This study was performed to get the basic information concerned to the optimum culture condition of Inonotus obliquus. Several solid media, PDA, MEA and Czapek-Dox, and three liquid media were adopted for the in vitro cultivation. Some main features of the fungal morphological characteristics under cultivation conditions were observed and described. Preliminary results showed that appearance of the mycelial mat, hyphal size and substrate pigmentation differed according to the media. The PDA medium was the most favorable substrate for the growth on solid culture, followed by MEA and Czapek-Dox media. Concerned to the addition of amino acids, 5 amino acids, such as alanine, alginine, isoleucine, leucine and threonine, enhanced to the mycelial growth. Isoleucine was shown the best fungal growth. An important morphological hyphal structure for the fungus, the setae, was found in abundance and diverse its shape and size. In liquid culture, fresh potato broth was the best growth stimulant of the fungus, followed by Malt extract and potato broth. Addition of yeast extract to the liquid media had improved the biomass, but not laccase production.
The growing behavior of Candida albicans in various concentration of glucose and corticosteroid media was studied with the method of modified hanging slide culture. The strains of Candida albicans used in this study were obtained from vaginal swab from outpatients and were isolated from cultured colonies on Sabouraud's glucose agar media. To detect the budding rate of blastospore, the diluted suspension of Candida albicans in normal saline were inoculated into various concentration of glucose (Gl, G2, G3, G4), corticosteroid (S1, S2, S3, S4) and corticosteroid with 10% pepton broth (D1, D2, D3, D4) respectively and cultured at room temperature $(22{\sim}25^{\circ}C)$. The number of budding of blastospore were counted under the high power field of light microscope (400X) at specific time interval, e.g, 1, 2, 3, 6, 9, 12, 18, and 24 hours after inoculation. The results are as following: 1. The most effective budding rate was seen in G4 media (1.25% glucose) in 18 hours aft inoculation (89%). 2. The budding rate in Sabouraud's glucose broth with various concentration of dexamethasone added, was not significantly different from that of simple Sabouraud's glucose broth within 18 hours after inoculation, but there was statistically. significant difference in two budding rate at 24 hours observation. 3. The budding rate in 10% pepton broth media with various concentration of dexamethasone was almost same budding rate in control group, which is normal saline and 10% pepton broth, except on 2 and 24 hours results.
본 연구는 현행 식품공전상 제시되어 있는 식중독균 분리배지의 평가를 위해 Salmonella spp., Bacillus cereus, Listeria monocytogenes, Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus의 5가지 식중독세균용 29가지 분리 선택배지를 Broth와 Food에서 시험하였다. Food는 닭고기, 쌀, 돼지고기, 고등어를 대상으로 5가지 식중독균을 접종후 균주의 recovery를 확인하였고. Broth는 5가지 식중독세균용 29가지 분리 선택배지를 사용하였다. Broth에서는 각 세정균에 대한 분리배지들 간에 유의적인 차이가 없었으나(P<0.05), Food에서는 그 차가 크지는 않았으나, 분리선택배지간의 분리능에 통계적 유의차가 존재하였다. 식품공전에 등재된 전통적인 분리 선택배지에서 분리된 균수가 Chromogenic 배지 등 새로운 선택배지에서 분리된 균수보다 많았다. 국제적으로 등재된 배지간의 선택성의 차이가 존재하였으며, 추후 다양한 배지가 식품공전에 등재되기 위해서는 추가 연구가 필요하다.
Ahn, Youngbeom;Lee, Un Jung;Lee, Yong-Jin;LiPuma, John J.;Hussong, David;Marasa, Bernard;Cerniglia, Carl E.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권10호
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pp.1495-1505
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2019
The Burkholderia cepacia complex (BCC) is capable of remaining viable in low-nutrient environments and harsh conditions, posing a contamination risk in non-sterile pharmaceutical products as well as a challenge for detection. To develop optimal recovery methods to detect BCC, three oligotrophic media were evaluated and compared with nutrient media for the recovery of BCC from autoclaved distilled water or antiseptic solutions. Serial dilutions ($10^{-1}$ to $10^{-12}CFU/ml$) of 20 BCC strains were inoculated into autoclaved distilled water and stored at $6^{\circ}C$, $23^{\circ}C$ and $42^{\circ}C$ for 42 days. Six suspensions of Burkholderia cenocepacia were used to inoculate aqueous solutions containing $5{\mu}g/ml$ and $50{\mu}g/ml$ chlorhexidine gluconate (CHX) and $10{\mu}g/ml$ benzalkonium chloride (BZK), and stored at $23^{\circ}C$ for a further 199 days. Nutrient media such as Tryptic Soy Agar (TSA) or Tryptic Soy Broth (TSB), oligotrophic media (1/10 strength TSA or TSB, Reasoner's $2^{nd}$ Agar [R2A] or Reasoner's $2^{nd}$ Broth [R2AB], and 1/3 strength R2A or R2AB) were compared by inoculating these media with BCC from autoclaved distilled water and from antiseptic samples. The recovery of BCC in water or antiseptics was higher in culture broth than on solid media. Oligotrophic medium showed a higher recovery efficiency than TSA or TSB for the detection of 20 BCC samples. Results from multiple comparisons allowed us to directly identify significant differences between TSA or TSB and oligotrophic media. An oligotrophic medium pre-enrichment resuscitation step is offered for the United States Pharmacopeia (USP) proposed compendial test method for BCC detection.
한국에서 유행하는 페염균 type을 결정하기 위한 기초 실험을 수행하여 서울대병원과 서울중앙병원의 환자로부터 분리한 88개의 폐염균주를 담즙산에 의한 용해도 및 Optochin에 대한 민감성 등을 측정하고 폐염균의 type을 결정하기 위해서 Double diffusion, Countercurrent immunoelectrophoresis, Rocket immunoelectrophoresis 방법 등으로 폐염균 항혈청과 반응하였다. 또한 ATCC로부터 구입한 폐염균주를 이용하여 배지조성의 변화에 따른 폐염균 생장을 측정하기 위해 CAT broth, Brain Heart Infusion broth, Defined Media에서 3가지 type의 균주(Type I, III, IV)를 접종하고 37$^{\circ}C$에서 배양하면서 1시간마다 550nm에서 흡광도를 측정하였다. 3가지 type (Type I, III, IV)의 폐염균주로부터 협막다당류를 phenol Iysis 추출법으로 폐염균 Capsule 다당류의 분리하여 Total Sugar 함량, Uronic acid 함량, 0-Acetyl 함량, 단백질 함량, 핵산 함량, 분자량분포 Countr-current immunoelectrophoresis 등을 실시하여 폐염균 백신 규격에 부합되는지 확인하였다. 수집한 88개의 폐염균주가 모두 담즙산에 의해 용해되고 6mm Optochin disc를 사용하였을때 성장 저지원이 모두 14mm 이상으로 나타나 감수성이 있어서 폐염균임을 확인하였으며 폐염균의 type 결정에 필요한 방법을 설정하였다. 배지조성에 따른 폐염균의 생장을 측정한 결과 CAT broth 에서는 Type I만이 잘 배양되었고 Type III, IV는 늦게 배양되었으나, Brain Heart Infusion broth에서는 3가지 Type이 모두 잘 배양되었고, Defined Media 에서는 Type I만이 성장되었을 뿐 나머지 두 Type은 배양되지 않았다. 본 실험방법으로 분리된 폐염균 다당류는 폐염균 백신 규격중의 6가지 항목에서 적합하였으며 Statens(Denmark)로부터 구입한 항체와 뚜렷한 침강선을 나타내었다.
도열병균의 분생포자를 다량으로 형성하는 배지를 찾고자 여러 가지 영양분을 차진 한천 및 액체배지에 대하여 분생포자형성도를 시험하였다. 여러 가지 공시 배지 중에서 V-8배양액과 토마토 즙한천배지 상에서 가장 많은 분생포자가 형성되었고, 볏짚배지 상에서 가장 적은 수의 분생포자카 형성되였다. 이와 같이 V-8즙배양액화 토마토한천배지는 도열병균 분생포자형성도에 있어서 과거 연구자들이 최적이라고 보고한 쌀겨한천배지와 효모전분한천배지를 훨씬 능가하였다.
Chitin compost and broth were used to suppress club root. Individual cabbage seedlings were transplanted into pots(3500 ml) containing a mixture of 3% chitin compost and 50 ml of chitin broth (T1) or the same quantity control compost and control compost broth(T2). The media in each pot was then infected with Plasmodiophora brassicae. Samples were taken at 6, 7 and 8 weeks after transplanting. The population of chitinase producing bacteria in T1 was consistently larger than that observed in T2. Chitinase activity in the T1 rhizosphere was two-fold greater than that of T2 at each time point observed. Shoot dry weight, leaf number and leaf area in T1 were enhanced 20%, 10% and 12% relative to those seen in T2, respectively. The disease index and root mortality at 8 weeks after transplanting were reduced by 50% and 25% in T1 compared to T2, respectively. Results presented in this study are strongly indicative that chitin compost and broth suppress clubroot in Chinese cabbage.
Grown in the secondary broth of production media, the strain Streptomyces albulus has increased more the production of its metabolite ${\varepsilon}$-poly-L-lysine, one of poly(amino acid)s used as disinfecting food additives, than the strain in the primary culture of growth nutrients. Having the strain removed, the large concentrate obtained by ultrafiltrating the secondary culture broth. The concentrated production broth exchanged into followed by detecting in UV flowcell at 220nm the peptide bond of the components eluting the adsorbed proteins and polylysine with NaCl salt of gradient concentration, and has separated into five components. Among them the component in the fourth peak fraction has proved to be the pure ${\varepsilon}$-poly-L-lysine after the portion being hydrolyzed the fraction with HCl into amino acid followed by being the composing amino acid analysis.
본 연구에서는 Photobacterium phosphoreum의 배양 및 생체발광을 위한 최적 배지의 개발과 장기저장 후 생체발광능의 회복을 위한 최적의 저장 조건을 확립하고자 하였다. P. phosphoreum을 배양하기 위한 배지로 Luria broth(LB) 배지를 변형한 modified LB(mLB) 배지를 개발하였다. mLB 배지는 Luria broth에 1.5%의 NaCl과 3%의 글리세롤을 보정, 첨가한 배지로, 미생물 생장 및 생체 발광량이 Nutrient broth 배지보다 약 25% 가량 높은 수치를 보여주었으며, 생장 대수기에서 생장 휴지기로 넘어갈 때 생체 발광량이 최고치에 달하였다. 30% 글리세롤을 첨가하여 $-20^{\circ}C$$-70^{\circ}C$ 및 액체질소에 3개월간 보관한 후, 배양하여 생장 및 생체 발광량을 조사한 결과에서는 $-20^{\circ}C$ 보관한 시료가 가장 좋은 결과를 보였다. 항 동결제로 5% adonitol을 첨가하여 동결 건조한 시료는 재 배양 시 adonitol를 첨가하지 않은 시료보다 16시간 이상 짧은 생장 유도기를 보여 주었고, 생체 발광량이 최고조에 달하는 시간도 빠르게 나타났다.
Linares-Morales, Jose R.;Salmeron-Ochoa, Ivan;Rivera-Chavira, Blanca E.;Gutierrez-Mendez, Nestor;Perez-Vega, Samuel B.;Nevarez-Moorillon, Guadalupe V.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제32권1호
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pp.64-71
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2022
The discarding of wastes into the environment is a significant problem for many communities. Still, food waste can be used for lactic acid bacteria (LAB) growth. Here, we evaluated three growth media equivalent to de Mann Rogosa Sharpe (MRS), using apple bagasse, yeast waste, fish flour, forage oats, and cheese whey. Cell-free supernatants of eight LAB strains were tested for antimicrobial activity against nine indicator microorganisms. The supernatants were also evaluated for protein content, reducing sugars, pH, and lactic acid concentration. Cell-free supernatants from fish flour broth (FFB) LAB growth were the most effective. The strain Leuconostoc mesenteroides PIM5 presented the best activity in all media. L. mesenteroides CAL14 completely inhibited L. monocytogenes and strongly inhibited Bacillus cereus (91.1%). The strain L. mesenteroides PIM5 consumed more proteins (77.42%) and reducing sugars (56.08%) in FFB than in MRS broth (51.78% and 30.58%, respectively). Culture media formulated with agroindustrial wastes positively improved the antimicrobial activity of selected LAB, probably due to the production of antimicrobial peptides or bacteriocins.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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