대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.271.3-272
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2003
Rhus verniciflua Stokes (RVS) is a widely used herbal plant with various biological properties. Our previous study using in vitro platelet aggregation in whole blood showed that the fractions of RVS had strong anti-aggregatory activity. In this study, using in vitro platelet aggregation in PRP and coagulation parameters, to investigate the anti-platelet activity and anticagulant effects of RVS ethyl acetate layer, the layer was subsequently fractionated by ODS columm chromatograph (50% MeOH). (omitted)
We executed this experiment to observe side effects of warfarin, the anticoagulant that is used for preventing thrombus in cardiovascular surgery for calves. The 6 calves(70-130 kg) were used in this experiment regardless of sexes. We administered warfarin at 0.07 mg/kg daily for 25 days. Blood was collected before warfarin administration, every five days for 30 days. PCV, RBC, WBC, fibrinogen, total protein and platelet as blood test, prothrombin time (PT) as blood coagulation test, and AST, SDH, total bilirubin, BUN and creatinine as serum biochemical tests were measured. As the result of the experiment, PT has been gradually increased after warfarin administration. It has been gradually increased and remains within the therapeutic range from the third day to the 28th day. PCV and RBC were decreased significantly from the value before the administration (p < 0.05). In the serum biochemical test, SDH shows significant increase comparing the value before the administration (p < 0.05). AST and total bilirubin were increased gradually from the value before the administration. Considering the result of the experiment, to give wafarin to prevent thrombus in cardiovascular surgery, we can get anticoagulation effect with minimal administration(0.07 mg/kg, PO) from the third day of the administration. However because of the decreased PCV and RBC, it may cause anemia. It may cause damage to liver based on the result of serum biochemical test.
Kim, Hye Jin;Shim, Kyou Hee;Yeon, Seung Ju;Shin, Hwa Sung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권2호
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pp.275-283
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2018
Ischemic stroke can result from blockage of blood vessels, forming fibrin clots in the body and causing irreparable brain damage. Remedial thrombolytic agents or anticoagulants have been studied; however, because the FDA-approved tissue plasminogen activator has low efficacy and side effects, it is necessary to develop safer and more effective treatment candidates. This study aimed at assessing the fibrinolytic and anticoagulation features of a novel serine protease extracted and purified from Diopatra sugokai, a polychaeta that inhabits tidal flats. The purified serine protease was obtained through ammonium sulfate precipitation, affinity chromatography, and ion-exchange chromatography. Its molecular size was identified via SDS-PAGE. To characterize its enzymatic activities, the protease activity at various pH and temperatures, and in the presence of various inhibitors, was measured via azocasein assay. Its fibrinolytic activity and anticoagulant effect were assessed by fibrin zymography, fibrin plate assay, and fibrinogenolytic activity assays. The novel 38 kDa serine protease had strong indirect thrombolytic activity rather than direct activity over broad pH (4-10) and temperature ($37^{\circ}C-70^{\circ}C$) ranges. In addition, the novel serine protease exhibited anticoagulant activity by degrading the ${\alpha}$-, ${\beta}$-, and ${\gamma}$-chains of fibrinogen. In addition, it did not produce cytotoxicity in endothelial cells. Therefore, this newly isolated serine protease is worthy of further investigation as a novel alkaline serine protease for thrombolytic therapy against brain ischemia.
Ryu, Ri;Jung, Un Ju;Kim, Hye-Jin;Lee, Wonhwa;Bae, Jong-Sup;Park, Yong Bok;Choi, Myung-Sook
Preventive Nutrition and Food Science
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제18권3호
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pp.181-187
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2013
Artemisia princeps Pampanini (AP) has been used as a traditional medicine in Korea, China and Japan and reported to exhibit various beneficial biological effects including anti-inflammatory, antioxidant, anti-atherogenic and lipid lowering activities; however, its antiplatelet and anticoagulant properties have not been studied. In the present study, we evaluated the effects of an ethanol extract of Artemisia princeps Pampanini (EAP) and its major flavonoids, eupatilin and jaceosidin, on platelet aggregation and coagulation. To determine the antiplatelet activity, arachidonic acid (AA)-, collagen- and ADP (adenosine diphosphate)-induced platelet aggregation were examined along with serotonin and thromboxane A2 ($TXA_2$) generation in vitro. The anticoagulant activity was determined by monitoring the activated partial thromboplastin time (aPTT) and prothrombin time (PT) in vitro. The data showed that EAP and its major flavonoids, eupatilin and jaceosidin, significantly reduced AA-induced platelet aggregation and the generation of serotonin and $TXA_2$, although no significant change in platelet aggregation induced by collagen and ADP was observed. Moreover, EAP significantly prolonged the PT and aPTT. The PT and/or aPTT were significantly increased in the presence of eupatilin and jaceosidin. Thus, these results suggest that EAP may have the potential to prevent or improve thrombosis by inhibiting platelet activation and blood coagulation.
The study was performed to investigate the biological activity of Enteromorpha intestinalis. In order to examine its blood anti-coagulant effects, Enteromorpha intestinalis was extracted with cold water, methanol, hot water, HCl and NaOH. In general, the alkali extract of Enteromorpha intestinalis was approximately 17 times stronger than the control. The anti-cancer effects of select extracts(methanol, hot water, 0.1 N NaOH, 1 N NaOH) were determined in human melanoma cells(Bl6/F10), fibrosarcoma cells(HTl080) and breast cancer cells(MCF7) by MTT assay. With the treatment of 250 ${\mu}g/m{\ell}$ of methanol extracts. HT1080, B16/F10 and MCF7 cell viabilities significantly decreased to 8.06%, 3.62% and 10.10%, respectively. Thus these results strongly support the possibie use of Enteromorpha intestinalis as a functional materials.
It has long been known that Jahage(紫河車) extracts of Placenta hominis are effective for immunological and vascular diseases in human body and thus, was used a major constituent of traditional oriental medicines. From full-term human placenta, we have purified a new type anticoagulant protein, PP27, using different chromatographic techniques of a phenyl TSK gel 650M column, DEAE, HA and Mono-Q columns. PP27 showed single band on SDS-PAGE with a molecular mass (Mr) of 27 kDa under denaturing conditions and a calibrated Sepharose 4B column chromatography indicated a molecular mass of 23 kDa, indicating that the value is similar to those of other PP4 enzyme reported to date. Isoelectric point of PP27 was p15.2. The protein was found to inhibit the coagulation time in a concentration-dependent manner. PP27 was acted as a vascular anticoagulant of annexin type, inhibits the blood clotting process by binding of the essential lipids in a reaction which is dependent on $Ca2^+$ ions. In the presence of $Ca2^+$ ions, PP27 combines with platelet membranes neutralizing their procoagulant effect. Coagulation triggered by the addition of thromboplastin/ lipid- mixtures is extinguished by PP27.
Park Hyung Dal;Bae Jin Woo;Park Ki Dong;Ooya Tooru;Yui Nobuhiko;Jang Jun-Hyeog;Han Dong Keun;Shin Jung-Woog
Macromolecular Research
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제14권1호
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pp.73-80
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2006
Sulfonated poly(ethylene glycol) (PEG-$SO_{3}$) grafted polyrotaxanes (PRx-PEG-$SO_{3}$) were prepared in order to utilize the unique properties of PEG-$SO_{3}$ and the supramolecular structure of PRx, in which PEG-$SO_{3}$ grafted $\alpha$-cyclodextrins ($\alpha$-CDs) were threaded onto PEG segments in a PEG-b-poly(propylene glycol) (PPG)-b-PEG triblock copolymer (Pluronic) chain capped with bulky end groups. Some of the PRx-PEG-$SO_{3}$ demonstrated a higher anticoagulant activity in case of PRx-PEG-$SO_{3}$ (P 105), and compared with the control they showed a lower fibrinogen adsorption in PRx-PEG-$SO_{3}$ (F68) and a higher binding affinity with fibroblast growth factor. The obtained results suggested that polyrotaxane incorporated with PEG-$SO_{3}$ may be applicable to the surface modification of clinically used polymers, especially for blood/cell compatible medical devices.
목이버섯으로부터 항혈전활성과 항혈소판응집활성을 지니는 물질을 추출하여 추출물의 혈행개선활성을 조사하였다. 건조 목이버섯을 0.1 N NaOH, methanol, ethanol 등의 용매를 사용하여 추출하여 각 추출물의 항혈전활성을 activated partial thromboplastin time, thrombin time과 prothrombin time 값으로 측정한 결과 methanol 용해성 분획이 각각 100, 124, 54 s로 조사한 분획 중에서 가장 높은 활성을 나타내었다. 활성 분획을 DEAE-Sepharose CL6B ion exchange column chromatography와 Sephacryl 400-HR gel permeation column chromatography로 정제하였으며 활성물질은 분자량이 150 kDa 이상인 다당류이며 mannose가 주요 구성당으로 되어 있는 xyloglucomannan의 복합다당체인 것으로 확인되었다. 정제된 다당류의 항혈전활성은 thrombin 활성을 저해하기 때문인 것으로 해석되었다.
스피루리나를 세포벽 가수분해효소와 단백질 가수분해효소로 처리하여 조제한 스피루리나 가수분해물(enzymatic hydrolysate of spirulina, EHS)의 생리활성을 조사하였다. 효소처리 가수분해물의 유산균 증식효과, 항산화능, 암세포 증식저해 활성, 항혈전 활성을 분석한 결과 EHS는 유산균 증식활성과 항산화능에 큰 영향을 미치지 않았으며, 자궁경부암세포(HeLa)에 대해 1.42 mg/L의 농도에서 15% 미만의 증식저해효과를 나타내었다. 반면 항혈전 활성을 공통 경로(common pathway), 내인성 경로(intrinsic pathway), 외인성 경로(extrinsic pathway)로 구분하여 측정한 결과, 공통경로, 내인성 경로와 유사한 항혈전 활성이 있음을 확인하였다. 공통 경로를 thrombin time assay로 측정한 결과 EHS의 농도가 100 mg/L일 때 155.6초를 나타내었다. 내인성 경로는 activated partial thromboplastin time assay로 측정하였고, EHS의 농도가 1000 mg/L일 때 95.8초를 나타내었다. 외인성 경로를 prothrombin time assay로 측정한 결과 EHS의 농도가 1000 mg/L일 때 10.6초를 나타내었다. 결과적으로 스피루리나 효소가수분해물(EHS)이 항혈전경로 중 공통경로와 내인성 경로에 활성이 있음을 알 수 있었으며, 이를 토대로 신규의 항혈전 기능성 원료로 개발될 수 있을 것으로기대된다.
The in vitro anticoagulant and fibrinolytic activities of crude extracts from insects were evaluated in order to find effective therapeutic drugs for the treatment of myocardial and cerebral thrombosis. We prepared three types of extracts (water, methanol and ethylacetate) from 28 insects for use as raw materials for the activity assays. The fibrinolytic activity was tested using the fibrin plate method and the activated partial thromboplastin time and thrombin time were measured for blood clotting activity. With regards to the fibrinolytic system, water extracts of six kinds of insects displayed a remarkable level of activity with a plasmin-like action. The water extracts of [Catharsius molossus, Eupolyphaga sinensis, Huechys sanguinea, Mantidis $o\ddot{o}theca$, Mimela splendens, and Polistes mandarinus (Vespae Nidus)] exhibited the activity. On the other hand, the methanol extracts did not display any fibrinolytic activity. In terms of the coagulation system, an aqueous extract of silkworm Tongchunghacho (Paecilomyces japonica), Oxya japonica japonica and Buthus martensi (Scorpion) increased the clotting time significantly longer (181 times) than the control. These results suggest that crude drugs from insects are useful sources for the development of new drugs for use in treatments involving blood coagulation and fibrinolysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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