Delftia acidovorans 51-A isolated from river water degrades aniline. In order to clone genes involved in aniline degradation, transposon Tn5-B20 was inserted into the strain 51-A to generate a mutant strain 10-4-2 that cannot utilize aniline as a carbon source. The mutant strain was not an auxotroph but could not degrade aniline. Southern hybridization analysis indicated that the transposon was inserted into the mutant bacterial DNA as a single copy. Flanking DNA fragment of Tn5-B2O insertion was cloned and sequenced. DNA sequence analysis revealed three ORFs encoding TdnQ, TdnT, and TdnA 1 that arc responsible for catechol formation from aniline through oxidative deamination. The analysis also confirmed that Tn5-B2O was inserted at the immediate downstream of tdnA1. The result suggests that the transposon insertion behind tdirA1 disrupted the pathway of the catechol formation from aniline, resulting in the mutant phenotype, which cannot degrade aniline. A large plasmid over 100-kb in size was detected from D. acidovorans 51-A and Southern hybridization analysis with Tn5-B2O probe showed that the transposon was inserted on the plasmid named pTDN51. Our results indicated that the tdn genes on pTDN51 of D. acidovorans 51-A are involved in aniline degradation.
This study was carried out to investigate the effect of red wine on the color, hardness, springiness, chewiness, pH, volatile basic nitrogen (VBN) content, thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) value, and total bacterial number of pork meat stored at $4^{\circ}C$ for 10 days. Pork meat was treated with 25% water (control), 20% water and 5% red wine (RW5), 15% water and 10% red wine (RW10), or 10% water and 15% red wine (RW15). The lightness ($L^*$), redness ($a^*$) and yellowness ($b^*$) values tended to decrease with longer storage period (p<0.05). The $L^*$ values of RW10 and RW15 were higher than those of control and RW5 on the first day of storage, whereas the control and RW5 had higher $L^*$ values compared to RW10 and RW15 after 10 days (p<0.05). Hardness of RW5 was the lowest after 10 days of storage (p<0.05). The pH levels were not significantly different among the samples. The VBN contents increased with longer storage period (p<0.05), and those of RW10 and RW15 were lower than those of the control and RW5 after 10 days of storage (p<0.05). The TBARS values increased with longer storage period (p<0.05), and those of the control, RW5, RW10, and RW15 were 0.61, 0.45, 0.35 and 0.33 mg MA/kg, respectively, after 10 days of the storage. The total bacterial numbers increased with longer storage period, and those of RW5, RW10 and RW15 were lower compared to the control (p<0.05). Taste, tenderness, juiciness, and palatability were not significantly different among the samples, but the flavor of RW5 had the highest value after 10 days of storage (p<0.05). These results suggest that red wine can inhibit protein degradation, lipid oxidation, and bacterial growth when used as an additive of seasoned pork meat.
Wi, Seung Gon;Kim, Ik-Joo;Park, Young Man;Kim, Yoon Soo
한국문화재보존과학회:학술대회논문집
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2001.11a
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pp.27-34
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2001
Following the recommendations made by the cultural authorities the wooden cultural properties (WCP) had been treated with fire-retardants for fire protection. However, visual inspections of some of the WCPs treated with fire-retardants showed microbial decay. The work was extended to examine the micromorphological characteristics of the WCPs in a Buddhist temple which had been treated with fire-retardant. Microscopic examination showed the presence of typical soft rot cavities along the length of microfibrils in the secondary wall. Bacterial attack was also observed by scanning and transmission electron microscopy. It is interesting that the decay patterns observed in the Buddhist temple were very similar to those observed in the waterlogged woods. Presumably chemicals in the fire-retardants used rendered the wood susceptible to attack by soft-rot and bacterial decay by causing an increase in the moisture content of wood. Further studies are needed to investigate the effect of fire-retardants used currently on the hygroscopicity and the strength of wood materials in the WCPs. Microbial attacks caused degradation of the secondary cell walls and in some cases also of the middle lamella. In addition, the cell walls in the outer parts of wood were also degraded due to weathering, and cell separation occurred from total disintegration of the middle lamella.
Anaerobic digestion is an alternative method to digest food wastes and to produce methane that can be used as a renewable energy source. We investigated bacterial and archaeal community structures in a three-stage methane production process using food wastes with concomitant wastewater treatment. The three-stage methane process is composed of semianaerobic hydrolysis/acidogenic, anaerobic acidogenic, and strictly anaerobic methane production steps in which food wastes are converted methane and carbon dioxide. The microbial diversity was determined by the nucleotide sequences of 16S rRNA gene library and quantitative real-time PCR. The major eubacterial population of the three-stage methane process was belonging to VFA-oxidizing bacteria. The archaeal community consisted mainly of two species of hydrogenotrophic methanogen (Methanoculleus). Family Picrophilaceae (Order Thermoplasmatales) was also observed as a minor population. The predominance of hydrogenotrophic methanogen suggests that the main degradation pathway of this process is different from the classical methane production systems that have the pathway based on acetogenesis. The domination of hydrogenotrophic methanogen (Methanoculleus) may be caused by mesophilic digestion, neutral pH, high concentration of ammonia, short HRT, and interaction with VFA-oxidizing bacteria (Tepidanaerobacter etc.).
To develope the enhanced bacterial strains capable of biodegradation for various chlorinated aromatic compounds, 100 bacterial strains were isolated from soil samples of suburbs of Taejon, Cheongju, and Jeonju by the enrichment culture. These strains can degrade pentachlorophenol (PCP) which is a kind of wood preservatives. Nineteen strains of the isolates were selected by fast colony-forming rate on solid minimal media containing PCP as an only source of carbon and energy. These strains were identified to genus level. Fifteen strains were identified as Pseudomonas, 1 strain as Acinetobacter and 3 strains were not. Genus Alcaligenes strains were not found among them. Pseudomonas sp. MU135. MU139, MU163 and MU 184 were able to degrade for 4 kinds of chlorinated compounds, PCP, 2,4-D, MCPA and 3CB. Pseudomonas sp. If was observed that MU139 exhibits the highest degradability in liquid minimal media at 72 hours after inoculation. Pseudomoans sp. MU147, MU177, MU184 and MU192 also degraded the compounds at higher rates. As the results, Pseudomonas sp. MU139 and unidentified strain MU184 had biodegrability for broad range of chlorinated compounds and higher rates of degradation for PCP.
It was characterized the hexane biodegradation and mineralization using a hexane-degrading consortium, and analyzed its bacterial community structure by 16S rDNA PCR-DGGE (denaturing gradient gel electrophoresis). The specific growth rate (${\mu}_{max}$) of the hexane-degrading consortium was 0.2 $h^{-1}$ in mineral salt medium supplemented with hexane as a sole carbon source. The maximum degradation rate ($V_{max}$) and saturation constant ($K_{s}$) of hexane of the consortium are 460 ${\mu}mol{\cdot}g-DCW^{-1}{\cdot}h^{-1}$ and 25.87 mM, respectively. In addition, this consortium could mineralize $49.1{\%}$ of $^{14}C$-hexane to $^{14}CO_2$, and $43.6{\%}$ of $^{14}C$-hexane) was used for the growth of biomass. The clones isolated from the DGGE bands were closely related to the bacteria which were capable of degrading pollutants such as oil, biphenyl, PCE, and waste gases. The hexane-degrading consortium obtained in this study can be applied for the biological treatment of hexane.
Bacillus sp.LPO3 (producing emulsifying substances such as bio-surfactant) was used as a bio-control agent to degrade hydrocarbon (gasoline in oil spilled crop soil). The soil (brought from fertilizer store)was mixed with gasoline-spilled soil (made with Diatomaceous Earth, Sigma.U.S.A). The study was conducted for a period of 13 days, 13 days during which bacterial growth, hydrocarbon degradation and growth parameters of Bacillus sp.LP03 including shoot and root length were studied. We found that the effective of bacterial producing substance might bio-surfactants let the plants survive even more promote the growth of shoot and root length and showed antifungal activity against gray mold. Without the bacteria, they couldn't grow in oil-spilled soil not even survive. According to the results of the above experiments, we can see with following results, hydrocarbon in gasoline was reduced, day by day, then RNA dot blotting was done and it fit the results we had done. Finally, this Bacteria(producing bio-surfactant) were found to have effective bio-control agent for cropping in oil spilled soil and infected by gray mold.
To investigate bacteria with algal Iytic activities against Anabaena cylindrica when water blooming occurs and to study enzyme profiles of alga-Iytic bacteria, various bacterial strains were isolated from surface waters and sediments in eutrophic lakes or reservoirs in Korea. Abacterial strain AK-07 was characterized and identified as Acinetobacter johnsonii based on its16S rDNA base sequence. When AK-07 was co-cultivated with A. cylindrica, bacterial cells propagated to $8\;{\times}\;10^8$ cfu $ml^{-1}$ and Iyses algal cells. However, culture filtrates of AK-07 did not exhibit algal Iytic activities. That suggesting the enzymes on the surfaces of the bacterium might be effective algal Iytic agents to cause Iyses of cells. Acinetobacter johnsonii AK-07 exhibited high degradation activities against A. cylindrica, and formed alginase, caseinase, lipase, fucodian hydrolase, and laminarinase. Moreover, glycosidases for example ${\beta}$-galatosidase, ${\beta}$-glucosidase, ${\beta}$-glucosaminidase, and ${\beta}$-xylosidase, which hydrolyzed ${\beta}$-0-glycosidic bonds, were found in cell-free extracts of A. johnsonii AK-07. Other glycosidase such as ${\alpha}$-galctosidases, ${\alpha}$-N-Ac-galctosidases, ${\alpha}$-mannosidases, and ${\alpha}$- L-fuco-sidases, which cleavage ${\alpha}$-0-glycosidic bondsare not detected. In the results, enzyme systemsof A. johnsonii AK-07 were very complex to do-grade cell walls of cyanobacteria. The polysaccharides or peptidoglycans of A. cylindrica maybe hydrolyzed and metabolized to a range of easily utilizable monosaccharides or other low molecular weight organic substances by strain AK-07 of A. johnsonii.
The purpose of this study was to investigate the inhibitory effect of antibacterial substances produced by probiotic lactic acid bacteria (LAB) against biogenic amines-producing bacteria and the influence of culture conditions on the antibacterial activity of bacteriocin and organic acid. The bacteriocin solutions of Lactobacillus plantarum FIL20 (64 AU/ml) and Lactobacillus paracasei FIL31 (128 AU/ml) showed strong antibacterial activity against Serratia marcescens CIH09 and Aeromonas hydrophilia RIH28, respectively. And the lactic acid contents in the cell-free culture supernatants (CFCS) obtained from FIL20 and FIL31 strains were $107.3{\pm}2.7mM$ and $129.5{\pm}4.6mM$, respectively. Therefore, the bacteriocin solution (200 AU/ml) and the CFCS ($200{\mu}l/ml$) produced by L. plantarum FIL20 and L. paracasei FIL31 significantly (P < 0.05) decreased the bacterial numbers and histamine and tyramine production ability of S. marcescens CIH09 and A. hydrophilia RIH28. The amounts of histamine and tyramine produced by the CIH09 strain under conditions of low initial pH (5.0) and incubation temperature ($15^{\circ}C$) was significantly reduced by treatment with bacteriocin solution and CFCS obtained from L. plantarum FIL20. In addition, the bacterial counts and biogenic amines contents of CIH09 strain were significantly decreased (P < 0.05) when sodium chloride (5%) or potassium nitrite (200 mg/g) were mixed with the antibacterial substances of L. plantarum FIL20. Consequently, the bacteriocin and organic acid solution of L. plantarum FIL20 and L. paracasei FIL31 can be used as a biological preservation to effectively control the production of biogenic amines by the application of hurdle technology.
The selection of multienzyme complex-producing bacteria under aerobic condition was conducted for improving the degradation of lignocellulosic substances. The criteria for selection were cellulase and xylanase enzyme production, the presence of cellulose-binding domains and/or xylan-binding domains in enzymes to bind to insoluble substances, the adhesion of bacterial cells to insoluble substances, and the production of multiple cellulases and xylanases in a form of a high molecular weight complex. Among the six Bacillus strains, isolated from various sources and deposited in our laboratory, Paenibacillus curdlanolyticus B-6 strain was the best producer of cellulase and xylanase enzymes, which have both cellulose-binding factors (CBFs) and xylan-binding factors (XBFs). Moreover, multiple carboxymethyl cellulases (CMCases) and xylanases were produced by the strain B-6. The zymograms analysis showed at least 9 types of xylanases and 6 types of CMCases associated in a protein band of xylanase and cellulase with high molecular weight. These cells also enabled to adhere to both avicel and insoluble xylan, which were analyzed by scanning electron microscopy. The results indicated that the strain B-6 produced the multienzyme complex, which may be cellulosome or xylanosome. Thus, P. curdlanolyticus B-6 was selected to study the role and interaction between the enzymes and their substrates and the cooperation of multiple enzymes to enhance the hydrolysis due to the complex structure for efficient cellulases and xylanases degradation of insoluble polysaccharides.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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