The role of macrophages in the resistance of ICR mice to Candida albicans and Salmonella typhimurium was assessed using silica, agent which selectively inactivates macrophages or poly-2-vinylpyridine-N-oxide(PVNO), a lysosomal stabilizing agent. In addition, effect of silica on humoral and cellular immune responses to sheep red blood cells(SRBC) or polyvinylpyroridone(PVP) was examind. Colonyforming units(CFU) of C. albicans or S. typhimurium in the spleen, livers and kidneys of silica-treated or diluent-treated mice were enumerated at various times after infection. Silica was given i. v. to mice at 4 days or 1 day before infection. Although there was no apparent differences in the number of CFU of C. albicans cultured from the spleens or livers of silica-treated and control mice at every assay period, significant differences in the number of CFU of C. albicans in the kidneys of silica-treated and control mice. Namely, silica given to mice 1 day before infection significantly increased the number of CFU of C. albicans in the kidneys at 2, 4 and 6 days after infection, but did not change the number of CFU at 8 days after infection. Silica given to mice at 4 days before infection significantly increased the number CFU in the kidneys at 2 and 4 days after infection, but rather decreased the number of CFU at 8 days after infection. The number of CFU of C. albians cultured from the kidneys of splenectomized which were experimentally infected mice was similar to the number recovered from sham-operated mice at 4 and 8 days postinfection irrespective of time of infection relative to operation. The pretreatment of mice with PVNO appeared to abrogate the silica-induced susceptibility of mice to C. albicans. PVNO alone showed somewhat protective effect against challenge with C. albicans. In contrast, silica treatment did not alter the number of CFU of S. typhimurium recovered from the spleens and kidneys of mice. The administration of silica to mice at 4 days or 1 day before SRBC immunization significantly suppressed delayed-type hypersensitivity(DTH) reactions to SRBC and antibody production to SRBC, a thymus-dependent antigen and PVP, a thymus-independent antigen. These results provide evidence that macrophages play an important role in susceptibility to Candida infection and strongly demonstrated that macrophages play an essential role in the induction of immune responses in mice.
본 연구는 운동부하와 DNA 및 칡 crude catechin의 급여에 의한 생체내 성분 변화를 알아보기 위하여 흰쥐를 대조군, 운동부하군, 운동부하+DNA 및 운동부하+DNA+crude catechin 첨가군으로 나누어 사육하였다. 각각 0.4% DNA와 0.1% 칡crude catechins을 해당 횐쥐에 급식시켰으며, 운동부하군은 Treadmill에서 20 m/min의 속도로 6주 동안 운동시켰다. 사육실험종료 후 체중 증체량과 체지방무게를 먼저 칭량한 후, 항산화활성과 체지방조성을 kit assay를 이용하여 측정하였다. 6주후 각 군간의 최종 체중에는 유의적인 차이가 없었으나 간장, 부고환주위지방 및 신장주위지방은 운동부하군, 운동부하+DNA 첨가군 및 운동부하+DNA+crude catechin 첨가군이 대조군에 비해 유의하게 낮은 값(p<0.05)을 나타냈다. 또, 혈중 phospholipid, cholesterol 및 triglyceride농도는 운동부하군, 운동부하+DNA 첨가군 및 운동부하+DNA+crude catechin 첨가군이 대조군에 비해 유의하게 낮았으나(p<0.05), HDL-cholesterol은 유의하게 높은 값을 나타냈다. GPT 활성은 각 군간에 유의차가 없었으나, GOT활성은 운동부하를 처리한 군에서 적은 수치를 나타냈으며, TBA가는 각 군간에 유의 차가 없었다. 또, 혈중 NEFA 수준은 운동부하+DNA+crude catechin 첨가군이 대조군에 비해 유의하게 높은 값을 나타냈다.(p<0.05). 이상의 실험에서 운동과 더불어 crude catechin 섭취가 유의한 차이를 나타내지는 않았지만 혈청지질의 성분의 향상에 보조역할을 할 것으로 사료된다.
혈관신생의 억제는 암과 같은 신생혈관형성 질환의 치료를 위해 유용한 접근법이다. 신생혈관형성의 핵심인자인 혈관내피세포성장인자는 신생혈관형성 질환의 치료를 위한 주요한 표적이다. 그러므로, 본 연구에서는 in vitro 분석과 ex vivo 동물 실험을 통해 황금 열수추출물의 신생혈관형성 억제효과를 연구했다. 본 연구결과에서 황금 열수추출물이 혈관내피세포성장인자에 의해 자극된 혈관내피세포에 있어 세포독성 없이 세포의 이동, 침투, 관형성을 농도 의존적으로 억제하였다. 더 나아가 황금 열수추출물은 혈관내피세포성장인자에 의해 유도된 흰쥐 대동맥 주변 미세혈관 발아를 예방하였다. 본 연구결과들은 황금 열수추출물이 신생혈관형성 억제작용이 있고, 이는 혈관내피세포성장인자에 의해 유도된 혈관신생을 억제 하는 잠재적 소재가 될 수 있음을 제안한다.
혈전성 질환을 예방, 개선할 수 있는 안전한 항혈전제를 개발하기 위해, 일반적으로 항혈전 효과가 있다고 알려진 식용 해조류 35종(갈조류 17종, 홍조류 11종 및 녹조류 7종)을 대상으로 메탄올 추출물을 조제하고, 이들의 thrombin time (TT), prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (aPTT)을 평가하였다. 트롬빈 저해(TT)의 경우 35종 중에서 감태, 곰피, 대황, 넓패, 패, 알송이모자반 및 야마다모자반에서 강력한 활성을, 프로트롬빈 저해(PT)의 경우 트롬빈 저해활성이 나타난 7종 중 야마다모자반을 제외한 6종에서 강력한 활성을 확인하였으며, 혈액응고인자 저해(aPTT)에서는 감태, 곰피, 대황, 넓패, 패, 알송이모자반 및 톳에서 강력한 활성이 나타났다. 선별된 8종의 시료를 대상으로 다양한 농도에서 항혈전 활성을 평가한 결과 알송이모자반에서 가장 강력한 활성을 확인하였으며, 곰피, 대황 및 넓패가 효과적이었다. 항혈전 활성과 해조류 추출물의 총 flavonoid, 총 polyphenol, 총당 및 환원당 함량과의 상관 관계를 검토한 결과, 활성물질은 flavonoid성 물질로 추측되었으며, 선별된 8종은 총 flavonoid 함량 및 총 polyphenol 함량이 매우 높은 특징을 나타내었다. 본 연구 결과는 경제적이면서 대량공급이 가능한 식용 해조류로부터 신규의 안전한 항혈전제 개발이 가능함을 제시하며, 야마다모자반과 톳은 트롬빈 또는 혈장내 응고 인자에 대한 특이 저해제로 개발 가능함을 제시하고 있다.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제37권3호
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pp.195-204
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2011
Introduction: This study examined the regulatory mechanism underlying the meal-induced changes in the hypothalamic-pituitary-adrenal gland (HPA) axis activity. Materials and Methods: Male Sprague-Dawley rats (250-300 g) were hired for two different experiments as follows; 1) rats received either 8% sucrose or 0.2% saccharin ad libitum after 48 h of food deprivation with the gastric fistula closed (real feeding) or opened (sham feeding). 2). rats received 5 ml of intra-oral infusion with 0.2% saccharin or distilled water after 48 h of food deprivation. One hour after food access, all rats were sacrificed by a transcardiac perfusion with 4% paraformaldehyde. The brains were processed for c-Fos immunohistochemistry and the cardiac blood was collected for the plasma corticosterone assay. Results: Real feedings with sucrose or saccharin and sham feeding saccharin but not sucrose, following food deprivation decreased the plasma corticosterone level. c-Fos expression in the nucleus tractus of solitarius (NTS) of the fasted rats was increased by the consumption of sucrose but not saccharin, regardless of the feeding method. On the other hand, the consumption of sucrose or saccharin with real feeding but not the sham, induced c-Fos expression in the paraventricular nucleus (PVN) of the fasted rats. The intra-oral infusion with saccharin or water decreased the plasma corticosterone level of the fasted rats. Intra-oral water infusion increased c-Fos expression in both the PVN and NTS, but saccharin only in the NTS in the fasted rats. Conclusion: Neither restoration of the fasting-induced elevation of plasma corticosterone nor the activation of neurons in the PVN and NTS after refeeding requires the palatability of food or the post-ingestive satiety and caloric load. In addition, neuronal activation in the hypothalamic PVN may not be an implication in the restoration of the fasting-induced elevation of the plasma corticosterone by oropharyngeal stimuli of palatable food.
Mammaglobin은 uteroglobin 유전자와 상동성을 가지는 분비 단백질로 인체 유방암 조직에서 과발현된다. 이 단백질은 유방암의 진단, 전이 정도의 진단, 또는 수술 및 항암치료 후 재발 정도의 검색을 위한 하나의 표식자로 가능성을 갖는다. 본 연구는 mammaglobin 유전자를 클로닝하여, 대장균으로부터 발현하고, 발현된 mammaglobin 단백질을 분리하고, 분리된 단백질을 이용하여 항체를 생산하고, 분리된 항체가 mammaglobin에 대한 특이 반응을 갖는지를 확인하였다. 유방암 환자의 조직을 얻은 후 이 조직에서 RNA를 분리한다. 이 RNA로부터 RT-PCR법으로 mammaglobin 유전자를 클로닝하였다. 증폭된 유전자를 NcoI 과 XhoI으로 절단한 후 벡터에 끼워 넣은 후 대장균에 형질 전환시키고 DNA 염기 서열을 결정하였고, 기존의 mammaglobin 유전자의 염기서열과 비교한 결과 동일한 유전자임을 확인하였다. Mammaglobin의 세포 내 발현, 신호 펩타이드를 이용한 분비발현을 위해 pET30, pET20, pET32 벡터를 각각 이용하였다. 3개의 발현시스템으로부터 단백질이 과 발현됨을 확인할 수 있었다. pET30 벡터를 이용하여 성공적으로 발현된 mammaglobin 단백질을 분리할 수 있었다. Ni-NTA affinity chromatography에 이은 DEAE-ion exchange chromatography 분리 방법에 의해 수용성 발현 단백질인 thioredoxin-mammaglobin을 정제할 수 있었고 이 융합 단백질로부터 enterokinase를 이용하여 mammaglobin 단백질만을 분리하였다. 토끼에 분리된 mammaglobin을 complete adjuvant와 혼합하여 면역한 후 두 번 boosting하여 polyconal 항체를 얻었다. Westernblot immuno 분석을 한 결과 생산된 항체가 mammaglobin 단백질과 특이적 항원항체반응을 보임을 관찰하였다. 향후 이 항체를 이용하여 진단용 시약의 개발이나 항암제 개발 등을 위해 연구가 진행될 것이다.
In this study simple and sensitive high performance liquid chromatographic method using a commercially available column, was developed and validated for the determination of zolpidem tartrate in human plasma. The developed method with suitable validation was applied to a bioequivalence study of two different kinds of zolpidem tartrate. Two different formulations containing 10 mg of zolpidem tartate (CAS : 99294-93-6) were compared in 24 healthy male volunteers in order to compare the bioavailability and prove the bioequivalence. The study was performed in an open, single dose randomized, 2-sequence, cross-over design in 24 healthy male volunteers with a one-week washout period. Blood samples for pharmacokinetic profiling were drawn at selected times during 12 h. The mean $AUC_{0-12h}$, $C_{max}$, $T_{max}$ and $T_{1/2}$ were $676.6{\pm}223.4$$ng{\cdot}h{\cdot}mL^{-1}$, $177.4{\pm}34.2$$ng{\cdot}mL^{-1}$, and $0.8{\pm}0.4$ and $3.5{\pm}2.1$, respectively, for the test formulations, and $640.7{\pm}186.6$$ng{\cdot}h{\cdot}mL^{-1}$, $193.0{\pm}64.5$$ng{\cdot}mL^{-1}$, and $0.9{\pm}0.4$ and $2.7{\pm}0.9$, respectively, for the reference formulation. Both primary target parameters $AUC_{0-12h}$ and $C_{max}$ were log-transformed and tested parametrically by analysis of variance (ANOVA). 90% confidence intervals of $AUC_{0-12h}$ and $C_{max}$ were in the range of acceptable limits of bioequivalence (80-125%). Based on these results, the two formulations of zolpidem tartate are considered to be bioequivalent.
Objectives : The purpose of this study is evaluating the effect of Poria cocos pharmacopuncture (PCP) at $SP_6$(Sameumgyo) and $ST_{36}$(Joksamni) on chronic stress model(CSM) rats. Methods : The experimental rats were assigned to five groups: normal, CSM(control), PCP1X, PCP2.5X and PCP5X. The experimental rats in CSM(control), PCP1X, PCP2.5X and PCP5X were put through a timetable to cause CSM. PCP($20{\mu}l$) was administered at $SP_6$, $ST_{36}$ to groups PCP1X, PCP2.5X and PCP5X once every three days for a total of six times. The weight of the rats was measured by an electronic scale after PCP injection, once every three days for a total of six times. Blood samples were taken from the rats for analysis of aspartate aminotransferase(AST) and alanine aminotransferase(ALT). Serotonin and norepinephrine were measured by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) kit. Results : The experimental groups(PCP1X, 2.5X, 5X) showed significant body weight increase compared to the control group. Regarding AST and ALT changes in serum, the experimental groups(PCP2.5X, 5X) showed a significant decrease compared to the control group. For Serotonin changes in serum, the experimental group(PCP5X) showed a significant increase compared to the control group. For Norepinephrine changes in serum, the experimental groups(PCP2.5X) showed a significant decrease compared to the control group. Conclusions : These data suggest that PCP at $SP_6$, $ST_{36}$ has therapeutic effects on CSM rats.
최근 널리 사용되고 있는 제조회사가 다른 두가지 요시험지봉(Combur-9-test$^{(R)}$ RL & Multistix$^{(R)}$-SG)으로 요검사를 실시하면, 그 결과치의 표현에 있어 차이가 있으므로, 결과치 판정시 질병의 진단이나 치료의 효과 판정 및 경과관찰에 있어서 발생할 수 있는 혼란을 줄이고자, 환자검체와 표준검체에서 실시한 요시험지봉 검사결과를 비교 검토하여 아래와 같은 결론을 얻었다. 또한 두 시험지봉검사에 결과를 교환함에 있어 상응하는 결과치도 조사하였다. Combur-9-test RL 및 Multistix-SG를 이용하여, 1990년 12월 16일 부터 15일간 영남대학교 의과대학 부속병원 임상병리과에 요검사가 의뢰된 501명의 환자검체를 대상으로 하여 요시험지봉으로 화학적검사를 반정량적으로 시행한 결과 대체로 ${\pm}1$등급 범위내에서 일치하였다. Combur-9-test RL을 이용한 leukocyte esterase 검사와 요침사검사간의 비교에서 현미경적 농뇨와의 일치율은 83.7%, 민감도 48.1%, 특이도 90.3%, 양성예측율 47.4% 및 음성예측율 90.5%로 나타났다. Combur-9-test RL을 사용한 nitrite검사와 요배양검사간의 비교에서 요배양 양성과의 일치율은 93.0%, 민감도 19.4%, 특이도 84.7%, 양성예측율 53.8% 및 음성예측율 94.1%로 나타났다. 단백의 주 성분이 알부민 및 글로부린인 검체에서 실시한 요단백검사에서는 양자 모두에서 sulfosalicylic acid 법이 가장 민감하였고, 다음은 Multistix-SG, Combur-9-test RL의 순이었다. 요빌리루빈 및 요당검사에서는 두시험지봉이 비슷한 민감도를 나타내었다. 요중 백혈구검사에서는 요침사검사가, 요중 잠혈검사에서는 Combur-9-test RL이 가장 민감하였다.
Objectives : This study was to investigate the suppression effects of Sopunghwalhyeol-tang(Shufenghuoxie-tang) on the monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Methods : Arthritis was induced by injection of monosodium iodoacetate(0.5 mg) into the both knee joints of rats. Arthritic rats were divided into control(n=8) and treated(n=8) group. Control group was taken distilled water for 20 days. Treated group was taken extracts of Sopunghwalhyeol-tang(Shufenghuoxie-tang) by oraly for same duration. Normal group(n=8) was injected with normal saline and was taken distilled water for 20 days. Macroscopic examination and histopathological study on articular cartilage of knee joint were operated at 20 days after injection. Proteoglycan(PG) content of articular cartilages of knee joint was represented by safranine O staining, was measured at 20 days after injection. Tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$, $interleukin-1{\beta}(IL-1{\beta})$, in synovial fluid were measured with enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA) kit at 20 days after injection. Immunohistochemical staining of cyclo-oxygenase-2(COX-2), inducible nitric oxide synthase(iNOS) in knee joints were observed at 20 days after injection. Results : 1. Lymphocytes in peripheral blood the treated group was significantly decreased compared with the control group. 2. PG content in articular cartilage of the treated group was significantly increased compared with the control group. 3. Histopathologically, osteoarthritic scores of the treated group was significantly decreased compared with the control group. 4. $TNF-{\alpha}$ content in synovial fluid of the treated group was significantly decreased compared with the control group. 5. COX-2 revelation index in chondrocytes and synovial membrane of the treated group was significantly decreased compared with the control group. 6. Matrix metalloproteinase-3(MMP-3) revelation index in chondrocytes and synovial membrane of the treated group was significantly decreased compared with the control group. Conclusions : On the basis of these results, we concluded that Sopunghwalhyeol-tang(Shufenghuoxie-tang) has inhibiting effects on the $TNF-{\alpha}$, COX-2 and MMP-3 secretion of chondrocytes and synovial membrane in Monosodium Iodoacetate-induced osteoarthritis model of rats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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