Primary cultures of adult rat hepatocytes were used to study the cytotoxicity of D-galactosamine. Hepatocytes were isolated by a collagenase perfusion technique and maintained as monolayers in serum-free medium on collagen-coated culture dishes. Treatment of galactosamine to the culture markedly inhibited the uptake of ${\alpha}$-aminoisobutyric acid (AIB) inducible with glucagon and dexamethasone. At0.1 mM of galactosamine, AIB uptake was inhibited significantly when treated for 12 hr. At higher doses (0.25, 0.5 and 1.0mM), a significant inhibition was noticed after 1 hr exposure. Generally the magnitude of the inhibition was related to the dose and treatment time of galactosamine. Treatment of galactosamine also produced a dose- and treatment time-related suppression of the tyrosine aminotransferase (TAT) induction caused by dexamethasone. Meanwhile, uptake of ouabain was not affected by the treatment of galactosamine. The viability of the hepatocytes was decreased only slightly by the treatment of galactosamine; more than 87% of the cells excluded tryphane blue when treated 1 mM galactosamine for 12 hr. Galactosamine induced depressions of AIB uptake and TAT activity were prevented by the simultaneous addition of uridine to the culture. D-Galactosamine, cytotoxicity, hepatocytes culture, ${\alpha}$-aminoisobutyric acid uptake, tyrosine aminotransferase.
The water uptake rates of thirty-four japonica and twenty-five j x indica brown rices at $100^{\circ}C$ were analyzed. The water uptake rates had no correlation with size or volume of brown rice kernel. The regression equations for water uptake rates between brown rice at $100^{\circ}C$(Y) and milled rice at $23^{\circ}C(X)$ for japonica and j x indica varieties were Y = 1.12X-0.34(r = 0.976, p<0.001) and Y = 1.16X-0.54(r = 0.990, p<0.001), respectively (Received August 13, 1990 and accepted September 20,1990).
농업 환경 중에 과잉으로 축적한 질산이온의 제거를 위하여, 질산이온 흡수력이 우수한 Enterobacter amnigenus GG0461 균주를 분리하였다. 이 균주는 Pseudomonas agar F (PAF) 배지에 배양하였을 때, 3,000 ppm (50 mM) 이상의 질산이온 흡수가 가능하므로, 농업용 토양, 축산폐수, 산업폐수를 포함한 오염된 환경의 질산이온 제거를 위한 좋은 후보 균주가 될 수 있다. GG0461 균주의 대량생산을 위한 상업용 배지를 개발하기 위하여 PAF 배지 성분을 상업용 재료로 대체하고, 균주의 성장과 질산이온 흡수 활력을 측정하였다. 탄소원인 글리세롤은 상업용 제품으로 대체하였고, 질소원으로 tryptone과 효모추출물, 대두박, 생선발효액을 배양실험에 사용하였다. 균주의 성장과 질산이온 흡수활력은 2% tryptone을 첨가한 배지에서 가장 우수하였고, 효모추출물, 대두박, 생선발효액의 순으로 효과가 나타났다. Tryptone을 2% 첨가한 배지에서 균주의 질산이온 흡수는 배지의 pH를 낮추었으며, 이것은 질산이온의 흡수가 nitrate/proton antiporter의 활성으로 나타남을 의미한다. 이상의 결과에서 상업용 tryptone을 사용한 배지는 균주의 생리활성에 적합하였으며, peptone을 제외한 PAF 배지의 각 성분은 그것에 해당하는 상업용 재료로 대체할 수 있었다. 결론적으로, GG0461 균주의 배양을 위한 상업용 배지성분 조성은 2% tryptone과 1% glycerol, PAF 배지를 위한 무기이온들로 결정하였다.
Salinity of soils in greenhouse has been increased by massive application of fertilizers. Nitrogen fertilizer was most popular, and thus nitrate became the majority of soil salinity. Accumulation of nitrate led to deleterious effects on the growth and development of crops and vegetables. Microbial strains able to utilize nitrate and thus remove excess nitrate from farm land soils were isolated from 15 different soils of greenhouses and plastic film houses. Four strains able to grow in medium containing 50 mM $KNO_3$ were isolated, among which only E0461 showed high capacity of nitrate uptake. Nitrate uptake by E0461 was dependent on culture medium and was increased by addition of tryptone and peptone. Although E0461 was able to grow without tryptone and peptone, growth was slow, and no nitrate uptake was observed. Nitrate appeared to facilitate E0461 growth in the presence of tryptone and peptone. Through kinetic analysis, nitrate uptake was measured at various concentrations of nitrate, and half-life was calculated. Nitrate concentration decreased with increasing incubation period, and plot between half-lives and initial concentrations of nitrate fitted to single exponential function. These results suggest one major factor plays an important role in microbial nitrate uptake.
Vehicle toxicity is one of the main obstacles for intracellular delivery of bioactive compounds. Silk fibroin is a natural polymer proven to have high biocompatibility since being used as suture material. In this report, fibroin microspheres were prepared without any chemical modification or cross-linking not to affect its biocompatibility. The microspheres were taken up by more than 90% of 3T3 cells. Cellular uptake continued after medium replenishment with a different-colored fluorescent microsphere, suggesting that simultaneous ingestion and exocytosis occurred. Cellular uptake of fibroin microspheres did not affect cell viability. Intracellular trafficking of the microspheres using lysosome-specific fluorescent dye revealed that fibroin microspheres were localized both in the cytoplasm and in the lysosome. Accordingly, fibroin microspheres can be a potential vehicle for intracytoplasmic delivery of large cargos, such as mixtures of proteins, nutrients or artificial organelles.
A central dogma of pharmacology is that only unbound drug is capable of translocation across biological membrane. Thus, hepatic uptake is assumed to be solely determined by the unbound concentration of the diffusible moiety at the surface of the liver cell. However, an increasing number of experimental observations with xenobiotics that are normally very extensively bound to plasma proteins (>99%) appear to be inconsistent with these assumptions. This suggested that in addition to progressive spontaneous dissociation within the liver sinusoids and space of Disse, direct interactions of the albumin-drug complex at the plasma membrane may facilitate dissociation of the complex. To explain this phenomena. called albumin-mediated uptake, 4 mechanisms have been suggested. The validity of such hypotheses needs to be examined by the further study. Because albumin-mediated uptake has also been observed to occur in other plasma proteins, protein-mediated uptake rather than albumin-mediated uptake seems to be acceptable.
Nitrogen (N) is an essential macronutrient required for plant growth and crop production. However, N in soil is usually insufficient for plant growth. Thus, chemical N fertilizer has been extensively used to increase crop production. Due to negative effects of N rich fertilizer on the environment, improving N usage has been a major issue in the field of plant science to achieve sustainable production of crops. For that reason, many efforts have been made to elucidate how plants regulate N uptake and utilization according to their surrounding habitat over the last 30 years. Here, we provide recent advances focusing on regulation of N uptake, allocation of N by N transporting system, and signaling pathway controlling N responses in plants.
Intra-cellular drug uptake in Xenopus laevis oocyte has been elucidated using localized MR spectroscopy (MRS) and PFG NMR techniques at a 600 $MH_z$(Bruker, 14.1 T) NMR spectrometer. The localized MRS has been done with a homemade probe, and shows the intra-cellular uptake of nicotinamide. The self-diffusion of the molecule in Xenopus oocyte was obtained by PFG NMR technique. The measured data are well fitted with a linear combination of two exponential functions, which shows that there are two types of drug molecules, intra-and extra-cellular molecules. Diffusion coefficients of intra- and extra-cellular drug molecules are 3.7 $\times$$10^{-11}$$\m^{2}/s$and 6.4 $\times$$10^{-10}$$\m^{2}/s$, respectively. In the weighting factors there is shown that about 5% of drug molecule is inside the cells. These techniques can be used for drug screening in molecule-, cell-, and tissue-based preclinical test.
국내 시설농업에서 질소비료의 과다사용은 토양에 염류집적을 유발하고 있다. 토양중 축적된 질산이온을 제거하기 위하여 질산이온 흡수능이 뛰어난 토양미생물을 밭토양으로부터 분리하고, 질산이온 흡수 특성을 조사하였다. 분리한 GS2 50 mM 농도의 질산이온을 12시간 이내에 제거하였다. 이 균주는 16S rRNA 유전자의 염기서열을 분석하여 Bacillus sp. GS2로 분리동정하였다. 이 균주의 성장과 질산이온 흡수의 성을 조사하였을 때, 각각 $30-40^{\circ}C$와 $37^{\circ}C$에서 최대치를 보였으며, 두 가지 모두 pH 6-8 범위가 최적의 조건임을 확인하였다. Bacillus sp. GS2 균주는 50 mM 질산이온을 포함하는 배지에서 배양하였을 때, 43 mM의 농도를 감소시켜 약 86%의 질산이온 흡수를 보였으며, 300 mM 까지의 농도범위에서 유사한 질산이온 제거 능력을 보여, 질산이온 흡수활성이 50 mM 이상에서 포화됨을 확인하였다. 이러한 결과는 Bacillus sp. GS2 균주의 우수한 균주성장과 질산이온 흡수능을 보여주는 것으로, 이 균주는 환경중 질산이온 제거에 유용한 균주로 이용될 수 있을 것이다.
[ $^{18}F$ ]-fluorodeoxyglucose (FDG) uptake on positron emission tomography (PET) scan has been found to reflect tumor aggressiveness and prognosis in various types of cancer. In this study, the gene expression profiles of glial tumors were evaluated to determine whether glial tumors with high $^{18}F$-FDG uptake have more aggressive biological potential than with low uptake. Surgical specimens were obtained from the 12 patients with glial tumors (4 males and 8 females, age range 42-68 years). The tumor samples were divided into two groups based on the $^{18}F$-FDG uptake PET scan findings: high $^{18}F$-FDG uptake (n=4) and low $^{18}F$-FDG uptake (n=8). The pathological tumor grade was closely correlated with the $^{18}F$-FDG uptake pattern: Glial tumors with high $^{18}F$-FDG uptake were pathologically Edmondson-Steiner grade III, while those with low uptake were grade II. The total RNA was extracted from the frozen tissues of all glial tumors (n=12), and adjacent non-cancerous tissue (n=3). The gene expression profiles were evaluated using cDNA microarray. The glial tumors with high $^{18}F$-FDG uptake showed increase expression of 15 genes compared to those with low uptake (P<0.005). Nine genes were down-regulated. Gene expression is closely related to cell survival, cell-to-cell adhesion or cell spreading; therefore, glial tumors with high $^{18}F$-FDG uptake appear to have more aggressive biological properties than those with low uptake.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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