Antimicrobial activity of 6 phosphate compounds as $H_3PO_3$, $H_3PO_4$, $K_3PO_4$, $K_2HPO_4$, $KH_2PO_4$ and $NH_4H_2PO_4$ against Phytophthora capsici JHAW 1-2 and Colletotrichum acutatum JC24 was investigated in this study. Inhibitory effect on zoospore release, zoosporangia germination and zoospore germination was superior than mycelial growth. Among 6 compounds, $H_3PO_3$ and $H_3PO_4$ showed the best antimicrobial activity against P. capsici JHAW 1-2. Diseases controlling activity of the phosphate compounds tested on seedling and fruit of pepper against Phytophthora blight was also better than those against anthracnose. When $H_3PO_3$ was applied to the pepper seedlings at a concentration of $100{\mu}g\;mL^{-1}$, severe phytotoxicity was occurred. However, with applying $10{\mu}g\;mL^{-1}$ of $H_3PO_3$ showed 100% the disease control efficacy. In case of $100{\mu}g\;mL^{-1}$$H_3PO_4$ application showed excellent antimicrobial activity against P. capsici JHAW 1-2, and 56.7% of the disease control efficacy with no phytotoxicity. To investigate the control efficacy against anthracnose, conidia suspension was inoculated with non-wound and wound inoculation method on pepper fruit. Among 6 compounds, only $100{\mu}g\;mL^{-1}$ of $H_3PO_3$ and $H_3PO_4$ had a activity of more than 70%, but the control activity on other treatments was minimal or unacceptable.
The occurrence of post-harvest diseases and their pathogens in 'Campbell Early' which is the most produced grape in Korea was investigated. The 'Campbell Early' grapes produced in 3 main grape-producing areas were stored in a cold room ($0-4^{\circ}C$) for 2 weeks then at room temperature for 4 weeks prior to investigation. The major post-harvest diseases occurred were gray mold, blue mold, ripe rot, new decay 1, and new decay 2. Pathogens isolated from the symptoms were identified as Botrytis cinerea for gray mold, Penicillium sclerotiorum for blue mold and Collectrichum acutatum for ripe rot. Pathogens for new decay 1 and new decay 2 were not identified yet. Incidences of new decay 1 and new decay 2 were much higher than the other 3 decays in all grapes produced from 3 areas. Gray mold and blue mold occurred at much lower frequencies than these two decays, and ripe rot occurred least.
Five hundred strains of actinomycetes were screened for inhibitory activity against the phytopathogenic fungi; Alternaria alternata, Botryotinia fuckeliana, Colletotrichum acutatum, Colletotrichum gleosporioides, Corticium sasaki, Cylindrocarpon destructans, Fusarium oxysporium, Magnaporthe grisea, Phytophthora infestans, Phytium ultimum, and Thanatephorus cucumeris. The strain CNU-A91231 (Korea Agricultural Culture Collection #20938) showed a strong activity against the phytopathogenic fungi and it was identified as Streptomyces griseofuscus based on the sequence of 16s rDNA. Practical and simple media for the strain S. griseofuscus CNU-A91231 was developed at the conditions ($28^{\circ}C$ and pH 6 with aeration) for efficient bacterial growth. Alanine, glutamine, proline and ammonium ion were good nitrogen sources for the bacterium. Addition of the major salts including Na, Cl, Ca, P, K, and Mg into molasses did not increase the growth of S. griseofuscus. Addition of fertilizers containing amino acids significantly enhanced growth of the bacterium. The optimal medium was formulated as molasses + 1% of glutamate fermentation waste powder. All the conditions and components used in this study did not affect the antifungal activity of S. griseofuscus. The bacterium and the medium in this study can be used as a bio-antifungal agent for plant farming.
Selection of the optimal culture medium and evaluation of the antimicrobial activity against various phytopathogens were performed for four entomopathogenic fungal isolates with excellent insecticidal and antimicrobial activity against the two-spotted spider mite (Tetranychus urticae), green peach aphid (Myzus persicae), and gray mold (Botrytis cinerea). The optimal medium was selected by measuring the amount of blastospore production and the antifungal activity of the culture medium. On the basis of these experiments, GY medium was selected for Beauveria bassiana 2R-3-3-1 and Metarhizium anisopliae 4-2, SD3, and PDB medium for B. bassiana SD15. The antimicrobial activity test against other phytopathogens indicated that all four isolates showed high antifungal activities against Colletotrichum acutatum and Sclerotinia sclerotiorum. However, for Phytophthora capsici and C. fructicola, only M. anisopliae SD3 showed a high antifungal activity against P. capsici, and the other three isolates had little activity. Antibacterial activity against Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis was high in two isolates of M. anisopliae but not in two isolates of B. bassiana. Thus, it was confirmed that entomopathogenic fungi effective for pest control could be effectively used as a control agent for various plant diseases.
To develop an effective biopesticide to control pepper anthracnose disease, an isolate which showed strong inhibitory effect on the mycelial growth and conidial germination of Colletotrichum acutatum was selected among the antagonistic bacterial isolates collected from pepper grown soil. The bacterial isolate was identified as Bacillus sp. KBC1004 using 16S rRNA sequence analysis. The liquid culture of KBC1004 was freeze-dried and formulated as a wettable powder(WP). The wettable powder form of KBC1004 required at least 24 hours to activate and to inhibit the conidial germination of C. acutatum. In vitro bioassay using the detached green pepper fruits, biocontrol activity of the WP was not recognizable in simultaneous inoculation, but significant disease suppression was observed pre-treatment (24 hr) of the WP before pathogen inoculation. In field experiment, 4 times foliar applications of the 1/500 diluted wettable powder from the end of June showed great control efficacy similar to that of the chemical fungicide application. These results suggest that the formulated WP product could be an alternative mean to control of pepper anthracnose disease in environmentally friendly farming practices.
In the survey from 1992 to 2000, twenty-eight parasitic diseases were observed in major apple producing areas in Korea. The predominant apple diseases were white rot(Botryosphaeria dothidea), Marssonina blotch(Marssonina mali), Valsa canker(Valsa ceratosperma), Alternaria leaf spot(Alternaria mali), and bitter rot(Collectotrichum gloeosporioides and C. acutatum). Apple scab that reappeared in 1990 after disappearance for 15 years was disappeared again since 1997. A viroid disease(caused by apple scar skin viroid) was newly found in this survey. The five diseases, fire blight(Erwinia amylovora), black rot(Botryosphaeria obtusa), scab(Cladosporium carpophilum), Monochaetia twig blight(Monochaetia sp.), and brown leaf spot(Hendersonia mali), which had once described in 1928 but no further reports on their occurrence, were not found in this survey. However, blossom blight(Monilinia mali), brown rot(Monilinia fructigena), and pink rot(Trichothecium roseum), which did not occur on apple after mid 1970s, were found in this survey.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.6-6
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2010
Bacteria of the Bacillus sp. are well known to possess antagonistic activity against numerous plant pathogens. In the present study, 11 Bacillus sp. were isolated from the brackish environment and assayed for antagonistic activity under in vitro and in vivo conditions. Among the 11 isolates tested, 9 isolates effectively inhibited the growth of various plant pathogens, namely Phytophthora capsici, Phytophthora citropthora, Phytophthora citricola, Phytophthora sojae, Colletotricum coccodes, Colletotricum gloeosporioides, Colletotricum acutatum, Rhizoctonia solani, Fusarium solani, Fusarium graminearum, Pyricularia sp. and Monilina sp. The effective isolates were further screened for Phytophthora blight suppression in Capsicum annuum L. under green house conditions. The isolate SB10 exhibited the maximum (72.2%) reduction in disease severity. The antifungal compounds from the isolate were isolated and characterized. The isolated compounds exhibited high thermo stability ($100^{\circ}C$ for 30 min). Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight investigation of the antifungal compounds revealed three lipopeptide complexes, the surfactins, the iturins, and the fengycins.
Lichen-forming fungi (LEF) were isolated from 67 Hungarian lichen species from ascospores or thallus fragments. LFF were successfully isolated from 26 species with isolation rate of 38.8%. Of the total number of isolation from ascospores (27 species) and thallus fragments (40 species), 48% and 32.5% of the species were successfully isolated, respectively. Comparison of rDNA sequences of ITS regions between the isolated LFF and the original thallus confirmed that all the isolates originated from the thallus fragments were LEF. The following 14 species of LEF were newly isolated in this study; Acarospora cervina, Bacidia rubella, Cladonia pyxidata, Lasallia pustulata, Lecania hyaline, Lecanora argentata, Parmelina tiliacea, Parmotrema chinense, Physconia distorta, Protoparmeliopsis muralis, Ramalina pollinaria, Sarcogyne regularis, Umbilicaria hirsuta, Xanthoparmelia conspersa and X. stenophylla. Antifungal activity of the Hungarian LFF was evaluated against plant pathogenic fungi of Colletotrichum acutatum, C. coccodes and C. gloeosporioides, causal agent of anthracnose on hot pepper. Among the 26 isolates, 11 LFF showed more than 50% of inhibition rates of mycelial growth of at least one target pathogen. Especially, LFF of Evernia prunastri, Lecania hyalina and Lecanora argentata were remarkably effective in inhibition of mycelial growth of all the tested pathogens with antibiotic mode of action. On the other hands, five isolates of Cladonia furcata, Hypogymnia physodes, Lasallia pustulata, Ramalina fastigiata and Ramalina pollinaria exhibited fungal lytic activity against all the three pathogens. Among the tested fungal pathogens, C. coccodes seemed to be most sensitive to the LFF. The Hungarian LFF firstly isolated in this study can be served as novel bioresources to develop new biofungicides alternative to current fungicides to control hot pepper anthracnose pathogenic fungi.
We developed a polyclonal antibody based-ELISA system to monitor inocula accurately and rapidly before onset of anthracnose on soybean sprouts. Titer of mouse antisera against conidia of Colletotrichum gloeosporioides, determined by indirect ELISA, was high enough to be detectable up to ${\times}$25,600 dilutions. Both PAb1 and PAb2 had the highest level of reactivity to Colletotrichum gloeosporioides. Absorbance readings exceeded 0.15. Sensitivity of PAb to C. gloeosporioides was precise enough to detect spore concentration as low as 500 conidia/well by indirect ELISA. Both antibodies are very sensitive and highly specific to the target pathogen Colletotrichum gloeosporioides, apparently discriminating other unrelated pathogen, or epiphytes. This kit fulfills the requirements far detecting inocula before infection and onset of anthracnose. Our ELISA system should also be feasible to detect C. acutatum (Mungbean sprouts rot) and G. cingulata (C. gleosporioides), (apple, pepper). It was remarkable that absorbance value was not reduced even after 4 consecutive washings (Fig.4), suggesting that antigenic determinants are on the surface of conidia. Antigenic determinant was characterized by heating and enzyme treatment: Both PAb1 and PAb2 bind to protein epitope that does not contain residue of amino acid, arginine, and Iysine, even though more work needs to be done.
Park, J.H.;Park, G.J.;Lee, S.W;Jang, K.S.;Park, Y.H.;Chung, Y.R.;Cho, K.Y.;Kim, J.C.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.95.2-96
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2003
In order to develop a new microbial fungicide for the control of vegetable diseases using endophytic bacteria, a total of 260 bacterial strains were isolated from fresh tissues of 5 plant species. After they were cultured in broth media, their antifungal activities were screened by in vivo bioassays against Botrytis cinerea(tomato gray mold), Pythium ultimum(cucumber damping-off), Phytopkhora infestans(tomato late blight), Colletotrichum orbiculare(cucumber anthracnose), and Blumeria graminis f. sp. hordei(barley powdery mildew). As the results of screening, 38 bacterial strains showed potent antifungal activities against at least one of 5 plant pathogens. A bacterial strain EB072 displayed potent disease control activities against 3 plant diseases. Among the bacterial strains with a potent antifungal activity against cucunlber anthracnose, three bacterial strains, EB054, EB151 and EB215, also displayed a potent in vitro antifungal activity against C. acutatum, a fungal agent causing pepper anthracnose. A bacterial strain EB215 obtained from roots of cucumber was identified as Burkholderia cepacia based on its physiological and biochemical characteristics and 165 rRNA gene sequence. An antifungal substance was isolated from the liquid cultures of B. cepacia EB215 strain by ethyl acetate partitioning, repeated silica gel column chromatography, and invitro bioassay, Its structural determination is in progress by various instrumental analyses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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