A bacterial strain MPL-01 was isolated from the large intestine of a wild boar. The strain was shown to have morphological, physiological and biochemical characteristics, fatty acids composition typical of Bacillus. The 16S rRNA gene sequence showed that the isolate formed distinct phyletic line that was most closely related to this of Bacillus atrophaeus (99.99%). It was proposed that the strain is classified as B. atrophaeus MPL-01. The strain MPL-01 exhibited the strongest antifungal activity against Colletotrichum acutatum, the pathogen of anthracnose of chili peppers. The ethyl acetate extract of culture filtrate possessed not only the antifungal activity but also the bio-surfactant activity. Therefore, the strain MPL-01 could be a useful bacterium in the development of bio-control process against the pathogenic fungi.
We analyzed the heat resistance of non-pathogenic Bacillus atrophaeus, Bacillus subtilis, and Geobacillus stearothermophilus spores which exhibit strong heat resistance and evaluated the possibility of using them to determine direct sterilization when manufacturing retort foods. The D121-values of B. subtilis, G. stearothermophilus, and B. atrophaeus spores were 2.9±0.1 min, 4.3±0.1 min, and 3.7±0.1 min, respectively. The Z-values of B. subtilis, G. stearothermophilus, and B. atrophaeus spores were 43.0±1.4℃, 25.0±1.6℃, and 35.8±1.4℃, respectively. The D121-values of B. subtilis, G. stearothermophilus, and B. atrophaeus spores were all higher than that of Clostridium botulinum spores used to confirm retort food sterilization. Considering these results, B. subtilis, G. stearothermophilus, and B. atrophaeus spores can be used instead of the pathogenic spore-forming bacteria C. botulinum when sterilizing retort food. In addition, sterilization can be confirmed in 2 to 3 days, a shorter time than the 13 days required for existing bacterial growth experiments based on the Korean food code.
The chitinase-producing strain SC081 was isolated from Korean traditional soy sauce and identified as Bacillus atrophaeus based on a phylogenetic analysis of the 16S rDNA sequence and a phenotypic analysis. A gene encoding chitinase from B. atrophaeus SC081 was cloned in Escherichia coli and was named SCChi-1 (GQ360078). The SCChi-1 nucleotide sequences were composed of 1788 base pairs and 596 amino acids, which were 92.6, 89.6, 89.3, and 78.9% identical to those of Bacillus subtilis (ABG57262), Bacillus pumilus (ABI15082), Bacillus amyloliquefaciens (ABO15008), and Bacillus licheniformis (ACF40833), respectively. A recombinant SCChi-1 containing a hexahistidine tag at the amino-terminus was constructed, overexpressed, and purified in E. coli to characterize SCChi-1. $H_6SCChi$-1 revealed a hydrolytic band on zymograms containing 0.1% glycol chitin and showed the highest lytic activity on colloidal chitin and acidic chitosan. The optimal temperature and pH for chitinolytic activity were $50^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively.
Kim Sun-Hee;Lee Sang-Cheol;Park In-Hye;Yoo Ju-Soon;Joo Woo-Hong;Hwang Cher-Won;Choi Young-Lark
Journal of Life Science
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v.15
no.5
s.72
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pp.679-684
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2005
The objective of this study was investigate the characteristic of biosurfactant produced from the iso-lated strain. The strain was isolated from soli samples of Duck-Yu Mountain and it was identified as Bacillus atrophaeus DYL-130 by 16S rDNA and gyrA gene nucleotide sequence analysis. The surface ten-sion of culture filtrate of Bacillus atrophaeus DYL-130 decreased to 28 mN/m and its biosurfactant con-centration was determined by diluting the culture filtrate until the critical micelle concentration (CMC). The emulsifying activity and stability of crude biosurfactant was measured by using water-immiscible hydrocarbons and oils as substrate. The biosurfactant was purified by affinity chromatography and the surface activity of purified biosurfactant was measured by drop-collapsing method and it could be effectively emulsify toluene.
A bacterial strain CJ-3 which produced chitinase was isolated from Korean traditional soy sauce. Using 16S rDNA analysis, the strain CJ-3 was identified as Bacillus atrophaeus. The approximate molecular weight of the putative chitinase enzyme was 31.0 kDa and the enzyme activity was remarkably induced by addition of colloidal chitin (0.5, 1.0, 2.0%). The antioxidant activity was increased 53% by the browning reaction products of B. atrophneus CJ-3. Escherichia. coli lipopolysaccharides (LPS)-induced production of nitric oxide(NO) was reduced up to 45% by the browning reaction product in RAW264.7 macrophage. Inhibition of cell viability in the presence of LPS was recovered to normal level by the browning reaction product. These results suggest that browning reaction of B. atrophaeus CJ-3 plays an important role for activation of immune system. B. atrophaeus CJ-3 exhibited optimum temperature and pH of 37$^{\circ}C$ and pH 7.0∼8.0, respectively. The major intracelluar free amino acid was determined to be glutamate.
Kim, Yi-Joon;Cao, Wa;Lee, Yu-Jeong;Lee, Sang-Un;Jeong, Jeong-Han;Lee, Jin-Woo
Journal of Life Science
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v.22
no.10
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pp.1295-1306
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2012
A microorganism producing carboxymethylcellulase (CMCase) was isolated from seawater and identified as Bacillus atrophaeus. This species was designated as B. atrophaeus LBH-18 based on its evolutionary distance and the phylogenetic tree resulting from 16S rDNA sequencing and the neighbor-joining method. The optimal conditions for rice bran (68.1 g/l), peptone (9.1 g/l), and initial pH (7.0) of the medium for cell growth was determined by Design Expert Software based on the response surface method; conditions for production of CMCase were 55.2 g/l, 6.6 g/l, and 7.1, respectively. The optimal temperature for cell growth and the production of CMCase by B. atrophaeus LBH-18 was $30^{\circ}C$. The optimal conditions of agitation speed and aeration rate for cell growth in a 7-l bioreactor were 324 rpm and 0.9 vvm, respectively, whereas those for production of CMCase were 343 rpm and 0.6 vvm, respectively. The optimal inner pressure for cell growth and production of CMCase in a 100-l bioreactor was 0.06 MPa. Maximal production of CMCase under optimal conditions in a 100-l bioreactor was 127.5 U/ml, which was 1.32 times higher than that without an inner pressure. In this study, rice bran was developed as a carbon source for industrial scale production of CMCase by B. atrophaeus LBH-18. Reduced time for the production of CMCase from 7 to 10 days to 3 days by using a bacterial strain with submerged fermentation also resulted in increased productivity of CMCase and a decrease in its production cost.
The bacteria which could hydrolyze the fibrin produced through the blood coagulation mechanism in the human body, were isolated from soybean paste. The KDO-13 strain was selected among the isolated bacteria as the best strain for fibrinolytic activity. It was spore forming and Gram positive. $C_{15:0}$ anteiso fatty acid, $C_{15:0}$ iso fatty acid and $C_{15:0}$ anteiso fatty acid were 47.7, 13.5 and 13.6%, respectively as major component among its cellular fatty acid composition. It showed the similarity of 57.7%, compared with standard strain. It was thus identified to be Bacillus atrophaeus according to Bergey's manual of systematic bacteriology and its fatty acid profiles of gas chromatography. The optimum culture temperature and pH were $37^{\circ}$ and 6 for the production of fibrinolytic enzyme by Bacillus atrophaeus KDO-13.
Han, Joon-Hee;Shim, Hongsik;Shin, Jong-Hwan;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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v.31
no.2
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pp.165-175
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2015
Anthracnose is a fungal disease caused by Colletotrichum species that is detrimental to numerous plant species. Anthracnose control with fungicides has both human health and environmental safety implications. Despite increasing public concerns, fungicide use will continue in the absence of viable alternatives. There have been relatively less efforts to search antagonistic bacteria from mudflats harboring microbial diversity. A total of 420 bacterial strains were isolated from mudflats near the western sea of South Korea. Five bacterial strains, LB01, LB14, HM03, HM17, and LB15, were characterized as having antifungal properties in the presence of C. acutatum and C. gloeosporioides. The three Bacillus atrophaeus strains, LB14, HM03, and HM17, produced large quantities of chitinase and protease enzymes, whereas the B. amyloliquefaciens strain LB01 produced protease and cellulase enzymes. Two important antagonistic traits, siderophore production and solubilization of insoluble phosphate, were observed in the three B. atrophaeus strains. Analyses of disease suppression revealed that LB14 was most effective for suppressing the incidence of anthracnose symptoms on pepper fruits. LB14 produced antagonistic compounds and suppressed conidial germination of C. acutatum and C. gloeosporioides. The results from the present study will provide a basis for developing a reliable alternative to fungicides for anthracnose control.
The objectives of this research were to 1) isolate and identify thermophilic bacteria for food waste treatment; 2) investigate the capability of food waste treatment using Bacillus species; and 3) develop air-dried Bacillus starters for food waste treatment. Five Bacillus species were isolated from food wastes and identified as Bacillus licheniformis (B. licheniformis) G1, Bacillus circulans C2, Bacillus subtilis (B. subtilis) E1, Bacillus vanillea F1, and Bacillus atrophaeus G2 based on 16S rDNA sequencing. Each identified Bacillus and the mixture of Bacillus species were cultivated in the standard food waste at $45^{\circ}C$ for 8 d. Changes in cell count, solid contents, and pH of the food waste were monitored during cultivation. Air-dried Bacillus cell powders were prepared using wheat flour and lactomil as excipients, and the cell count and survival rate were determined. The cell count of B. licheniformis G1 exhibited the highest number among the tested Bacillus (${\sim}10^8CFU/mL$). The greatest reduction in solid contents of food waste was achieved by B. subtilis E1 (22.6%). The mixture of B. licheniformis G1 and B. subtilis E1 exhibited a synergistic effect on the reduction of solid contents. Lactomil was determined as better excipient than wheat flour based on the greatest survival rate of 95%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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