Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1986.12a
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pp.529.2-529
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1986
pSp-Si (1.6kbp) was originally found in pediococcus halophilus to be a cryptic multicopy-plasmid. Hoping that the plasmid can also replicate in Bacillus subtilis, protoplast transformation of strain 207-25 (recE) was performed using pSP-Sl onto which was added the marker of tmrB8 (on 4.9 kbp EcoRI fragment ) or tmrB+ (on 0.9 kbp xbaI fragment) gene. Though the tmrB8 gene can expres tunicamycin-resistance at the single copy state, and the tmrB+ gene exerts the resistance only at the multicopy state, we could not confirm the replication of pSP-Sl (tmrB8) or pSP-Sl(tmrB+) in B. subtilis. During the experiment, however, we unexpectedly found that the circularized 0.9 kbp xgaI fragment (tmrB+) itself, which had no replication origin, could transform strain 207-25 to tunicamycin-resistant by protoplast transformation. Southern hybridization analyses with tmrB+ and other probes revealed the integration of the fragment at a single copy state into a position other than the homologous tmrB gene. This recE independent integration of another tmrB+ gene into the chromosome may contribute to the tunicamycinresistance in the transformants.
In this study, we optimized the production of ${\gamma}-polyglutamic$ acid (PGA) in soybean milk cakes (SMC) fermented with Bacillus subtilis GT-D and B. subtilis KU-A, to be utilized as a functional food ingredient. PGA production was dependent upon the glutamate content, fermentation time, and type of Bacillus sp. The consistencies of the SMCs fermented by B. subtilis GT-D and B. subtilis KU-A were highest after 36 hr of fermentation, and then decreased gradually. The SMC fermented by B. subtilis KU-A had a higher consistency than the SMC fermented by B. subtilis GT-D. In the presence of 10% defatted soy flour (DFS), 5% glutamate in the SMC was efficiently converted into polyglutamic acid (PGA) for 24 hr, indicating a conversion yield above 96%, but its conversion then decreased with higher concentrations of glutamate. The soluble solid content (mucilage) of the SMC fermented with B. subtilis KU-A was 9.5%(w/w), and composed of 65.6% PGA (Mw 1,536 kDa) and some polysaccharides. However, the SMC fermented with B. subtilis GT-D had a mucilage content of 7.8%(w/w), and was composed of 66.4% PGA (Mw 1,409 kDa), 11.5% levan, and some polysaccharides. The viscoelastic values of the mucilage obtained using B. subtilis KU-A were much higher than those of mucilage obtained using B. subtilis GT-D. Also, the G'-value (elastic modulus) was higher than the G"-value (viscous modulus).
A Bacillus strain capable of hydrolyzing locust bean gum was isolated as a producer of extracellular mannanase by way of an enrichment culture in an acidic medium from homemade soybean pastes. The isolate YB-1401 showed a biochemical identity of 61.1% with Brevibacillus laterosporus, while the nucleotide sequence of its 16S rDNA had the highest similarity with that of Bacillus amyloliquefaciens. The mannanase productivity of the Bacillus sp. YB-1401 was drastically increased by mannans. Particularly, maximum mannanase productivity was reached at approximately 265 U/ml in LB medium supplemented with konjac glucomannan (4.0%). The mannanase was the most active at $55^{\circ}C$ and pH 5.5. Mannanase activity was completely maintained after pre-incubation at pH 3.5 to 11.0 for 1 h. The predominant products resulting from the mannanase hydrolysis were mannobiose and mannotriose for LBG, guar gum or mannooligosaccharides. A small amount of mannose was also detected in the hydrolyzates.
This studies were engaged to investigate the potential us of Curcuma aromatica Salab. as a food ingredients. The antimicrobial activity of Curcuma aromatica Salab. extract (CE) and effect on shelf life of the cooked rice were examined. The antimicrobial activity of CE showed apparently against Bacillus cereus, B. subtilis and B. megaterium. The minimum inhibitory concentration (MIC) of CE was 0.15% for B. cereus md 0.2% for B. subtilis and B. megaterium. The antimicrobial activity of CE remained relatively high after heat treatments(30 min at 80 and $100^{\circ}C$, 15 min at $121^{\circ}C$). The shelf life of cooked rice containing above 0.05% CE increased more 1 or 2 days than that of control at $30^{\circ}C$, The texture of cooked rice was improved by addition of above 0.01% CE. The sensory quality of cooked rice with CE did not show significant difference between 0.00% and 0.05% in taste and overall acceptability but decreased above 0.10% in taste, color, flavor and overall acceptability.
Two isolates, Bacillus sp. BS87 and RK1, selected from soil in strawberry fields in Korea, showed high levels of antagonism towards Fusarium oxysporum f. sp. fragariae in vitro. The isolates were identified as B. velezensis based on the homology of their gyrA sequences to reference strains. BS87 and RK1 were evaluated for control of Fusarium wilt in strawberries in pot trials and field trials conducted in Nonsan, Korea. In the pot trials, the optimum applied concentration of BS87 and RK1 for pre-plant root-dip application to control Fusarium wilt was $10^5$ and $10^6$ colony-forming units (CFU)/ml, respectively. Meanwhile, in the 2003 and 2005 field trials, the biological control efficacies of formulations of RK1 were similar to that of a conventional fungicide (copper hydroxide) when compared with a non-treated control. The RK1 formulation was also more effective than BS87 in suppressing Fusarium wilt under field conditions. Therefore, the results indicated that formulations of B. velezensis BS87 and RK1 may have potential to control Fusarium wilt in strawberries.
Two Gram positive bacterial strains, designated strain GC-1 and GC-4, were isolated from coastal seawater near Jeju Island in the Republic of Korea. The two strains were identified as members of the genus Bacillus, based on 16S rRNA gene sequencing and data for physiological characteristics analyses. A subtle difference in physiological and genotypical characteristics has led us to designate the strains GC-1 and GC-4. The strain GC-1 showed a 99.91% similarity in 16S rRNA gene sequencing with B. tequiliensis and B. subtilis subsp. inaquosorum and the strain GC-4 showed a 100% similarity in 16S rRNA gene sequencing with those of B. altitudinis, B. stratosphericus, and B. aerophilus. However, both strains exhibited different physiological and genotypical characteristics in many aspects from those of their phylogenetically closest neighbors listed above, which implies that genus Bacillus has diversified into various species during its evolutionary process.
This study was conducted to investigate physicochemical and microbiological properties on waste composts of mushroom. The waste compost of mushroom consisted of 43.29% organic matter(O.M.), 27.0 O.M./Nitrogen, 1.60% total nitrogen, 46.48% water content, 0.64% salt content, 1.32% $P_2O_5$ 1.18% $K_2O$ and dry base. The microorganisms in the waste compost of mushroom were counted $1.6{\times}10^{10}cfu/g$. The main population of aerobic bacteria were Bacillus lentimobus, B. coagulans, B. brevis, Clostridium thermocellum, Escherichia coli, Streptomyces thermovulgaris, S. thermofuscus, Micropolyspora faeni, Aspergillus sp. and Penicillum sp..
The quality changes of chunggugjang produced by Bacillus sp. CS-17 was investigated with fermentation time. The pH was gradually alkalized. L-value became low while b-value became high. Both strength and hardness extraordinarily decreased during fermentation. Total content of free amino acid was $8274.7{\sim}9301.4\;mg%$ and phenylalanine, lysine, leucine and tyrosine were the most abundant components among the amino acids. The ratio of essential amino acid was $66.6{\sim}71.8%$. As a result of sensory test, it was found that the chunggugjang fermented by Bacillus sp. CS-17 was suitable enough to be produced for commercial purpose.
The antimicrobial activity of Curcuma aromatica Salab. was investigated. The Curcuma aromatica Salab. extract showed antimicrobial activity against six pathogens tested. These were Listeria monocytogenes ATCC 19115, Pseudomonas fluorescens ATCC 21541,Staphylococcus aureus ATCC 29273, Salmonella typhimurium ATCC 21541, vibrio parahaemolyticus ATCC 17802, and Aeromonas hydrophila KCTC 2358. Antimicrobial activity was alsonoted when the extract was tested against four isolates of Bacillus sp. purified from spoiled tofu. The growth of various pathogens was significantly inhibited (100 10,000-fold) upon growth in tryptic soy broth containing 0.05 0.2%(w/v) Curcuma aromatica Salab. extract(CE), after incubation for 12hr at $37^{\circ}C$. The growth of the four Bacillus isolates was also significantly inhibited in nutrient broth containing 0.05 0.2% CE after incubation for 24hr at $37^{\circ}C$. Although the antimicrobial activity of CE was decreased by heat treatment at temperatures above $80^{\circ}C$, the activity remained relatively high after heat treatment at $121^{\circ}C$ for 15min. The minimum inhibitory concentrations of CE were 0.1 0.3%(v/v culture) for the six pathogens, and 0.2 0.25% for the Bacillus isolates, respectively.
The characterization of a partially purified, cellulase-free, thermostable alkaline xylanase from thermoalkalophilic Bacillus sp. JB-99 was investigated. The xylanase production was the highest when birchwood xylan was added to a medium containing finely powdered rice bran, showing 4,826 IU$ml^-1$ of activity for 15 h of incubation. The partially purified xylanase exhibited an optimum temperature and pH at $70^C{\circ}$ and 10, respectively. The enzyme was stable at pH 5-11 at $50^C{\circ}$. The xylanase activity was strongly inhibited by $Hg^2+$, while dithiothreitol, cysteine, and ${\beta}$-mercaptoethanol enhanced the activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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