유아기 우식증을 예방하기 위한 연구의 일환으로 이유식의 우식유발능을 생체외 방법으로 연구하였다. 국내에서 시판되는 5종의 이유식을 실험군으로 하고 10% 자당용액과 우유를 대조군으로 하였다. 시료용액 50ml의 pH를 4.0까지 낮추는데 소모된 0.1 N 유산용액의 양으로 완충능을 측정하였고, Streptococcus mutans 10449의 배양액을 접종하여 48시간 배양하기 전과 후에 각각 시료용액의 pH, 시료용액 속에 담근 유치 법랑질시편의 표면미세경도, 합성 hydroxyapatite로부터 용출된 칼슘이온의 농도를 측정하여 산 생성능과 탈회능을 평가하였다. 이유식의 완충능은 자당용액보다 크고 우유보다 작았으며, 이유식간에 유의한 차이가 있었다(P<0.01). 48시간 배양 후 이유식의 평균 pH는 3.88로서 자당용액의 4.35, 우유의 4.20보다 낮았고 자당용액과 유의 한 차이가 있었으며 (P<0.05), 이유식 상호간에도 유의한 차이가 있었다(P<0.01). 배양 전후의 유치 법랑질 표면미세경도의 차이는 이유식군이 평균 98.7 VHN로서 자당용액군의 97.1 VHN과 비슷하였고 우유군의 63.5 VHN보다 컸으나 차이가 유의하지 않았다. 합성 hydroxyapatite로부터 용출된 칼슘농도의 차이는 이유식군이 평균 1816.02ppm로서 자당용액군의 2235.98ppm보다 작았으나 차이가 유의하지 않았다.
원유에서 지방을 제거한 탈지유의 pH를 5.5, 7.0, 8.5로 조정한 다음 TGase를 첨가하여 0, 1, 2, 4, 8시간 반응시킨 후 동결 건조하여 조직의 성상을 주사 전자 현미경을 이용해 관찰, 비교하였다. pH와 TGase를 처리하지 않은 탈지유는 단백질 입자들이 규칙적으로 회합해 있었다. pH 조정 후 TGase를 처리한 다음 반응시간을 달리한 시료에서는 pH를 5.5로 조정한 경우 현저한 변화가 있었는데, 그 변화 양상은 단백질 입자들이 0시간에서 조각을 이루어 회합되어 있다가 1시간 반응시킨 경우 단백질 입자들이 서로 결합하여 넓게 회합하였다. 2시간 반응시킨 경우 단백질 입자들이 다시 뭉쳐서 회합하였으며 4시간 반응시킨 경우 뭉쳐져 있던 단백질 입자들이 조그만 한 구형 성상으로 넓게 회합하였다. 8시간 반응시킨 시료는 구형 성상으로 회합되어 있던 단백질 입자들이 사라지면서 다시 넓게 회합하는 것을 관찰할 수있었다. pH 7.0과 8.5 조건하에서는 단백질 입자들이 조각 형태를 이루고 있었으며 반응시간이 증가할수록 입자들이 넓게 확대되는 현상을 나타냈다. 전반적으로 현미경적 입자의 형태는 pH 5.5로 조정된 시료가 pH 7.0또는 pH 8.5로 처리된 시료들보다 더작게 관찰되었다. 이와 같은 단백질들의 현미경적 변화 양상은 pH TGase처러 그리고 반응시간에 따라 영향을 받고 있는 것으로 사료된다.
초유 casein micelle의 특성을 조사하였다. 분만직후의 초유로부터 정상유로 이행됨에 따라서 총단백질의 함량은 감소하였으며, casein과 유청단백질의 비율에 있어서 casein은 증가한 반면 유청단백질은 감소하였다. 한편 탈지시킨 초유를 $100,000{\times}g$에서 10분(pellet 1), 30분(pellet 2)및 60분(pellet 3)동안 초원심분리하여 casein micelle을 크기별로 분리하였고, 상징액 중의 casein(serum casein)을 pH4.6에서 산침전 시킴으로 제조하였다. 분만직후의 초유로부터 정상유로 시간이경과함에 따라서 크기가 큰 micelle (pellet 1)의 양은 점차 감소하는 경향을 나타내었고, 중간크기의 micelle (pellet 2)의 양은 분반직후의 것을 제외하면 거의 일정한 수준을 유지하였으며, 작은 크기의 micelle (pellet 3)의 양은 점차 증가하였고, serum casein의 양은거의 일정하게 나타났다. 또 초원심분리에 의하여 얻은 각 casein micelle의 casein함량 중 ${\alpha}_{s1}-$및${\alpha}_{s2}-casein$과${\beta}-casein-5P$의 양은 micelle의 크기가 작아짐에 따라 감소하였으나, x-casein의 양은 현저히 증가하였으며, ${\beta}-casein-1P$(f29~209), (f106-209) 및 (f108~209)의 양에 있어서는 큰 차이가 없었다. 또 serum casein의 조성은 전 casein과 비교하여 볼 때 차이가 있었다.
Zneng, Z. Y.;B. H. Sohn;K. B. Oh;W. J. Shin;Y. M. Han;Lee, K. K.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
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pp.46-46
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2003
Interleukin-10 (IL-10) is a homodimeric protein with a wide spectrum of anti-inflammatory and immune activities. It inhibits cytokine production and expression of immune surface molecules in various cell types. The transgenic mice carrying the human IL-10 gene in conjunction with the bovine $\beta$-casein promoter produced the human IL-10 in milk during lactation. Transgenic mice were generated using a standard method as described previously. To screen transgenic mice, PCR was carried out using chromosomal DNA extracted from tail or toe tissues with a primer set. In this study, stability of germ line transmission and expression of IL-10 gene integrated into host chromosome were monitored up to generation F15 of a transgenic line. When female mouse of generation F9 was crossbred with normal male, generation F9 to F15 mice showed similar transmission rates (66.0$\pm$20.13%, 61.5$\pm$16.66%, 41.1$\pm$8.40%, 40.7$\pm$20.34%, 61.3$\pm$10.75%, 49.2$\pm$18.82%, and 43.8$\pm$25.91%, respectively), implying that the IL-10 gene can be transmitted stably up to long term generation in the transgenic mice. For ELISA analysis, IL-10 expression levels were determined with an hIL-10 ELISA and a mIL-10 ELISA kit in accordance with the supplier's protocol. Expression levels of human IL-10 from milk of generation F9 to F13 mice were 3.6$\pm$1.20 mg/ml, 4.2$\pm$0.93 mg/ml, 5.7$\pm$1.46 mg/ml, 6.3$\pm$3.46 mg/ml, and 6.8$\pm$4.52 mg/ml, respectively. These expression levels are higher than in generation F1 (1.6 mg/ml) mice. We concluded that transgenic mice faithfully passed the transgene on their progeny and successively secreted target proteins into their milk through several generations, although there was a little fluctuation in the transmission frequency and expression level between the generations.
To investigate the effect of bovine colostral whey fractions on in vitro proliferation of mouse splenocytes, polypeptide fractions were separated from acid whey into 3 fractions depending on molecular weight by ultrafiltration: Fraction I, which contains the polypeptide larger than 10,000 Da, Fraction n, which contains the polypeptide ranging from 1,000 Da to 10,000 Da and Fraction III, which contains the polypeptide smaller than 1,000 Da. Fraction II showed the highest proliferative effect of mouse splenocytes among the colostral whey fractions and this proliferative activity increased in dose dependent manner. Unheated Fraction II and Fraction III showed significantly (p<0.01) higher proliferative effects than others but heated Fraction II showed the highest enhancing effect of mouse splenocyte among heated whey fractions (p<0.01). The supplementation of Fraction II and Fraction m showed greater proliferative effect of mouse splenocytes stimulated by concanavalin A (Con A) than that of whole whey or Fraction L Proliferative effect of mouse splenocytes stimulated by phytohemagglutinin (PHA) was the highest when Fraction II was supplemented Proliferative effect of the colostral whey fractions on mouse splenocytes by stimulation of lipopolysaccharide (LPS) was markedly enhanced by supplementation of Fraction II and Fraction m compared with whole whey and Fraction L It was estimated that colostral whey fraction containing IGF-I positively affected proliferation of mouse splenocyte.
본 연구는 우리나라 재래종인 한우로부터 초유를 얻어 Lf을 분리·정제한 후 한우 Lf의 생화학적 특성을 확인하였다. 정제된 한우 Lf은 분자량이 81,000Da이고 등전점은 pI 9였으며, 철함량이 0.56 mg/g으로 철 포화도는 약 40.6%로 측정되었다. 한우 Lf과 젖소 Lf은 아미노산 조성과 a-helix 함량에서 서로 다르게 나타났다. 또한, 항원 항체 반응으로 확인한 결과, K-Lf과 B-Lf 간에는 교차반응을 보였으나 H-Lf과는 교차반응을 보이지 않았다.
본 연구는 젖소 초산우, 2산, 3산, 4산, 5산, 6산, 7산, 그리고 8산 초유의 분만 직후부터 5일간 전기영동을 통한 단백질 변화를 조사하였다. 분만 직후부터 5일간 전체적인 단백질 함량의 변화를 보면 초일 대부분의 단백질이 많이 함유되어 있다가 시간이 경과할수록 점점 감소하는 것을 보여주었다. 특히 면역과 감염예방에 관련되어 있는 면역 글로불린과 락토페린의 일일변화는 시간이 경과할수록 현저한 감소를 보여주었다. 면역글로불린은 분만 후 초일에 많은 함유량을 나타내고 있으나, 2일 후부터 현저히 감소하였으며, 이후 5일까지 감소하였다. 또한 락토페린도 분만 후, 초일에는 현저히 높은 함량을 나타내었다. 그러나 2일부터 면역글로불린과 같이 유의적으로 감소하는 것을 보여 주었다. 그 외, 혈액 내에서 여러 가지 기능을 하고 있는 것으로 알려져 있으나, 우유 속에서는 그 중요성이 낮은 것으로 보고된 혈청알부민은 분만 후 초일에는 함량이 높은 수준이었으나, 2일부터 함량이 급격히 감소되었다. 그 후, 3일부터 5일까지는 그 함량이 동일하게 유지되는 것을 보여주었다. 한편, 각 산차별 분만 후 일일 젖소 초유의 단백질 함량에 대하여 비교한 결과, 산차에 의한 단백질 함량의 차이는 나타나지 않았다.
Cloning technology continues to capture widespread attention by the international news media and biomedical and agricultural industries. The future uses of this technology could potentially contribute to major advances in biomedical and agricultural sciences. Cloned transgenic dairy cattle possessing milk promoters directing transgenes will produce pharmaceutical proteins in their milk faster, more efficiently and less expensively than transgenic cattle created using microinjection techniques. Additionally, cloned transgenic fetuses and animals may become a source of cells, tissue and organs for xenotransplantation. Lastly, but maybe most importantly, enhanced production traits and disease resistance may be realized in animal agriculture by utilizing these new technologies. The recent advances in the cattle cloning technology are important but there are still major obstacles preventing widespread commercial use of this technology. The type of donor nucleus, recipient cytoplasm, and cloning procedures used will impact the potential number of clones produced and the uses of the technology. In addition, the new advances in cloning methodology have not improved the relatively low pregnancy rates or reduced the incidence of health problems observed in cloned offspring. These problems may require novel techniques to decipher their cause and new methods of preventing and/or diagnosing them in the preimplantation embryo. The commercial potential is enormous for cloning technology; however, little has been done to improve the efficiencies of the procedure. Improving procedural efficiencies is a critical developmental milestone especially for potential uses of cloning technology in animal agriculture.
Bhatt, Vaibhav D.;Khade, Prasad S.;Tarate, Sagar B.;Tripathi, Ajai K.;Nauriyal, Dev S.;Rank, Dharamshi N.;Kunjadia, Anju P.;Joshi, Chaitanya G.
대한수의학회지
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제52권4호
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pp.231-238
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2012
The expression profiles of inflammatory cytokines viz. interleukins (IL)-6, IL-8, IL-12, granulocyte macrophage-colony stimulating factor, interferon-${\gamma}$ and tumor necrosis factor-${\alpha}$ in response to subclinical mastitis in indigenous cattle breed Kankrej (n = 6), Gir (Bos indicus) (n = 12) and crossbred (Bos taurus${\times}$Bos indicus) (n = 7) were investigated using quantitative real time PCR. Significant correlation (p < 0.05) was observed between total bacterial load and somatic cell count (SCC) in all three breeds of cattle. All the cytokines were observed to be up-regulated compared to cows with healthy quarters, however, level of their expression varied among three breeds of cattle. In Kankrej most cytokines were found to be transcribed to higher levels than in other two breeds; the milk had higher load of bacteria but not so high SCC, implying that Kankrej has a higher inherent resistance against mastitis. The results of present study indicated that mammary glands of crossbred cattle are more sensitive to bacterial infection than indigenous breed of cattle as they elicit immune response at lower bacterial load and result into higher SCC. Research on identification of factors responsible for differentially expressed cytokines profiles and use of cytokines as immunomodulatory tools can pave way for formulating control strategies against bovine mastitis.
The present study describes an investigation on an epidemic of Tuberculosis (TB) which has been occurred among dairy cattle farms in Jeongeup, Jeollabuk-do since 2007. The investigation was performed in three ways as follows: 1. Collecting information about bovine TB outbreaks using investigation reports, an on-the-spot and tracing-back investigations; 2. Analyzing the outbreak pattern; 3. Establishing hypothesis and performing statistical analysis on potential risk factors. In the early 2000s, TB outbreaks were sporadically reported in beef cattle, and only a small number ($1{\sim}2$) of reactors was confirmed in each of outbreak farms. The number of TB outbreaks has been suddenly increased from 2007, mainly in dairy cattle farms. And these outbreaks were temporarily clustered during the period, from March 2007 to April 2009 (relative risk, RR = 13.7, p < 0.001). And two spatial clusters of which radiuses were 0.3 km (RR = 6.9, p < 0.001) and 0.9 km (RR = 3.6, p < 0.01). The analysis to find risk factors was performed on 99 dairy farms (21 outbreaks), which are located in the most seriously affected village during 2007-2009. Middleman (odds ratio, OR = 47.4, p < 0.05) and raw milk collecting system (OR = 6.9, p < 0.05) were recognized as with the highest association. Considering the fact that all the outbreak farms except one had their own manure composting tank, it might be that the manure containing pathogen was leaked from tank and transmitted to other farms by fomites such as middleman or raw milk collecting system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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