This study was carried out to assess the fermentation properties of lactic acid bacteria (LAB) isolated from bovine colostrum and effects of feeding fermented colostrum feed on the growth to piglet. A total of 427 colonies were isolated from bovine colostrum on the BCP plate count agar. These LAB isolated were subcultured in 10% reconstituted skim milk, and seven strain thereof were selected for their highest acid productions, and two strain thereof were finally selected for their excellent sugar utilization. These strains were identified as Streptococcus thermophilus and Streptococcus macedonicus based on l6S rDNA sequencing data, named S. thermophilus CNB-11 and S. macedonicus CNB-11 respectively. For fermentation profiles, sugar utilization, acid production and viable cell counts were excellent in S. thermophilus CNB-11 as compared with S. macedoniclts CNB-11 after 48 hour. The effect of feeding fermented colostrum feed 0.5% using S. thermophilus CNB-11 was investigated for growth rate, analysis of blood and incidence of diarrhea. 24 heads of piglets were divided into two groups: the experimental and the control of 12 animals each. The average growth rate in the pigs fed fermented colostrum feed was higher 16.73% compared with control diet (p<0.05). There were no differences in the concentrations of blood glucose, cholesterol, albumin and globulin in pigs fed fermented colostrum feed as compared with control piglets. Incidence of diarrhea was no in pigs fed fermented colostrum feed as compared with control piglets.
Park, Kyung A;Choi, Yoo-mi;Kang, Smee;Kim, Mi-Ri;Hong, Jungil
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.47
no.3
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pp.299-305
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2015
The Folin-Denis assay using the Folin-Ciocalteu (F-C) reagent has been commonly used for analyzing the total phenolic compound content in various food products. In the present study, the effects of proteins on the reactivity of the F-C reagent with different phenolic compounds were investigated. Bovine serum albumin (BSA) or skim milk proteins showed a concentration-dependent increase in color response in the Folin-Denis assay; these proteins decreased the color response of most phenolic compounds tested. The reactivity of phenolic compounds was significantly less pronounced in the presence of BSA and this interference was greater at higher concentrations of phenolic compounds. The reactivity of phenolic compounds with the F-C reagent was reduced significantly by their oxidation; the reaction of the oxidized products with the F-C reagent was more severely affected by BSA. The interfering effects in the Folin-Denis assay might be attributable to binding interactions of phenolic compounds with proteins.
It is known that a key limiting factor to the use of ultrafiltration membranes is that of membrane fouling, which has been a major cause of permeate flux reduction. In this work, the effects of several factors (operating time, protein concentration, temperature and pH, etc.) influencing permeate flux during ultrafiltration of gelatin, casein and bovine serum albumin using a hollow fiber membrane(M. W. 10,000 cut off) reactor have been examined. The permeate flux of gelatin solution was maintained almost constant during the operation up to 6 hours, but those of casein and albumin solutions were decreased to 50% and 43% of initial value after an operation time of 60min. The permeate flux with increasing concentration and temperature of protein solutions increased, but the permeate flux showed a minimum value near the isoelectric point of proteins. The permeate fluxes of protein solution were enhanced by a temperature increase and pH control. Also, it is proposed that fouling can be decreased by the pretreatment of insoluble proteins with enzymes.
Amplified fragment length polymorphism(AFLP) technique is based on the polymorphism detection through selective PCR amplification of restriction fragments from digested genomic DNA and thus includes the procedures of the total DNA digestion by endonucleases, ligation of adapters to the ends of the fragments, and following the selective amplification of the restricted DNA fragments. This study were aimed to : (1) determine the genetic variability of S aureus strains, (2) estimate genetic diversity within and among these strains, (3) compare phylogenetic relationships among these strains as genetic markers using AFLP techniques. Genomic DNA was digested with a particular combination of three restriction enzymes with specific recognition sites and the DNA fragments were ligated to restriction specific adapters and amplified using the selective primer combinations. In the S aureus strain, the number of scorable AFLP bands detected per each primer combination varied from 29 to 102, with an average of 61.59 using 27 primer combinations. A total of 1,663 markers were generated, 904 bands of which were polymorphic, showing a 33.48% level of polymorphism with these primer combinations. Among the primer combinations, E02/T02, E02/T03, E04/H02, E02/T01 and E04/H03 primer combinations showed a high level of polymorphism with 0.78, 0.76, 0.74, 0.71 and 0.70, respectively. But T03/H01, E01/T02 and E01/T03 primer combinations showed a low level of polymorphism with 0.38, 0.37 and 0.15, respectively, Therefore, the former primer combinations will be the most effective for AFLP analysis of S aureus. In SA1 sub-types the level of polymorphism of S aureus KCTC 1927 was similar to that of S aureus CU 01(0.825) and higher than those of other strains such as S aureus CU 02 (0.715), S aureus KCTC 2199(0.625), S aureus KCTC 1916(0.607) and S aureus KCTC 1621 (0.553). In SA2 sub-types the level of polymorphism of S aureus CU 07 was similar to that of S aureus CU 08(0.935) and higher than those of both S aureus CU 04(0.883) and S aureus CU 05(0.883) and lower than those of S aureus CU 03(0.583). In SA3 subtypes the level of polymorphism of S aureus CU 11 was similar to that of S aureus CU 12(0.913) and lower than that of S aureus CU 15(0.623). The results proved that AFLP marker analysis of S aureus strain could be used to study the epidemiology of mastitis and in addition, common genotype in geographic region could be useful for the development of an effective vaccine or DNA marker for easy diagnosis of mastitis caused by S aureus infection.
The protease produced by a newly isolated Aspergillus wentti from Korean traditional Meju was purified and characterized. The optimal medium composition and culture conditions for maximum protease production were ; bran :1% glucose solution =1 : 1, pH 9.0, $30^{\circ}C$, and 4 days of fermentation. Protease was purified by QAE-Sephadex, SP-Sephadex ion exchange chromatography and Sephadex G-100 chromatography. The specific activity and the purification fold of the purified enzyme were 213 unit/mg protein and 27.3, respectively. The molecular weight of purified protease was found to be 32 kDa by SDS-PAGE. Km and Vmax value's for hammastein milk casein were $3.049{\times}10^{-4}\;M\;and\;151.1\;{\mu}g/min$, respectively. Kinetic parameters showed that the enzyme has higher affinity to casein than isolated soybean protein, hemoglobin and bovine serum albumin. Optimal pH and temperature for reaction of the purified enzyme were 9.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable at pH 4.0-11.0, below $40^{\circ}C$, and the activity was not stimulated by metal ions. 1mM phenylmethylsulfonyl fluoride inhibited the enzyme activity by 98.5%. It means that the enzyme is one of serine protease.
Kim, Jong-Bae;Song, Hye-Won;Kim, Geun-Hee;Kim, Hong;Shin, Kwan-Soon;Kim, Doo
Biomedical Science Letters
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v.6
no.1
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pp.65-72
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2000
In order to improve the early diagnosis of Johne's disease in ruminants, duplex polymerase chain reaction system for the detection of the etiologic agent of M. paratuberculosis and for the differentiation of other mycobacterial animal pathogens, such as M. bovis and M. avium, was applied. Genomic DNAs were purified from peripheral blood monocytes or milk macrophages and were used as templates in the duplex PCR. Detection of Mycobacterium spp. in the specimen was carried out by PCR using primer set specific to the mycobacterial 16S rDNA. And then, mycobacterial DNA-positive specimens were further differentiated with duplex PCR system which was composed of primer sets specific to 16S rDNA of M. avium complex and Is900 gene of M. paratuberculosis. The results were re-confirmed by Southern blot hybridization with oligonucleotide specific to the internal sequence of IS900 PCR amplicons. The applicability of this duplex PCR system was evaluated with DNAs extracted from clinical specimens of peripheral blood monocytes and milk macrophages. In summary, the duplex PCR amplification system described in this experiment is promising molecular technique for the early diagnosis of Johne's disease in ruminants.
This experiment was carried out to study fractionation and physicochemical characteristics of caprine casein. Acid caseins obtained from caprine colostral and normal milk were analyzed by chymosin treatment and fractionated by DEAE-cellulose column chromatography with linear gradient and electrophoresis. Protein, fat and lactose of caprine normal milk were 2.70${\pm}$0.27%, 3.82${\pm}$0.51%, and 4.10${\pm}$0.29%, respectively. More non-protein nitrogen(NPN) was released by chymosin treatment from caprine colostral casein than normal casein. The electrophoretic pattern of caprine casein was not similar to that of bovine casein, Caprine normal casein was fractionated by DEAE-cellulose column chromatography with a 0.08${\sim}$0.18 M NaCl linear gradient into 5 pes with the proportion of 5.27%, 26.07%, 25.97%, 30.40% and 12.29%, respectively. In order to identify the pure fraction, the chymosin-treated caprine normal casein was fractionated by DEAE-cellulosecolumn chromatography with a 0.08${\sim}$0.18 M NaCl linear gradient into 6 peaks with the proportion of 17.06%, 9.10%, 17.85%, 20.11%, 27.03% and 8.85%, respectively.
This study was performed to analyze the sequence variations of mtDNA D-loop and their effects on milk in Hanwoo(Korean cattle). The resulting sequences were compared with previously published sequences for other cattle breeds (GenBank JOI394). The Polymerase Chain Reaction was performed to amplify a total of 964 bp between nucleotide 15758 and 383 within D-loop region of mtDNA using specific primers. Twenty polymorphic sites by nucleotide substitution were found in mtDNA D-loop region of Hanwoo. The frequencies of positions at 8, 169, 16042, 16051, 16057, 16093, 16119, 16122, 16209, 16255 and 16302 nt with high levels of sequence polymorphism were 0.150, 0.950, 0.085, 0.138, 0.106, 0.085, 0.138, 0.212, 0.085, 0.148 and 0.180, respectively. The substitution effect at 16119(p<0.1) and 16185(p< 0.05) nt was found significant on milk production. Polymorphism of mtDNA sequence in D-Ioop region could be useful for the analysis of cytoplasmic genetic variation and associations with the other economically important traits and maternal lineage analysis in Hanwoo.
Elisa, Crespi;Ana M., Pereyra;Tomas, Puigdevall;Maria V., Rumi;María F., Testorelli;Nicolas, Caggiano;Lucia, Gulone;Marta, Mollerach;Elida R., Gentilini;Mariela E., Srednik
Journal of Veterinary Science
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v.23
no.6
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pp.12.01-12.10
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2022
Background: Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae are the main cause of clinical mastitis in dairy cattle in Argentina, whereas coagulase-negative staphylococci (CNS) and environmental streptococci are the main cause of subclinical mastitis. Bacteria isolated from infected animals show increasing antimicrobial resistance. Objectives: This study aims to determine the antimicrobial resistance of staphylococci and streptococci isolated from milk with mastitis, and to genotypically characterize the methicillin-resistant (MR) staphylococci. Methods: Isolation was performed on blood agar and identification was based on biochemical reactions. Antimicrobial susceptibility was according to the Clinical and Laboratory Standards Institute guidelines. The antimicrobial resistance genes, SCCmec type and spa type were detected by the polymerase chain reaction method. Results: We isolated a total of 185 staphylococci and 28 streptococci from 148 milk samples. Among the staphylococcal isolates, 154 were identified as CNS and 31 as S. aureus. Among the 154 CNS, 24.6% (n = 38) were resistant to penicillin, 14.9% (n = 23) to erythromycin, 17.5% (n = 27) to clindamycin, 6.5% (n = 10) to cefoxitin and oxacillin. Among the S. aureus isolates, 16.1% (n = 5) were resistant to penicillin, 3.2% (n = 1) to cefoxitin and oxacillin (MRSA). Six MR isolates (5 CNS and 1 MRSA) were positive to the mecA gene, and presented the SCCmec IVa. The MRSA strain presented the sequence type 83 and the spa type 002. Among the 28 streptococcal isolates, 14.3% (n = 4) were resistant to penicillin, 10.7% (n = 3) to erythromycin and 14.3% (n = 4) to clindamycin. Conclusions: The present findings of this study indicate a development of antimicrobial resistance in main bacteria isolated from cows with mastitis in Argentina.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.35
no.1
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pp.39-46
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2008
The purpose of this study was to assess the cariogenic potential of infant confectionaries. In vitro, as compaired with 10% sucrose solution and whole bovine milk. Buffering capability were determined by amount of 0.1N lactic acid consumed to titrate the 50ml specimen solutions to pH 4.0. The pH of the specimen solution inoculated by streptococcus mutans was measured by pH meter and the surface microhardness tester, before and after 48 hours incubation. The buffering capacity of infant confectionaries was higher than that of sucrose solution and lower than that of milk, and there were significant difference between infant confectionaries(p<0.05). The pH of infant confectionaries after 48 hours incubation was similar to 10% sucrose solution, and there were significant difference between infant confectionaries and milk(p<0.05). The microhardness change of primary tooth enamel of infant confectionaries group after 48 hours incubation was similar to that of 10% sucrose solution, and there were significant difference between infant confectionaries and milk(p<0.05). In conclusion, infant confectionaries seemed to have the ability to cause dental caries in primary teeth, and there were significant differences of cariogenic potential among infant confectionaries. Cooperative efforts of dentistry and manufacturers to reduce the cariogenic potential of infant confectionaries would be necessary to prevent the early childhood caries in children.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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