To investigate the potential role of transforming growth factor (TGF)-${\beta}1$ in liver fibrosis during Echinococcus granulosus infection, 96 BALB/c mice were randomly divided into 2 groups, experimental group infected by intraperitoneal injection with a metacestode suspension and control group given sterile physiological saline. The liver and blood samples were collected at days 2, 8, 30, 90, 180, and 270 post infection (PI), and the expression of TGF-${\beta}1$ mRNA and protein was determined by real-time quantitative RT-PCR and ELISA, respectively. We also evaluated the pathological changes in the liver during the infection using hematoxylin and eosin (H-E) and Masson staining of the liver sections. Pathological analysis of H-E stained infected liver sections revealed liver cell edema, bile duct proliferation, and structural damages of the liver as evidenced by not clearly visible lobular architecture of the infected liver, degeneration of liver cell vacuoles, and infiltration of lymphocytes at late stages of infection. The liver tissue sections from control mice remained normal. Masson staining showed worsening of liver fibrosis at the end stages of the infection. The levels of TGF-${\beta}1$ did not show significant changes at the early stages of infection, but there were significant increases in the levels of TGF-${\beta}1$ at the middle and late stages of infection (P<0.05). RT-PCR results showed that, when compared with the control group, TGF-${\beta}1$ mRNA was low and comparable with that in control mice at the early stages of infection, and that it was significantly increased at day 30 PI and remained at high levels until day 270 PI (P<0.05). The results of this study suggested that increased expression of TGF-${\beta}1$ during E. granulosus infection may play a significant role in liver fibrosis associated with E. granulosus infection.
유산균은 장 건강, 심장질환, 우울증, 비만 등을 예방하고 치료할 수 있다고 널리 알려져 있고, 특히 한국은 다양한 발효식품에서 유산균을 섭취할 수 있다. 하지만 국내 발효식품에서 분리된 유산균에 대한 연구는 대부분 김치에 한정되어 있기 때문에 대표적인 어류 전통 발효식품인 식해류의 유산균에 대한 연구는 미비한 실정이다. 따라서 본 연구는 한국의 전통발효식품인 가자미 식해의 발효에 관여하는 유산균의 배양일에 따른 균총의 변화를 관찰하고, 가자미 식해로부터 프로바이오틱스로 이용 가치가 있는 균을 분리하기 위해 시행되었다. 포항의 가정집에서 제조된 가자미 식해에서 유산균을 제조일로부터 50일까지 5일 간격으로 분리하고 동정하였고, 동정 결과 P. pentosaceus, P. inopinatus, Lc. mesenteroides, L. brevis, L. plantarum 5개 균주가 발효에 관여함을 알 수 있었다. 발효가 진행됨에 따라 초기 발효에는 Pediococcus sp.가, 중기 이후부터는 Lactobacillus sp.가 우세하게 발효에 관여하는 것을 확인할 수 있었다. 분리한 유산균 중 우수한 프로바이오틱 활성을 가지는 균주를 알아보기 위하여 산내성, 담즙산 내성 시험을 통해 균주를 선별한 뒤 응집능, 표면 소수성, 항균 활성, 항산화 활성 등을 평가하였다. 그 결과 본 연구의 가자미 식해 분리 균주 중 최종적으로 선택된 소화액 내성이 뛰어난 L. brevis GS1022와 응집능이 뛰어난 P. inopinatus GS316은 프로바이오틱 균주로 이용할 가치가 충분하다고 사료된다.
포자형성균은 사람과 동물용의 프로바이오틱 제제로서 사용되어져 왔다. 포자형성균의 낮은 pH에 대한 안정성과 위내 생육저해 환경에 생존능은 프로바이오틱 제제로서 매력적이다. 본 연구는, 한국 전통 대두 발효 식품의 종균인 BCNU 9028균주를 메주로부터 분리하였다. 생리학적, 생화학적 특성과 16S 리보좀 DNA 염기서열 분석 결과 BCNU 9028균주는 $Bacillus$에 속하는 것을 확인하였다. $Bacillus$ sp. BCNU 9028은 pH 2.5에서 92%의 생존률을 보였으며, 0.3% 담즙산에서도 저항성을 나타냈다. 그리고, 식품 병원성균과의 응집정도와 자가결합능에 의해 $Bacillus$ sp. BCNU 9028는 $Listeria$$monocytogenes$, $S.$$aureus$ 및 $E.$$coli$와 같은 식품 병원성균의 생물막형성과 부착을 저해할 수 있는 것을 확인하였다. BCNU 9028의 소수성 특성(63.3%)은 장관내 부착능이 우수할 것으로 나타났다. 특히, $Bacillus$ sp. BCNU 9028 균주는 그람양성 및 그람음성 병원성균 모두에 항균력을 갖는 것을 확인하였다. 이상의 결과로 $Bacillus$ sp. BCNU 9028균주가 프로바이오틱스로서 이용가능성이 있음을 제시하였다.
본 연구에서는 식품용 프로바이토틱 생균인 비스루트균의 인공위액과 인공담즙산에 대한 내성, 효소활성, 항생물질과 알콜에 대한 내성, 그리고 병원성 세균에 대한 항균기작 등 주요 생균제 특성에 대하여 검토하였다. 인공위액 내성 실험에서는 pH 2.5로 조성된 인공위액을 통과한 생존율이 매우 높았으며 균수가 $2.4{\times}10^7\;CFU/mL$의 수준이었다. 인공담즙산에 대한 내성에서는 pH 2.5의 인공위액을 통과한 비스루트균의 인공담즙산의 내성은 oxgall이 함유되지 않은 대조구$(1.6{\times}10^7\;CFU/mL)$에 비해 오히려 균수가 증가되었으며, 최종적인 생존수가 $3.3{\times}10^7\;CFU/mL$ 으로 확인됨으로써 프로바이오틱 생균으로 매우 우수한 특성을 가지고 있었다. 효소활성을 측정한 결과, 비스루트균은 발암효소인 ${\beta}-glucuronidase$ 및 ${\beta}-glucosidase$ 의 활성이 나타나지 않았다. 또한 항생물질에 대한 내성은 rifamycin $10\;{\mu}g/mL$ 이상의 농도에 대해서는 생육 저해를 보였으나, $nisin(100\;{\mu}g/mL)$, $streptomycin(20\;{\mu}g/mL)$, $tetracycline(20\;{\mu}g/mL)$에 대해 내성을 보였다. 그리고 비스루트균의 알콜에 대한 내성은 4%의 농도에서 저해를 받았으며, 8%의 농도에서 더욱 저해를 받으나, $8{\sim}32%$ 범위의 농도에서는 균수가 더욱 크게 감소를 하지는 않았다. Listeria에 대한 향균기작을 측정한 결과, 24시간이내에 L. monocytogenes ATCC 19111을 완전히 저해를 하였으며, bactericidal한 양상을 나타내었다. 본 연구를 통해 밝혀진 비스루트균의 프로바이오틱 특성은 기능성 식품의 개발 등 산업적으로 매우 유용하다고 판단된다.
Background: Liver fluke infection with Opisthorchis viverrini and its associated cholangiocarcinoma constitute a serious problem in Thailand. Healthy behavior can decrease infection, therefore, the investigation of knowledge, attitude, and practice is need required in high risk areas. Objective: This study aimed to investigate the behavior and perceptions regarding liver fluke. Materials and Methods: A cross-sectional descriptive study was conducted in Chum Phuang district of Nakhon Ratchasima province, Thailand during July to November 2015. A total 80 participants who had screened with verbal screening test, stool examination, and ultrasonography, were purposive selected and completed a pre-designed questionnaire (Kruder-Richardon-20=0.80, Cronbach's alpha coefficient=0.82 and 0.79). T-test, ANOVA, and Pearson correlation test were used for analyzed data. Results: The results reveal that O. viverrini infection was 1.25%, and 3 patients had a dilated bile ducts. The participants had a high knowledge, attitude, and practice regarding liver fluke. The education, occupation, and income, were statistical significant to attitude regarding liver fluke. Nurses and television were the main sources of information regarding liver fluke, with statistical significance(p-value <0.05). Knowledge was significantly associated with attitude and practice (p-value<0.05). Conclusions: Participants had good behavior regarding liver fluke. Improvement of knowledge and attitude is influenced to practical change regarding this carcinogenic fluke. In addition, nurse and television are the main information resources for key success in increasing people perception for disease prevention and control in this area.
Pharmacokinetic characteristics of recombinant human interleukin-2 (rH IL-2) wre studied in the rat. First, different doses of rH IL-2 ranging from 6,400 to 1,600,000 U/kg were injected intravenously and the effect of dose size on the pharmacokinetics was examined. There was no dose dependency in the pharmacokinetics of rHIL-2 in the dose range of 6,400-40,000 U/kg. But at the dose of 1,600,000 U/kg, there was a severe hemolysis throughout the experiment and the pharmacokinetic parameters such as Vdss and CLt were significantly increased compared to those obtained from lower doses. It also showed that this drug is hardly distributed to the peripheral tissues and hardly eliminated from the body, since the valume of distribution (Vdss) and total body clearance (CLt) were 45-75 ml/kg and 1-2 ml/min/kg, respectively. The Vdss is close to the actual plasma volume and the CLt is less than glomerular filtration rate (GFR). Therefore it seemed that rH IL-2 is distributed only in the plasma pool and hardly filtered in the kidney due to its very large molecular weight. Second, rH IL-2 was administered to the rat via several routes such as hepatic portal vein (PV), intraperitoneal (IP), peroral (PO) and intranasal (IN) routes. The bioavailabilities (BA) of PV, IP, PO and IN routes were 96.8, 4.9, 0 and 0.1%, respectively. The addition of some nasal absorption enhancers such as taurocholate, taurodeoxycholate, glycocholate and glycodeoxycholate did not increase the BA of intranasaly administered rH IL-2. The result is contrast to the effect of these bile salts on the nasal absorption of ${\alpha}-inteferon$. Considering it together with the pharmacokinetic parameters, very large molecular weight of rH IL-2 seemed again to be the cause to very poor membrane permeability.
본 연구는 김치로부터 GABA 생성능이 우수한 젖산균을 분리 및 동정하고, 이 균주의 생리적 특성을 규명하여 상업적으로의 이용가능성을 검토하고자 실시하였다. 이를 위해 MSG 2%가 첨가된 MRS broth에 $37^{\circ}C$에서 18시간 배양한 후 GABA 함량이 $50{\mu}g/mL$ 이상 생산하는 75개의 균주를 1차로 선별하였으며, $90{\mu}g/mL$ 이상 생산하는 5 균주를 2차로 선별하였고, 선발된 5 균주를 MSG 1%, 2% 및 3% 함유된 MRS 배지에 각각 배양한 결과, K74 균주가 최종 선발되었다. K74 균주는 MSG 1%가 첨가된 MRS broth에서 GABA 함량이 $134.52{\mu}g/mL$이었고, MSG 2%와 3%가 첨가된 MRS broth에서GABA 함량이 각각 $212.27{\mu}g/mL$와 $234.63{\mu}g/mL$이었으며, 동정 결과 L. plantarum K74라고 명명되었다. L. plantarum K74의 최적 생장 온도는 $34^{\circ}C$이었으며, pH 4.4에 도달하기까지 18시간이 소요되었다. L. plantarum K74는 또한 답즙산과 산성의 pH에서 모두 우수한 생존력을 나타냈으며, 발암효소인 ${\beta}$-glucuronidase를 생성하지 않고 유당분해효소인 ${\beta}$-galactosidase를 약간 생성하는 것으로 나타났다. 항생제 내성 실험 결과 Kanamycin, Polymyxin B, Streptomycin에 내성을 Novobiocin, Bacitracin, Penicillin-G, Methicillin에감수성을나타냈으며, Escherichia coli와Salmonella typhimurium에 각각 54.9%와 46.3%의 억제 효과를 지니고 있고, Staphyloccous aureus에 대해서는 거의 억제 효과가 없는 것으로 나타났다.
Objectives : To satisfy the demand of good treatment of constipation Methods : we investigated the literatures of Oriental Medicine about Constipation. Results: 1. There are three categories of etimological factors of constipation, that is, endogenous, exogenous and non-exo-endogenous factor. The endogenous factor is caused by seven emotions, called depression of Ki and stagnation of Ki. The exogenous factor is six excessive atmospheric influences, for example, wind, cold, dampness, heat and dryness. And the non-exo-endogenous factors are overfatigue, improper diet, stagnated blood and deficiency of Ki and blood that comes from old age, long disease and after delivery. 2. Classification: According to cause of disease it is classified by constipation due to cold, heat, wind, dryness, retention of undigested and phlegm. According to Internal Organs there are constipation due to deficiency syndrome of the stomach, excess syndrome of the stomach, deficiency syndrome of kidney and splenic constipation. And Differentiation of syndromes according to Ki and blood, there are constipation of deficiency type and excess type. There are constipation due to stagnation and deficiency of Ki, deficiency of blood and stagnated blood. 3. Principles and Methods of treatment 1) Herbal Medicine (1) Excess type [1] Constipation due to heat : Seunggitang(承氣湯) and Majainwhan(麻子仁丸) [2] Constipation due to stagnation of Ki : Samatang(四磨湯) and Yukmatang(六磨湯) (2) Deficiency type [1] Constipation due to deficiency of Ki : Whanggitang(黃?湯) [2] Constipation due to deficiency of blood: Yunjangwhan(潤腸丸) [3] Constipation due to cold : Jechunjun(濟川煎) and Banyuwhan(半硫丸) 2) Enema therapy: It is a method to induce defecation by honey or pig's bile juice for weak people. 3) Acupuncture and Moxibustion: Acupoints used to treat constipation are BL25, ST25 and TE6. Moxibustion at CV8, CV6 is good for constipation due to cold. (4) Diet therapy: It is very important that we eat meals regularly and defecate on the same time even if you don't. And we have to eat food like fruits, vegetables and beans. (5) finger pressure: Finger pressing around these points like ST25, SP25, BL25, BL31, BL32, BL33 and BL34 is good for it. (6) Kigong therapy: Abdominal breathing (7) Old man' s constipation: Hip bath or diet therapy is commended. Laxation with lubricant like Supungyunjangwhan(搜風潤腸丸) is used. (8) Women' s constipation: After delivery, we have to administer tonifying prescription Sipjundaebotang(十全大補湯) and enema can be used. Conclusion : We have to examine the cause of disease and bowl movement carefully. After comprehensive analysis of the data gained by the four methods of diagnosis, we diagnose and treat patients on the base of overall of symptoms and signs.
목적 : 본(本) 연구(硏究)는 배기음(排氣飮)이 인간(人間)의 장관내(腸管內)에서 산화물(酸化物)에 의해 유발(誘發)된 세포(細胞)의 사망(死亡) 및 DNA의 손상(損傷)을 방지할수 있는지를 검증(檢證)하기 위한 실험(實驗)이다. 방법 : 배양(培養)된 인체장관(人體腸管) 세포계열(細胞系列)인 Caco-2 세포(細胞)에서 세포(細胞)의 사망(死亡)은 trypan bile의 소실정도에 의해서 평가했으며, DNA의 손상(損傷)은 double stranded DNA의 파괴정도를 측정하여 평가하였다. $H_2O_2$는 표본(標本) 산화제(酸化劑)로 사용되었다. 결과 : $H_2O_2$에 노출된 세포들의 세포사망(細胞死亡) 정도는 노출시간과 용량에 비례하여 증가하는 양상을 보였다. 배기음(排氣飮)은 $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)되는 세포방지를 방지하였고, 0.05-1%의 농도범위에 걸쳐서는 그 효과가 용량에 비례하여 증가하는 양상을 보였다. $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)된 세포손상(細胞損傷)은 catalase(hydrogen peroxide scavenger enzyme)와 deferoxamine(iron chelator)에 의해 억제되었다. 그러나 강력한 항산화제(抗酸化劑)인 DPPD는 $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)되는 세포손상(細胞損傷)에는 영향을 주지 못했다. $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)된 지질(脂質)의 과산화(過酸化)는 배기음(排氣飮)과 DPPD에 의해 억제되었다. $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)된 DNA의 손상(損傷)은 배기음(排氣飮)에 의해 방지되었으며 용량에 의존하는 양상을 보였다. $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)된 DNA의 손상은 catalase와 deferoxamine에 의해 억제되었지만 DPPD는 억제시키지 못했다. 배기음(排氣飮)은 $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)된 ATP의 소실을 회복시켰다. 이러한 실험결과 $H_2O_2$에 의해 유발(誘發)된 세포(細胞)의 손상(損傷)은 지질(脂質)의 과산화(過酸化)와는 다른 독립적인 기전에 의해 일어남을 나타낸다. 결론 : 이러한 결과들로 볼 때 Caco-2 세포(細胞)에서 배기음(排氣飮)이 항산화작용(亢酸化作用)보다는 다른 기전을 통하여 Caco-2 세포안에서 산화제(酸化劑)에 의해 유발(誘發)된 세포(細胞)의 사망(死亡)와 DNA의 손상(損傷)을 방지할 수 있다는 것을 가리킨다. 따라서 본 연구(硏究)는 배기음(排氣飮)이 반응성산소기(反應性酸素基)에 의해 매개된 인체(人體) 위장관질환(胃腸管疾患)의 치료(治療)에 사용할 수 있을 가능성(可能性)이 있음을 제시하고 있다.
As it is needed to assay possible feasibility of extrapolation between in vivo and in vitro systems and to develop a new in vitro method for toxicity testing, we investigated global gene expression from both animal and cell line treated with thioacetamide (TAA) and compared between in vivo and in vitro genomic profiles. For in vivo study, mice were orally treated with TAA and sacrificed at 6 and 24 h. For in vitro study, TAA was administered to a mouse hepatic cell line, BNL CL.2 and sampling was carried out at 6 and 24 h. Hepatotoxicity was assessed by analyzing hepatic enzymes and histopathological examination (in vivo) or lactate dehydrogenase (LDH) assay and morphological examination (in vitro). Global gene expression was assessed using microarray. In high dose TAA-treated group, there was centrilobular necrosis (in vivo) and cellular toxicity with an elevation of LDH (in vitro) at 24 h. Statistical analysis of global gene expression identified that there were similar numbers of altered genes found between in vivo and in vitro at each time points. Pathway analysis identified several common pathways existed between in vivo and in vitro system such as glutathione metabolism, bile acid biosynthesis, nitrogen metabolism, butanoate metabolism for hepatotoxicty caused by TAA. Our results suggest it may be feasible to develop toxicogenomics biomarkers by comparing in vivo and in vitro genomic profiles specific to TAA for application to prediction of liver toxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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