Aspergillus fumigatus is one of the most common fungi in the human environment, both in-doors and out-doors. It is the main causative agent of invasive aspergillosis, a life-threatening mycosis among immunocompromised patients. The genome has been sequenced by an international consortium, including the Wellcome Trust Sanger Institute (U.K.) and The Institute for Genomic Research (TIGR, U.S.A.), and a ten times whole genome shotgun sequence assembly has been made publicly available. In this study, we identified tricarboxylic acid (TCA) cycle enzymes of A. fumigatus by comparative analysis with four other fungal species. The open reading frames showed high amino acid sequence similarity with the other fungal citric acid enzymes and well-conserved functional domains. All genes present in Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Candida albicans, and Neurospora crassa were also found in A. fumigatus. In addition, we identified four A. fumigatus genes coding for enzymes in the glyoxylate shunt, which may be required for fungal virulence. The architecture of multi-gene encoded enzymes, such as isocitrate dehydrogenase, 2-ketoglutarate, succinyl-CoA synthetase, and succinate dehydrogenase was well conserved in A. fumigatus. Furthermore, our results show that genes of A. fumigatus can be detected reliably using GlimmerM.
The lignocellulose that is a major component of spent coffee ground was degraded and saccharified. To implement the spent coffee, after several pre-treatments, inoculation of Phanerochaete chrysosporium and solid-state fermentation were conducted. The optimal temperature of the enzymes (lignin peroxidase, manganese peroxidase, xylanase, laccase, and cellulase) for degradation of lignocellulose by P. chrysosporium was found. We also measured the maximum activity of enzymes (lignin peroxidase 0.15 IU/mL, manganese peroxidase 0.90 IU/mL, laccase 0.11 IU/mL, cellulase 5.87 IU/mL, carboxymethyl cellulase 9.52 IU/mL, xylanase 1.16 IU/mL) used for the process. As a result, 4.73 mg/mL of reduced sugar was obtained and 61.02% of lignin was degraded by solid state fermentation of P. chrysosporium on spent coffee ground.
This study is aimed to investigate the skin thickness, plasma components, serum IgE level and antioxidant enzymes activities by mixtures of Cnidium officinale, Saururus chinensis, Houttuynia cordata and Glycyrrhiza uralensis on the allergic contact dermatitis of rat induced by 1-chloro-2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB). Mixtures reduced the thickness of the skin and removed the dead skin cells compared to the skin of rats treated with DNCB alone. Also, these mixtures down-regulated the contents of lipid and IgE, and reduced the activities of superoxide dismutase and catalase. These results indicate that the mixtures significantly recovered the contact dermatitis induced by DNCB. In conclusion, it is thought that the mixtures could be useful for the allergic contact dermatitis.
Objectives: Medicinal plants are vital sources of bioactive compounds that are useful for the treatment of patients with snake bites or are indirectly applicable for boosting the effects of conventional serum therapy. These plants are being used traditionally by local healers and tribes for the treatment of patients with snake bites and therefore can be used as an alternative against snake envenomation. Scientifically, using the secondary metabolites of plants to neutralize venom enzymes has an extra benefit of being based on traditional knowledge; also, the use of such metabolites for the treatment of patients with snake bites is cheaper and the treatment can be started sooner. Methods: All the available information on various secondary metabolites exhibiting venom neutralizing ability were collected via electronic search (using Google books, Pubmed, SciFinder, Scirus, Google Scholar, and Web of Science) and articles of peer-reviewed journals. Results:Recent interest in different plant has focused on isolating and identifying of different phytoconstituents that exhibit Phospholipase A2 activity and other venom enzyme neutralizing ability. In this support convincing evidence in experimental animal models are available. Conclusion: Secondary metabolites are naturally present, have no side effect, are stable for a long time, can be easily stored, and can neutralize a wide range of snake enzymes, such as phospholipase A2, hyaluronidase, protease, L-amino acid oxidase, 5'nucleotidase, etc. The current review presents a compilation of important plant secondary metabolites that are effective against snake venom due to enzyme neutralization.
Kim, In-Jung;Ko, Kyong-Cheol;Nam, Tae-Sik;Kim, Yu-Wang;Chung, Won-Il;Kim, Chan-Shick
Journal of Microbiology
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제41권3호
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pp.212-218
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2003
Citrus phytoene synthase (CitPsy) and ${\beta}$-carotene hydroxylase (CitChx), which are involved in caroteinoid biosynthesis, are distantly related to the corresponding bacterial enzymes from the point of view of amino acid sequence similarity. We investigated these enzyme activities using Pantoea ananatis carotenoid biosynthetic genes and Escherichia coli as a host cell. The genes were cloned into two vector systems controlled by the T7 promoter. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis showed that CitPsy and CitChx proteins are normally expressed in E. coli in both soluble and insoluble forms. In vivo complementation using the Pantoea ananatis enzymes and HPLC analysis showed that ${\beta}$-carotene and zeaxanthin were produced in recombinant E. coli, which indicated that the citrus enzymes were functionally expressed in E. coli and assembled into a functional multi-enzyme complex with Pantoea ananatis enzymes. These observed activities well matched the results of other researchers on tomato phytoene synthase and Arabidopsis and pepper ${\beta}$-carotene hydroxylases. Thus, our results suggest that plant carotenoid biosynthetic enzymes can generally complement the bacterial enzymes and could be a means of carotenoid production by molecular breeding and fermentation in bacterial and plant systems.
Park, Hyoung-Goo;Lim, Young-Ran;Han, Songhee;Kim, Donghak
Toxicological Research
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제30권1호
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pp.33-38
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2014
The human cytochrome P450 2J2 catalyzes an epoxygenase reaction to oxidize various fatty acids including arachidonic acid. In this study, three recombinant enzyme constructs of P450 2J2 were heterologously expressed in Escherichia coli and their P450 proteins were successfully purified using a $Ni^{2+}$-NTA affinity column. Deletion of 34 amino acid residues in N-terminus of P450 2J2 enzyme (2J2-D) produced the soluble enzyme located in the cytosolic fraction. The enzymatic analysis of this truncated protein indicated the typical spectral characteristics and functional properties of P450 2J2 enzyme. P450 2J2-D enzymes from soluble fraction catalyzed the oxidation reaction of terfenadine to the hydroxylated product. However, P450 2J2-D enzymes from membrane fraction did not support the P450 oxidation reaction although it displayed the characteristic CO-binding spectrum of P450. Our finding of these features in the N-terminal modified P450 2J2 enzyme could help understand the biological functions and the metabolic roles of P450 2J2 enzyme and make the crystallographic analysis of the P450 2J2 structure feasible for future studies.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.59-61
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2003
Organic compounds play an important role in the area of pharmaceutical, agrochemical, and other materials, which possess useful biological activities. Generally, such biological activities are come from the interaction of the organic compounds with the receptors in biological system, such as enzymes. Such receptors are composed of the chiral building blocks such as amino acid or carbohydrate, which means the biological active sites of receptors are chiral. (omiited)
As a typical example of the screening for a microbial biocatalyst from nature, isolation of nitrilesynthesizing microorganisms, characterization of a new enzyme aldoxime dehydratase, and its function in the aldoxime-nitrile pathway are introduced. Catalytic properties of some of our enzymes were improved through a direct evolutionary approach.
The effects of biological pretreatment on the Japanese red pine Pinus densiflora, was evaluated after exposure to three white rot fungi Ceriporia lacerata, Stereum hirsutum, and Polyporus brumalis. Change in chemical composition, structural modification, and their susceptibility to enzymatic saccharification in the degraded wood were analyzed. Of the three white rot fungi tested, S. hirsutum selectively degraded the lignin of this sortwood rather than the holocellulose component. After eight weeks of pretreatment with S. hirsutum, total weight loss was 10.7%, while lignin loss was the highest at 14.52% among the tested samples. However, holocellulose loss was lower at 7.81 % compared to those of C. lacerata and P. brumalis. Extracelluar enzymes from S. hirsutum showed higher activity of ligninase and lower activity of cellulase than those from other white rot fungi. Thus, total weight loss and changes in chemical composition of the Japanese red pine was well correlated with the enzyme activities related with lignin- and cellulose degradation in these fungi. Based on the data obtained from analysis of physical characterization of degraded wood by X-ray Diffractometry (XRD) and pore size distribution, S. hirsutum was considered as an effective potential fungus for biological pretreatment. In particular, the increase of available pore size of over 120 nm in pretreated wood powder with S. hirsutum made enzymes accessible for further enzymatic saccharification. When Japanese red pine chips treated with S. hirsutum were enzymatically saccharified using commercial enzymes (Cellulclast 1.5 L and Novozyme 188), sugar yield was greatly increased (21.01 %) compared to non-pre treated control samples, indicating that white rot fungus S. hirsutum provides an effective process in increasing sugar yield from woody biomass.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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