This work aims to utilize wastes from the potato starch industry to produce single-cell protein (SCP) with high lysine content as animal feed. In this work, S-(2-aminoethyl)-L-cysteine hydrochloride-resistant Bacillus pumilus E1 was used to produce SCP with high lysine content, whereas Aspergillus niger was used to degrade cellulose biomass and Candida utilis was used to improve the smell and palatability of the feed. An orthogonal design was used to optimize the process of fermentation for maximal lysine content. The optimum fermentation conditions were as follows: temperature of 40℃, substrate concentration of 3%, and natural pH of about 7.0. For unsterilized potato starch wastes, the microbial communities in the fermentation process were determined by terminal restriction fragment length polymorphism analysis of bacterial 16S rRNA genes. Results showed that the dominant population was Bacillus sp. The protein quality as well as the amino acid profile of the final product was found to be significantly higher compared with the untreated waste product at day 0. Additionally, acute toxicity test showed that the SCP product was non-toxic, indicating that it can be used for commercial processing.
Song, Da Hye;Chun, Byung Hee;Lee, Sunmin;Reddy, Chagam Koteswara;Jeon, Che Ok;Lee, Choong Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.30
no.11
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pp.1697-1705
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2020
Meju, a type of fermented soybean paste, is used as a starter in the preparation of various Korean traditional soybean-based foods. In this study, we performed Illumina-MiSeq paired-end sequencing for microbial communities and mass spectrometry analysis for metabolite profiling to investigate the differences between 11 traditional meju products from different regions across Korea. Even though the bacterial and fungal communities showed remarkable variety, major genera including Bacillus, Enterococcus, Variovorax, Pediococcus, Weissella, and Aspergillus were detected in every sample of meju. The metabolite profile patterns of the 11 samples were clustered into two main groups: group I (M1-5) and group II (M6-11). The metabolite analysis indicated a relatively higher amino acid content in group I, while group II exhibited higher isoflavone, soyasaponin, and lysophospholipid contents. The bioactivity analysis proved that the ABTS (2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radical-scavenging activity was higher in group II and the FRAP (ferric reducing antioxidant power) activity was higher in group I. The correlation analysis revealed that the ABTS activity was isoflavonoid, lipid, and soyasaponin related, whereas the FRAP activity was amino acid and flavonoid related. These results suggest that the antioxidant activities of meju are critically influenced by the microbiome and metabolite dynamics.
Proceedings of the National Institute of Ecology of the Republic of Korea
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v.4
no.2
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pp.86-94
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2023
Climate change is more rapid in the Arctic than elsewhere in the world, and increased precipitation and warming are expected cause changes in biogeochemical processes due to altered microbial communities and activities. It is crucial to investigate microbial responses to climate change to understand changes in carbon and nitrogen dynamics. We investigated the effects of increased temperature and precipitation on microbial biomass and community structure in dry tundra using two depths of soil samples (organic and mineral layers) under four treatments (control, warming, increased precipitation, and warming with increased precipitation) during the growing season (June-September) in Cambridge Bay, Canada (69°N, 105°W). A phospholipid fatty acid (PLFA) analysis method was applied to detect active microorganisms and distinguish major functional groups (e.g., fungi and bacteria) with different roles in organic matter decomposition. The soil layers featured different biomass and community structure; ratios of fungal/bacterial and gram-positive/-negative bacteria were higher in the mineral layer, possibly connected to low substrate quality. Increased temperature and precipitation had no effect in either layer, possibly due to the relatively short treatment period (seven years) or the ecosystem type. Mostly, sampling times did not affect PLFAs in the organic layer, but June mineral soil samples showed higher contents of total PLFAs and PLFA biomarkers for bacteria and fungi than those in other months. Despite the lack of response found in this investigation, long-term monitoring of these communities should be maintained because of the slow response times of vegetation and other parameters in high-Arctic ecosystems.
The bacterial diversity of the bovine rumen was examined using a PCR-based approach. 16S rDNA sequences were amplified and cloned from three fractions of rumen (solid, fluid, and epithelium) that are likely to represent different bacterial niches. A total of 113 clones were sequenced, and similarities to known l6S rDNA sequences were examined. About $47.8\%$ of the sequences had $90-97\%$ similarity to 16S rDNA database sequences. Furthermore, about $62.2\%$ of the sequences were $98-100\%$ similar to 16S rDNA database sequences. For the remaining $6.1\%$, the similarity was less than $90\%$. Phylogenetic analysis was also used to infer the makeup of the bacterial communities in the different rumen fractions. The Cytophaga-Flexibacter-Bacteroides group (CFB, $67.5\%$), low G+C Gram-positive bacteria (LGCGPB, $30\%$), and Proteobacteria $(2.5\%)$ were represented in the rumen fluid clone set; LGCGPB $(75.7\%)$, CFB$(10.8\%)$, Proteobacteria $(5.4\%)$, high G+C Gram-positive bacteria (HGCGPB, $5.4\%$), and Spirochaetes $(2.7\%)$ were represented in the rumen solid clone set; and the CFB group $(94.4\%)$ and LGCGPB $(5.6\%)$ were represented in the rumen epithelium clone set. These findings suggest that the rumen fluid, solid, and epithelium support different microbial populations that may play specific roles in rumen function.
The population diversity and seasonal changes of bacterial communities in rice soils were monitored using both culture-dependent approaches and molecular methods. The rice field plot consisted of twelve subplots planted with two genetically-modified (GM) rice and two non-GM rice plants in three replicates. The DGGE analysis revealed that the bacterial community structures of the twelve subplot soils were quite similar to each other in a given month, indicating that there were no significant differences in the structure of the soil microbial populations between GM rice and non-GM rice during the experiment. However, the DGGE profiles of June soil after a sudden flooding were quite different from those of the other months. The June profiles exhibited a few intense DNA bands, compared with the others, indicating that flooding of rice field stimulated selective growth of some indigenous microorganisms. Phylogenetic analysis of l6S rDNA sequences from cultivated isolates showed that, while the isolates obtained from April soil before flooding were relatively evenly distributed among diverse genera such as Arthrobacter, Streptomyces, Terrabacter, and Bacillus/Paenibacillus, those from June soil after flooding mostly belonged to the Arthrobacter species. Phylogenetic analysis of 16S rDNA sequences obtained from the soil by cloning showed that April, August, and October had more diverse microorganisms than June. The results of this study indicated that flooding of rice fields gave a significant impact on the indigenous microbial community structure; however, the initial structure was gradually recovered over time after a sudden flooding.
Quorum sensing (QS) is a cell-to-cell communication system, which is used by many bacteria to regulate diverse gene expression in response to changes in population density. Bacteria recognize the differences in cell density by sensing the concentration of signal molecules such as N-acyl-homoserine lactones (AHL) and autoinducer-2 (AI-2). In particular, QS plays a key role in biofilm formation, which is a specific bacterial group behavior. Biofilms are dense aggregates of packed microbial communities that grow on surfaces, and are embedded in a self-produced matrix of extracellular polymeric substances (EPS). QS regulates biofilm dispersal as well as the production of EPS. In some bacteria, biofilm formations are regulated by c-di-GMP-mediated signaling as well as QS, thus the two signaling systems are mutually connected. Biofilms are one of the major virulence factors in pathogenic bacteria. In addition, they cause numerous problems in industrial fields, such as the biofouling of pipes, tanks and membrane bioreactors (MBR). Therefore, the interference of QS, referred to as quorum quenching (QQ) has received a great deal of attention. To inhibit biofilm formation, several strategies to disrupt bacterial QS have been reported, and many enzymes which can degrade or modify the signal molecule AHL have been studied. QQ enzymes, such as AHL-lactonase, AHL-acylase, and oxidoreductases may offer great potential for the effective control of biofilm formation and membrane biofouling in the future. This review describes the process of bacterial QS, biofilm formation, and the close relationship between them. Finally, QQ enzymes and their applications for the reduction of biofouling are also discussed.
A pilot-scale wastewater treatment plant combined with rotating biological contactor and tapered aeration reactors was operated with the wastewater discharged from a food factory for 5 months. The bacterial communities of this plant were investigated by terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP) and phylogenetic analysis of 16S rRNA genes. In spite of high concentration of nitrogen and phosphorus as well as organic carbon, removal efficiency of chemical oxygen demand, total nitrogen, and total phosphorus was 98%, 93%, and 95%, respectively. Bacterial community at the initial operation stage was clearly distinguished from that of the stable operation stage. The most predominant phylum in the sample of stable stage was Bacteroidetes. Major population of operation period was Haliscomenobacter, Sphaerotilus, and candidate division TM7, which were classified as filamentous bacteria. However, sludge bulking caused by these bacteria was not observed. The population that has a close relationship with Haliscomenobacter increased during the stable operation stage, emerging as the most predominant group. These results suggest that the filamentous bacteria participated in nutrient removal when using rotating biological contactor and tapered aeration reactor.
Lee, Soojung;Kim, Seoyoung;Kim, Ye Ji;Lee, Yun-Yeong;Cho, Kyung-Suk
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.49
no.2
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pp.225-238
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2021
CH4-oxidizing and N2O-reducing bacterial consortia were enriched from the rhizosphere soils of maize (Zea mays) and tall fescue (Festuca arundinacea). Illumina MiSeq sequencing analysis was performed to comparatively analyze the bacterial communities of the consortia with those of the rhizosphere soils. Additionally, the effect of root exudate on CH4 oxidation and N2O reduction activities of the microbes was evaluated. Although the inoculum sources varied, the CH4-oxidizing and N2O-reducing consortia derived from maize and tall fescue were similar. The predominant methanotrophs in the CH4-oxidizing consortia were Methylosarcina, Methylococcus, and Methylocystis. Among the N2O-reducing consortia, the representative N2O-reducing bacteria were Cloacibacterium, Azonexus, and Klebsiella. The N2O reduction rate of the N2O-reducing consortium from maize rhizosphere and tall fescue rhizosphere increased by 1.6 and 2.7 times with the addition of maize and tall fescue root exudates, respectively. The CH4 oxidization activity of the CH4-oxidizing consortia did not increase with the addition of root exudates. The CH4-oxidizing and N2O-reducing consortia can be used as promising bioresources to mitigate non-CO2 greenhouse gas emissions during remediation of oil-contaminated soils.
Recent succession of soil microorganisms and vegetation has occurred in the glacier foreland, because of glacier thawing. In this study, whole microbial communities, including bacteria, archaea, and eukaryotes, from the glacier foreland of Midtre Lovénbreen in Svalbard were analyzed by metagenome sequencing, using the Ion Torrent Personal Genome Machine (PGM) platform. Soil samples were collected from two research sites (ML4 and ML7), with different exposure times, from the ice. A total of 2,798,108 and 1,691,859 reads were utilized for microbial community analysis based on the metagenomic sequences of ML4 and ML7, respectively. The relative abundance of microbial communities at the domain level showed a high proportion of bacteria (about 86−87%), whereas archaeal and eukaryotic communities were poorly represented by less than 1%. The remaining 12% of the sequences were found to be unclassified. Predominant bacterial groups included Proteobacteria (40.3% from ML4 and 43.3% from ML7) and Actinobacteria (22.9% and 24.9%). Major groups of Archaea included Euryarchaeota (84.4% and 81.1%), followed by Crenarchaeota (10.6% and 13.1%). In the case of eukaryotes, both ML4 and ML7 samples showed Ascomycota (33.8% and 45.0%) as the major group. These findings suggest that metagenome analysis using the Ion Torrent PGM platform could be suitably applied to analyze whole microbial community structures, providing a basis for assessing the relative importance of predominant groups of bacterial, archaeal, and eukaryotic microbial communities in the Arctic glacier foreland of Midtre Lovénbreen, with high resolution.
This review describes the characteristics of various unculturable soil bacteria, successfully-cultivating examples of those bacteria, and the diverse factors to be considered for successful cultivation. Most importantly, the selection of proper media is very important because unculturable bacteria demand different types of nutrients at various concentrations of substrates, nitrogens and phosphorus. To develop a new medium to successfully culture unculturable bacteria from soil, molecular ecological studies should be combined together. The inoculum size on a plate is also important: less than 50 bacterial cells are recommended to be plated on a single culture plate. The environmental factors such as pH and salt concentration of the medium need to be adjusted as similar as possible to mimic the original soil environments, and the trial of the various temperatures and extended period of cultivation are better. Since one cannot simply tell about which one was unculturable among a great number of colonies grown on a newly developed medium, some suitable detection methods and fast identification methods are required. Many soil bacteria live with cooperation one another in their communities, so that enrichment such as coculture of using other bacterial metabolites and subsequent pure cultures can also guarantee successful cultivation of the previously uncultured bacteria in soil. Here, this review will discuss for the future perspectives to culture the unculturable soil bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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