Phytophthora blight caused by Phytophthora capsici Leonian is a dangerous disease threatening pepper growers worldwide. The efficacy of chemical control is generally low as the pathogen is soil-borne and rapidly spread by zoospores during the rainy season. Thus, based on the demand for resistant varieties, various good resistant sources, such as CM334, AC2258, and PI201234, have been reported and their inheritance of resistance studied by many different authorities. However, the mode of inheritance remains unclear, as 1 or 2 independent dominant genes, 3 genes, or multiple genes have all been reported as responsible for resistance. Recently, QTL mappings of the gene factors for resistance have been reported, and molecular markers for resistance used in breeding programs. With the release of many resistant commercial hybrid cultivars, differentiation of pathotypes of the pathogen is attracting interest among breeders and plant pathologists. Various authorities have already classified the pathogen strains into different races according to the inter-action between resistant host plants, including the source of resistance, such as CM334 and PI201234, and resistant commercial varieties and P. capsici isolates. However, no standard differential host sets have yet been established, so the results are good only for the pathogen strains used in the experiments. Thus, for breeding varieties with durable resist-ance, it is important to introduce resistance from different sources and use diverse local pathogen strains collected in the target area for distribution in a breeding program.
Many important traits have been tagged allowing plant breeders to apply marker assisted selection (MAS) in rice. PCR itself is simple to set up, and requires little hands-on time. However, a crucial limiting step of MAS programs is the reliable and efficient extraction of DNA which can be performed on thousands of individuals. In this study, We describe a modification of the DNA extraction method, in which cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) is used to extract DNA from leaf tissues for suitable MAS in rice. We followed the standard 2% CTAB extraction method in all the procedure. In addition we used the 1.2 ml 8-strip tube instead of 1.5 ml E-tubes to fit the 8-multichannel pipette and employ the 96 well plate to use the swing bucket centrifuge. Our modified CTAB DNA extraction method offers several advantages with respect to traditional and simple methods. 1) adult leaf samples collected in paddy field are applicable. 2) 96 leaf samples can be homogenized only one-time by using tungsten carbonate bead and 96well block. 3) semiautomatic loading method using 8-multichannel pipette from DNA extraction to electrophoresis of PCR products. 4) our system can extract about 400 leaf samples per day by only one technicion. Therefore, this method could be useful for marker assisted breeding in rice.
Hwang, Yoon Jung;Song, Chang Min;Kwon, Min Kyung;Kim, Sung Tae;Kim, Won Hee;Han, Youn Yol;Han, Tae Ho;Lim, Ki Byung
FLOWER RESEARCH JOURNAL
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v.18
no.3
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pp.193-200
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2010
Current rose cultivars are all composed of heterozygous genome due to long history of out crossing including interspecific hybridization. It has been adapted by artificial selection and crossing by breeders that mainly based on the crossing with fertile pollen derived from inter- or intra-specific hybridization. Pollen viability and germination ability tests provide valuable information for the designing of parentage for more successful breeding efficacy. In this study, we tested the pollen viability and germination ability in seven rose cultivars to find any relationship among several factors including pollen size, ploidy levels, and crossing compatibility. The pollen viability showed wide ranges from 39% 'Pinocchio' as minimum to 82% 'Scarlet Mimi' as maximum, whereas pollen germination rate were from 1% 'Mini Rosa' to 41% 'Scarlet Mimi' as a highest. Pollen size ranged from 41.3 to $45.4{\mu}m$ in large sized pollen and 30.7 to $37.4{\mu}m$ in small sized pollen. The mean diameter of large sized pollen is approximately 10-40% bigger than that of small sized pollen. There are positive relationships among ploidy level, total chromosome length, and pollen size. Crossing list showed that seed setting ratio and seed germination were related to pollen viability, pollen germination, and ploidy level.
This study was carried out to develop of macro-protocol and the biosafety guide for 'Nakdong', and 'Golden Rice' (genetically modified vitamin A rice) by large scale field trial of GM crops. Typically, when a new GM crop is created, breeders should conduct field test to make sure the GM crop is safe, and provide some information on GM crops for approval. A total of isolated 4,700 $m^2$ field for trial of GM crops were prepared, and 'Nakdong' and 'Golden rice' were cultivated by standard method of RDA (Rural Development Administration, Korea). Field studies indicated that the population densities of insect pests and natural enemies have no difference between two varieties. While insect pest density on 'Nakdong' was slightly higher than on Golden Rice, but natural enemy density on Golden Rice was a little higher. These results provided the insect diversity for risk assessment analysis of Golden Rice and suggested that the macro-protocol could be useful to detect GM plants.
Precise and fast identification of crop cultivars is essential for efficient breeding and plant breeders' rights. Traditional methods for identification of jujube cultivars are based on the evaluation of morphological characteristics. However, due to time constraints and environmental influences, it is difficult to distinguish cultivars using only morphological traits. In this study, we cloned fragments from improved inter simple sequence repeats (ISSR) analysis, and developed stably diagnostic sequence-characterized amplified region (SCAR) markers. The specific ISSR bands of jujube cultivars from Dalizao and Boeundaechu were purified, cloned, and sequenced. As a result, four clones labeled 827Dalizao550, 827Boeun750, 846Boeun700, and 847Dalizao850 were identified. In order to investigate whether they were specific for the jujube cultivar, four pairs of SCAR primers were then designed and polymerase chain reaction (PCR) amplifications were conducted to analyze 32 samples, including jujube and sour jujube. In the PCR amplification of the 827Dalizao550 SCAR marker, the specific bands with 550 bp were amplified in six samples (Dalizao, Sandonglizao, Dongzao, Yuanlin No. 2, Suanzao 2, Suanzao 4), but unexpected bands (490 bp) were amplified in the others. Moreover, in the PCR amplification of the 847Dalizao850 SCAR marker, the specific bands with 850 bp were found in three samples (Dalizao, Sandonglizao, and Dongzao) and 900 bp unexpected bands were amplified in five samples (Pozao, Suanzao 1, Suanzao 2, Suanzao 3, Suanzao 4). These results showed that newly developed markers could be useful as a fast and reliable tool to identify jujube cultivars. However, further identification of polymorphic information and the development of SCAR markers are required for the identification of more diverse cultivars.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.10a
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pp.64-64
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2019
Screening and identification of genetic resources based on their phytoconstituents and morphological characters potentially provide baseline data for researchers, breeders, and nutraceutical companies who wish to formulate a nutrient-dense diet and health beneficial supplement. Thus, we evaluated the amount of total phenolic content and major phenolic compounds; examined if phenolic compounds could be used as distinguishing factors for perilla genetic resources; and investigated the relation between some quantitative and qualitative morphological characters with the contents of phenolic compounds in 360 accessions obtained from National Agrobiodiversity Center gene bank, Jeonju, Korea. Total phenolic content (TPC) was estimated using Folin-Ciocalteu colorimetric assay. Individual phenolic compounds were determined using an Ultra-High Performance Liquid Chromatography system equipped with Photodiode Array detector. Considerable variations were observed in TPC (7.99 to 117.47 mg GAE/g DE), rosmarinic acid (RA) (ND to 19.19 mg/g DE), caffeic acid (CA) (ND to 0.72 mg/g DE), apigenin-7-O-diglucuronide (ADG) (ND to 1.24 mg luteolin equivalent (LUE)/g DE), scutellarein-7-O-glucuronide (SG) (ND to 4.32 mg LUE/g DE), and apigenin-7-O-glucuronide (AG) (ND to 1.60 mg LUE/g DE). RA was the most dominant phenolic compound in most accessions (95.3%) followed by SG. The adaxial leaf color was light green, green and dark green in 13.8%, 65.0%, and 21.1 % of the accessions, respectively. 78.8% of the accessions had light green color at the abaxial side with the remaining being described as green. Most of the accessions (96.9%) were cordate shape, the remaining being eclipse. Intensities of green pigment at abaxial and adaxial leaf surfaces were correlated with contents of individual phenolic compounds and TPC whereas leaf length and width had no correlation with TPC, CA and RA, and negatively correlated with ADG, AG, and SG. Leaf shape was not related with content of phenolic compounds, color of leaves, or the length or width of leaves. Accessions IT57426, IT157434, IT267710, and IT267712 which contained relatively high contents of TPC and major phenolic compounds (RA and SG) could be used for further research in breeding and bioassay test. Our study result showed the contents of total phenolics and individual phenolic compounds along with the morphological characters could be useful distinguishing factors for perilla genetic resources.
Choi, Jong In;Jung, Hwa Jin;Na, Kyeong sook;Oh, Min-Ji;Kim, Min-Keun;Ryu, Jae-San
Journal of Mushroom
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v.19
no.1
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pp.76-80
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2021
To develop a method for the differentiation of Pleurotus ostratus cultivars, the multiplex-simple sequence repeat (SSR) primer set based on the SSRs obtained from whole genomic DNA sequence analysis was designed with two polymerase chain reaction (PCR) primer sets. These SSR primer sets were employed to distinguish 10 cultivars and strains. Twenty polymorphic markers were selected based on the genotyping results. PCR with each primer produced 1-4 distinct bands ranging in size from 150 to 350 bp, which was within the expected range. However, since a sole SSR marker was unable to detect polymorphisms in every cultivar, multiplex PCRs with composite PCR primer sets were employed. The multiplex primer, "166+115," completely discriminated 12 cultivars and strains with 40 loci, which were 12 more than the simple arithmetic addition of each locus of the primers 115 and 166. These results might be useful to provide an efficient method for the differentiation of P. ostreatus cultivars with separate PCRs for the quality control of spawn and protection of breeders' rights.
Attila, Zsolnai;Istvan, Egerszegi;Laszlo, Rozsa;David, Mezoszentgyorgyi;Istvan, Anton
Animal Bioscience
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v.36
no.1
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pp.10-18
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2023
Objective: In this study, we aimed to position the Hungarian Merino among other Merinoderived sheep breeds, explore the characteristics of our sampled animals' genetic similarity network within the breed, and highlight single nucleotide polymorphisms (SNPs) associated with daily weight-gain. Methods: Hungarian Merino (n = 138) was genotyped on Ovine SNP50 Bead Chip (Illumina, San Diego, CA, USA) and positioned among 30 Merino and Merino-derived breeds (n = 555). Population characteristics were obtained via PLINK, SVS, Admixture, and Treemix software, within-breed network was analysed with python networkx 2.3 library. Daily weight gain of Hungarian Merino was standardised to 60 days and was collected from the database of the Association of Hungarian Sheep and Goat Breeders. For the identification of loci associated with daily weight gain, a multi-locus mixed-model was used. Results: Supporting the breed's written history, the closest breeds to Hungarian Merino were Estremadura and Rambouillet (pairwise FST values are 0.035 and 0.036, respectively). Among Hungarian Merino, a highly centralised connectedness has been revealed by network analysis of pairwise values of identity-by-state, where the animal in the central node had a betweenness centrality value equal to 0.936. Probing of daily weight gain against the SNP data of Hungarian Merinos revealed five associated loci. Two of them, OAR8_17854216.1 and s42441.1 on chromosome 8 and 9 (-log10P>22, false discovery rate<5.5e-20) and one locus on chromosome 20, s28948.1 (-log10P = 13.46, false discovery rate = 4.1e-11), were close to the markers reported in other breeds concerning daily weight gain, six-month weight, and post-weaning gain. Conclusion: The position of Hungarian Merino among other Merino breeds has been determined. We have described the similarity network of the individuals to be applied in breeding practices and highlighted several markers useful for elevating the daily weight gain of Hungarian Merino.
The study was conducted to provide basic information to breeders and agronomists working with sesame. The grain weight and germinability were investigated for eight plant types classified by branching habit, capsules per axil, and carpels and loculi of a capsule. Two typical cultivars were chosen for each plant type among 527 gene pools. Dry weight of one thousand grains was increased rapidly from 25th to 35th day after flowering, and reached peak on 40th day after flowering in upper part capsules and 45th day after flowering in lower and middle part capsules, so that this period was considered to be of physiological maturity in each capsule bearing part. Side capsules on main stem and branch capsules were lighter than central ones of main stem, and upper capsules of four carpels eight loculi type decreased more seriously. BTB type demonstrated relatively better growth compared to the growth of BTQ type in one thousand grain weight. The maximum grain filling duration for germination percentage increased rapidly up to 40th day after flowering. Above 70% germinability was obtained from 40th day after flowering. Harvesting time of physiological maturity was considered to be 45th day after flowering with peaks of 2.14g of one thousand grain weight, 26% of grain water content and 90% of germinability.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2004.11a
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pp.69-79
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2004
A feeding trial was conducted to determine whether dietary vitamin C (200 mg/kg) and vitamin E (250 mg/kg) prevent any drops in egg shell quality under heat stress in broiler breeder hens. One hundred and sixty molted Ross broiler breeders were housed randomly in an individual cage at 83 weeks of age. Four dietary treatments with forty hens and four replications per treatment were control (no additional vitamins). vitamin C-. or vitamin E-supplemented. and combined supplementation of the two vitamins. After a ten-day-adaptation period at 25 $^{\circ}C$. the ambient temperature was kept at 32 $^{\circ}C$ for a three-week-testing period. Egg production dropped dramatically over week but it did not show a significant change among treatments (P<0.05). However. egg weight. SG. shell thickness. SWUSA. puncture force and shell breaking strength of the birds fed the diet with the combined vitamins C and E were significantly improved than those fed the basal diet during the heat stress period (P<0.05). The hens fed the vitamin C supplemented diet showed a tibia breaking strength of 37.16 kg statistically higher than those of the basal and the vitamin E supplemented groups (P<0.05). The hens fed the basal diet showed higher serum corticosterone levels. a mean of 5.97 ng/ml. than those of the rest of treatments (P<0.05). The heat stress elevated heterophils but decreased lymphocytes in serum. and it changed H/L ratios of all the treatments. The increases in H/L ratios were alleviated in the bird by feeding vitamin C and/or vitamin E supplemented diets. but they did not differ significantly (P<0.05). In conclusion. vitamins C (200 mg/kg) and/or E (250 mg/kg) supplementation to diets could prevent drops in egg shell quality and tibia bone strength by alleviating stressful effects from high temperature in broiler breeder hens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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