. X. fastidiosa induced stunting and reduced the number of flowers produced by the periwinkle. When C. flaccumfaciens was inoculated together with X. fastidiosa, no stunting was observed. The number of flowers produced by our doubly- inoculated plants was an intermediate between the number produced by the plants inoculated with either of the bacteria separately. Our data indicate that C. flaccumfaciens interacted with X. fastidiosa in C. roseus, and reduced the severity of the disease symptoms induced by X. fastidiosa. Periwinkle is considered to be an excellent experimental system by which the interaction of C. flaccumfaciens and other endophytic bacteria with X. fastidiosa can be studied.
고추장의 영양강화와 색도를 증가시킬 목적으로 발효기 및 후속기의 간장덧으로부터 적색효모인 Sporobolomyces 속 4주를 분리동정 하고 내염성및 향기의 생성을 실험한 결과는 아래와 같다. (1) 분리된 4주의 효모를 동정한 결과 L1과 L4는 Sporobolomyces gracilis 형, L2와 L3은 Sporobolomyces roseus 형으로 각각 동정되었다. (2) 분리효모의 모두가 식엽 $0{\sim}10%$ 함유배지에서는 잘 생육하였으나 $15{\sim}18%$에서는 생육이 거의 억제되었고 L2와 L3의 균주는 L1과 L4의 균주에 비하여 내염성이 다소 강하였다. (3) 분리효모중 내염성 색소와 향기의 생성 등에 있어서 L3균주가 가장 우량한 효모였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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