Proceedings of the Korean Society of Near Infrared Spectroscopy Conference
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2001.06a
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pp.1247-1247
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2001
Constituents of animal biofluids such as milk, blood and urine contain information specifically related to metabolic and health status of the ruminant animals. Some changes in composition of biofluids can be attributed to disease response of the animals. Mastitis is a major problem for the global dairy industry and causes substantial economic losses from decreasing milk production and reducing milk quality. The purpose of this study was to investigate potential of NIRS combined with multivariate analysis for cow's mastitis diagnosis based on NIR spectra of milk, blood and urine. A total of 112 bulk milk, urine and blood samples from 4 Holstein cows were analyzed. The milk samples were collected from morning milking. The urine samples were collected before morning milking and stored at -35$^{\circ}C$ until spectral analysis. The blood samples were collected before morning milking using a catheter inserted into the carotid vein. Heparin was added to blood samples to prevent coagulation. All milk samples were analyzed for somatic cell count (SCC). The SCC content in milk was used as indicator of mastitis and as quantitative parameter for respective urine and blood samples collected at same time. NIR spectra of blood and milk samples were obtained by InfraAlyzer 500 spectrophotometer, using a transflectance mode. NIR spectra of urine samples were obtained by NIR System 6500 spectrophotometer, using 1 mm sample thickness. All samples were divided into calibration set and test set. Class variable was assigned for each sample as follow: healthy (class 1) and mastitic (class 2), based on milk SCC content. SIMCA was implemented to create models of the respective classes based on NIR spectra of milk, blood or urine. For the calibration set of samples, SIMCA models (model for samples from healthy cows and model for samples from mastitic cows), correctly classified from 97.33 to 98.67% of milk samples, from 97.33 to 98.61% of urine samples and from 96.00 to 94.67% of blood samples. From samples in the test set, the percent of correctly classified samples varied from 70.27 to 89.19, depending mainly on spectral data pretreatment. The best results for all data sets were obtained when first derivative spectral data pretreatment was used. The incorrect classified samples were 5 from milk samples,5 and 4 from urine and blood samples, respectively. The analysis of changes in the loading of first PC factor for group of samples from healthy cows and group of samples from mastitic cows showed, that separation between classes was indirect and based on influence of mastitis on the milk, blood and urine components. Results from the present investigation showed that the changes that occur when a cow gets mastitis influence her milk, urine and blood spectra in a specific way. SIMCA allowed extraction of available spectral information from the milk, urine and blood spectra connected with mastitis. The obtained results could be used for development of a new method for mastitis detection.
Alcohol consumption triggers toxic effect to organs and tissues in the human body. The risks are essentially thought to be related to ethanol content in alcoholic beverages. The identification of ethanol in blood samples requires rapid, minimal sample handling, and non-destructive analysis, such as Raman Spectroscopy. This study aims to apply Raman Spectroscopy for identification of ethanol in blood samples. Silver nanoparticles were synthesized to obtain Surface Enhanced Raman Spectroscopy (SERS) spectra of blood samples. The SERS spectra were used for Partial Least Square (PLS) for determining ethanol quantitatively. To apply PLS method, $920{\sim}820cm^{-1}$ band interval was chosen and the spectral changes of the observed concentrations statistically associated with each other. The blood samples were examined according to this model and the quantity of ethanol was determined as that: first a calibration method was established. A strong relationship was observed between known concentration values and the values obtained by PLS method ($R^2=1$). Second instead of then, quantities of ethanol in 40 blood samples were predicted according to the calibration method. Quantitative analysis of the ethanol in the blood was done by analyzing the data obtained by Raman spectroscopy and the PLS method.
Eum Sung-Shim;Koh Won-Seuk;Hur Cheal-Ho;Bae Joung-Jun
Korean Journal of Veterinary Service
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v.29
no.2
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pp.103-110
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2006
Ticks cause economic losses to the deer industry by decreasing the growth and production of the farmed animals. The mediation of ticks affects humans and animals by causing contagious disease both directly and indirectly. Blood from farmed deer from the areas near Jangsu branch was collected for screening of infectious protozoa and rickettsial disease. Seventy deer blood samples were collected from 30 different deer farms located in Jinan, Jangsu and Muju. This blood samples were used for blood slide smear examination and hematological analysis. DNA from these samples was extracted and was used for PCR analysis for detection of gene fragments of Theileria spp, Babesia spp, Anaplasma spp and Ehrlichia spp. In the blood slide smear examination and PCR analysis all samples did not show presence of protozoal and rickettsial diseases. Eight blood samples showed anemia, 1 sample showed iron deficiency and 7 samples showed regenerative anemia. Results for PCR analysis showed 2 samples were positive for T orientalis. All DNA samples were negative for Babesia spp, Anaplasma spp, and Ehrlichia spp.
The fractional synthesis rates(FSR) were measured with 2l-wk and 3l-wk-old broiler breeder pullets and hens to investigate the effect of sexual maturity on FSR. The FSR were obtained from chicken tissues and blood samples using High-Performance Liquid Chromatography/Mass Spectrometry(HPLC/MS). A L-l-13C, 15N -leucine saline solution was infused by bolus injection as a tracer into broiler breeder pullets in the experiment. A rapid HPLC/MS method was developed to measure the isotopic enrichments of leucine in plasma, tissue samples, and eggs. The enrichments of stable isotope leucine incorporated into protein and the enrichments of the stable isotope free leucine were measured in liver, breast muscle and blood samples. Two sets of experiments were conducted. In experiment one, 2l-wk-old, sexually immature broiler breeder pullets were divided into groups of three and blood samples were collected at 20 or 30 min intervals until 1.5 h from initial injection. The pullets were sacrificed in groups of three at varying time intervals for 7 h after injection. The liver, breast muscle and blood samples were removed for analysis. The FSR were estimated to be 8.7l%/day for liver, 4.06%/day for breast muscle, and 5.08%/day for blood samples in 30 minutes after injection from the enrichment ratios. In experiment two, sexually matured 3l-wk-old broiler breeder hens were assorted into groups of three and blood samples were obtained at 20 or 30 min intervals for 2 h. The FSR for blood samples were determined. The broiler breeder hens were sacrificed in groups of three at various time intervals until 7 h after injection and liver, breast muscle and blood samples were removed for analysis. The FSR were calculated to be 5.96%/day for liver. Eggs were collected from five chickens daily for 10 days after large bolus injection. The average of total enrichments of stable isotope in egg albumin was increased by 0.064% at 4 days after injection and was back to normal in 7 days.
Delayed arrival of blood samples from the field and a large number of samples delivered often causes delay in sample analysis leading to inaccurate measurements. Therefore, this study aimed to assess whether prolonged storage in refrigerator could influence the stability of cattle blood samples and to establish an optimal time limit for complete blood count (CBC) parameters and blood gas and electrolyte (BGE) parameters analyses. Samples collected from healthy cows were tested immediately for CBC and BGE using automated hematology, blood gas and electrolyte analyzers. Samples were kept in refrigerator at 4℃ and analyzed after 6 h, 12 h, 24 h, 48 h, 72 h, 120 h, and 192 h of storage. Mean differences between observations were assessed at 5% significance level using ANOVA and Duncan's multiple range test. Total CBC parameters and the platelet profile remained stable for 192 h, except for MCHC. Among leukocyte-related counts, NEU and EOS remained stable for 192 hours. WBC and LYM, and MONO values produced inconsistent measurements which recovered its initial measurement after 12 h and 24 h of storage, respectively, then remained stable until 120 h. Among the blood gas indices, PCO2, PO2, tCO2, and BE showed declining and significant changes over time, but pH, tHb, and SO2 remained stable for 192 h. Electrolyte status in the blood showed that ions are unstable and tend to change in as early as 6 h of storage. This study established that cattle blood specimens for CBC analysis can be stored for 120 h at 4℃, but specimens for BGE analyses must be tested within 6 to 24 h.
A survey on procine eperythrozoonosis was conducted by the blood smear examinations and the animal inoculation tests with heparinized blood samples collected from slaughtered pig. The results obtained were as follows : 1. In the microscopic examination of the blood smears, 2(0.43%) of 455 slaughtered pigs in Seoul were infected with eperythrozoa, while none of 45 blood samples in Jeonbuk province was infected. The average infection rate of these areas was 0.4%. 2. In the animal inoculation tests, the eperythrozoa were detected in the splenectomized pigs 6 days after subcutaneous inoculation of the blood samples obtained from 100 pigs in Seoul, and the positive rate of slaughtered pigs was at least more than 1%.
A total of 782 blood and 465 tissue samples from 1,039 wild animals and 127 dairy goats were collected from January 2011 to December 2013 in 10 provinces of South Korea and tested for the presence of brucellosis. The Rose Bengal test revealed that 8.0% (52/650) of the serum samples were seropositive, while 4.2% (33/782) of the serum samples were positive for Brucella antibodies by competitive enzyme-linked immunosorbent assay. Of the 650 sera examined, only 16 (2.5%) were positive by both serological tests. Direct polymerase chain reaction (PCR) assay using B4/B5 primers for Brucella abortus (BCSP31) revealed the prevalence of Brucella to be 26.5% (129/487) in blood samples and 21% (98/465) in tissue samples while, 16S rRNA PCR detected Brucella DNA in 6.8% (33/487) and 2.6% (12/465) in blood and tissue samples, respectively. Of PCR-positive samples, only 6.2% (30/487) of blood samples and 2.4% (11/465) of tissue samples were found to be positive by both BCSP31 and 16S rRNA PCRs. However, Brucella strains were isolated by blood culture from only two out of 487 blood samples (0.4%). This characterization and identification of pathogenic Brucella isolates is the first to clearly indicate that the organisms were Brucella abortus biovar 1.
The present study investigates the hemorheological characteristics of blood flow with applying vibration to a non-aggregating red blood cell suspension. In order to obtain the non-aggregating RBC suspension, blood samples were treated with vibration at a specified condition, which viscosities were taken before and after the treatment, respectively. The viscosity of the blood samples after treatment was higher than before treatment. These treated blood samples were forced to flow through a capillary tube that was vibrated perpendicularly to the direction of the flow. The experimental results showed that vibration caused a reduction of the flow resistance of the non-aggregated blood. The reduction of the flow resistance was strongly dependent on both frequency and amplitude of vibration. These results show potential in treating various diseases in the microcirculation associated with blood cell aggregation.
The polymerase chain reaction(PCR) assay was used for rapid diagnosis from blood and organ samples experimentally infected with Listeria monocytogenes. This method used a pair of primers based on a unique region in the 16S rRNA sequence of L monocytogenes. Procedure A was based on dilution of the blood sample followed by lysis of bacterial cell and direct analysis of the lysate with PCR. In artificially infected blood samples with L monocytogenes, it was possible to detect fewer than 40 cells per ml of blood. However, L monocytogenes was detected low rates on infected organs by the direct PCR. In procedure B, enrichment cultivation was used to increase numbers of bacteria before lysis and PCR. L monocytogenes was detected from 23 samples of 24 liver and spleen, respectively, and 18 samples of 24 blood were found to be positive by PCR on a subset of 72 organ samples, whereas L monocytogenes were detected on 63 organ samples in classical culture technique. It was required to analyze including enrichment steps were 6h and 18h on the procedure A and B, respectively.
Canine brucellosis produce abortions and infertility in dogs and is currently diagnosed by serological methods such as rapid slide agglutination test with 2-mercaptoethanol (2-ME RSAT) and immunochromatographic assay (ICA). Bacterial isolation is considered gold standard for Brucella diagnosis and the polymerase chain reaction (PCR) is an alternative method to bacterial isolation. A total of 36 whole blood samples were collected from dogs reared in area of Chuncheon and were subjected to serology (2-ME RSAT and ICA for B. canis, Rose Bengal test and C-ELISA for B. abortus), blood culture and 3 types of PCRs (BSCP31, 16s rRNA, and OMP-2). All blood samples were negative by serology and blood cultures. The BCSP31 and the OMP-2 PCR detected 5 samples were positive whereas the 16S rRNA PCR detected all samples were negative as serological methods and blood culture did. From the results observed in the present study, we conclude that 16S rRNA PCR could be used for direct PCR for canine blood samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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