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세탁세제 첨가용 효소 개발을 위한 남극 해양세균 유래 저온성 단백질분해효소의 특성 연구 (Characterization of an Antarctic alkaline protease, a cold-active enzyme for laundry detergents)

  • 박하주;한세종;임정한;김덕규
    • 미생물학회지
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    • 제54권1호
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    • pp.60-68
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    • 2018
  • 남극 해양세균 Pseudoalteromonas arctica PAMC 21717로부터 저온활성 alkaline protease (Pro21717)를 부분정제하였다. Pro21717 효소 추출액은 skim milk를 포함하는 zymogram gel 상에서 약 37 kDa (낮은 활성)과 74 kDa (높은 활성) 위치에서 두 개의 뚜렷한 투명밴드(clear zone)를 형성하였다. 단백질 분해활성을 나타내는 두 개의 효소단백질은 동일한 N-말단 아미노산 서열을 가지고 있었으며, 하나의 유전자에서 발현된 미성숙 단백질(precursor)이 37 kDa 크기의 단백질분해효소로 성숙화과정을 거친 후 74 kDa 크기로 이량체화됨으로써 좀 더 높은 활성을 가지는 것으로 판단된다. Pro21717은 $0-40^{\circ}C$ (최고활성 온도 $40^{\circ}C$) 온도 범위에서 단백질분해활성을 나타내었고 pH 5.0-10.0 (최적 pH 9.0) 범위에서 효소활성을 유지하였다. 주목할만한 특성으로써, Pro21717은 $40^{\circ}C$에서의 최고 효소활성(100%) 대비, $0^{\circ}C$$10^{\circ}C$에서 각각 30%와 45%의 높은 저온활성을 나타내었다. 또한 다양한 합성 펩타이드류에 대해 분해활성을 나타내는 Pro21717은 $Cu^{2+}$에 의해 활성이 증가하였으며, 시판용 세탁세제(commercial detergent formulation)에 포함되어 있는 다양한 종류의 계면활성제, 화학성분, 금속이온에 의해 활성이 감소되지 않았다. 전반적으로 저온활성 Pro21717은 글로벌 상업용효소 생산회사 Novozymes이 시판하고 있는 중온성 효소 Subtilisin Carlsberg (trademark Alcalase)에 버금가는 유용한 효소학적 특성이 있는 동시에 상대적으로 더 높은 저온활성을 보여주고 있다. 위의 실험결과들은, Pro21717은 $15^{\circ}C$ 이하의 차가운 수돗물에서도 세척력을 유지하는 새로운 세탁세제 효소첨가제로서의 개발 가능성을 보여주고 있다.

구룡산(九龍山)(옥천(決川)) 함(含)우라늄 흑색(黑色) 점판암(粘板岩)의 지화학(地化學) 및 성인(成因) (Geochemistry and Genesis of the Guryonsan(Ogcheon) Uraniferous Back Slate)

  • 김종환
    • 자원환경지질
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    • 제22권1호
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    • pp.35-63
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    • 1989
  • 구룡산(九龍山)(또는 옥천(沃川)) 함(含)우라늄 흑연질점판암(黑鉛質粘板岩)은 옥천대(沃川帶) 서북부(西北部)에 따라 증상(層狀) 또는 부딘상(狀)으로 90km이상(以上) 연장(延長) 분포(分布)한다. 함(含)우라늄점판암(粘板岩)의 오토레디오그라프에 나타나는 퇴적(堆積), 속성(續成), 변성구조(變成構造)는 우라늄과 동시퇴적물(同時堆積物)로서 속성작용과정(續成作用過程)에서 전혀 이동(移動)하지 않고 황성변성(廣域變成) 초기(初期)에 제자리에서 미립(微粒)우라니나이트로 재결정(再結晶)하였음을 보여준다. 동시(同時)에 유기물(有機物)은 미세환장흑연(微細環狀黑鉛)으로 되었다. 라미나구조(構造)의 발달(發達)과 평균(平均) 19.64% C, 2.32% S의 함유(含有)는 함(含)우라늄흑니(黑泥) 퇴적(堆積)의 일반조건(一般條件)으로서의 극(極)히 낮은 퇴적화(堆積比), 고유기물함유(高有機物含有), 염기성황경등을 충족(充足)하였으며 Th/U가 0.07로서 해수원(海水源)임을 뜻한다. 지역별(地域別) CaO, $P_2O_5$의 평균치(平均値)가 매우좁은 범위(範圍)의 일정치(一定値)이며 높은 CaO 평균치(平均値)를 나타내어 전퇴적(全堆積)분지를 통(通)하여 동일(同一) pH(7.8-8.0)조건(條件)의 환경(環境)에서 퇴적(堆積)하였음을 나타낸다. 함(含)우라늄점판암(粘板岩)은 같은 성인(成因)의 타산장(他産狀)에 비(比)하여 미량원소(微量元素) 부화도(富化度)가 매우 높다. 고부화(高富化)의 중요(重要)한 원인(原因)으로서 미량원소(微量元素)의 소스(source)인 해수(海水)의 주기적(週期的) 교체(交替)가 요구(要求)되는데 사이크릭퇴적구조(堆積構造)는 그러한 현상(現象)을 뒷받침하여 준다. 흑니(黑泥)의 성인별(成因別) 구성광물(構成鑛物)과 원소(元素)의 수반관계(隨伴關係)에서 쇄설성광물(鑛物)에는 Si, Al, K, Na, Ti, Zr, Th, Be, B, Li, 유기물(有機物)후락숀에, U, Ni, Cu, Co, Zn, Ag, Mo, Pb, Sn, Cd, S, Fe, V, Cr, Y, 탄산염광물(炭酸鹽鑛物)에 Ca, Mg, Mn, P, Ba가 높은 상관(相關)을 나타낸다. 유기물(有機物)의 우라늄고정심전능력(固定沈澱能力)에 있어 사프로페릭(Sapropelic)형(型)보다 휴믹(Humic)형(型)에서 더 높다. 육성식물(陸性植物)의 분해물(分解物)인 휴무스(Humus)는 고대성(古生代) 중기(中期)에 출현(出現)한다. 우라늄 함유(含有) 흑니(黑泥)는 이 시대(時代)의 형성물(形成物)로서 이런 형(型)의 광상(鑛床)은 생물상(生物相)의 진화(進化)에 규제(規制)된 광화작용(鑛化作用)의 산물(産物)이다.

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3D 프린팅 및 밀링 방법으로 제작된 임시 보철물 적합도 비교 분석 (Marginal and internal fit of interim crowns fabricated with 3D printing and milling method)

  • 손영탁;손큰바다;이규복
    • 구강회복응용과학지
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    • 제36권4호
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    • pp.254-261
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    • 2020
  • 목적: 본 연구의 목적은 서로 다른 제작 방법인 절삭 가공과 적층 가공 기술로 제작된 임시 보철물의 변연 및 내면 적합도를 평가하는 것이다. 연구 재료 및 방법: 상악 우측 제1대구치를 도재 수복을 위한 지대치 모형으로 준비하였다. 석고를 이용하여 총 40개의 실험 모형으로 복제하였고, 각각의 실험 모형을 구강 스캐너를 사용하여 스캔 데이터를 획득하였다. 3종의 3D 프린터(Meg-printer 2; Megagen, Zenith U; Dentis 그리고 Zenith D; Dentis) 및 1종의 밀링 장비(imes-icore 450i; imes-icore GmbH)를 사용하여 각 그룹당 10개의 임시 보철물을 제작하였다. 임시 보철물의 내면에 실리콘을 채우고 모형에 적합하여 중합이 완료된 후, 실리콘으로 내면이 복제되어 있는 실험 모형을 구강 스캐너를 사용하여 스캔 데이터를 획득하였다. 3차원 검사 소프트웨어(Geomagic control X; 3D Systems)를 이용하여 변연 간격, 절대 변연 간격, 섐퍼, 축벽, 교두, 교합 영역의 적합도를 분석하였다. 통계 분석은 제작 방법의 차이를 비교하기 위해서 Kruskal-Wallis test를 사용하여 검증하였으며, 사후 검정을 위해서 Mann-Whitney U-test and Bonferroni correction method을 사용하였다(α = 0.05). 결과: 3종의 3D 프린터와 1종의 밀링 장비에서 제작된 임시 보철물의 절대 변연 간격은 유의한 차이를 보이지 않았다(P = 0.812). 축벽, 교합 간격에서 밀링 장비와 3D 프린터 사이에 유의한 차이를 보였다(P < 0.001). 결론: 3종의 3D 프린터로 제작된 임시 보철물의 변연 적합도는 모두 임상적 허용 범위(< 120 ㎛)에 있었으므로, 적합도 측면에서 본다면 임시 보철물 제작을 위해서 충분히 사용될 수 있다.

Evaluation of a Nutrition Model in Predicting Performance of Vietnamese Cattle

  • Parsons, David;Van, Nguyen Huu;Malau-Aduli, Aduli E.O.;Ba, Nguyen Xuan;Phung, Le Dinh;Lane, Peter A.;Ngoan, Le Duc;Tedeschi, Luis O.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제25권9호
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    • pp.1237-1247
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    • 2012
  • The objective of this study was to evaluate the predictions of dry matter intake (DMI) and average daily gain (ADG) of Vietnamese Yellow (Vang) purebred and crossbred (Vang with Red Sindhi or Brahman) bulls fed under Vietnamese conditions using two levels of solution (1 and 2) of the large ruminant nutrition system (LRNS) model. Animal information and feed chemical characterization were obtained from five studies. The initial mean body weight (BW) of the animals was 186, with standard deviation ${\pm}33.2$ kg. Animals were fed ad libitum commonly available feedstuffs, including cassava powder, corn grain, Napier grass, rice straw and bran, and minerals and vitamins, for 50 to 80 d. Adequacy of the predictions was assessed with the Model Evaluation System using the root of mean square error of prediction (RMSEP), accuracy (Cb), coefficient of determination ($r^2$), and mean bias (MB). When all treatment means were used, both levels of solution predicted DMI similarly with low precision ($r^2$ of 0.389 and 0.45 for level 1 and 2, respectively) and medium accuracy (Cb of 0.827 and 0.859, respectively). The LRNS clearly over-predicted the intake of one study. When this study was removed from the comparison, the precision and accuracy considerably increased for the level 1 solution. Metabolisable protein was limiting ADG for more than 68% of the treatment averages. Both levels differed regarding precision and accuracy. While level 1 solution had the least MB compared with level 2 (0.058 and 0.159 kg/d, respectively), the precision was greater for level 2 than level 1 (0.89 and 0.70, respectively). The accuracy (Cb) was similar between level 1 and level 2 (p = 0.8997; 0.977 and 0.871, respectively). The RMSEP indicated that both levels were on average under-or over-predicted by about 190 g/d, suggesting that even though the accuracy (Cb) was greater for level 1 compared to level 2, both levels are likely to wrongly predict ADG by the same amount. Our analyses indicated that the level 1 solution can predict DMI reasonably well for this type of animal, but it was not entirely clear if animals consumed at their voluntary intake and/or if the roughness of the diet decreased DMI. A deficit of ruminally-undegradable protein and/or a lack of microbial protein may have limited the performance of these animals. Based on these evaluations, the LRNS level 1 solution may be an alternative to predict animal performance when, under specific circumstances, the fractional degradation rates of the carbohydrate and protein fractions are not known.

Declining Incidence of Nasopharyngeal Carcinoma in Brunei Darussalam: a Three Decade Study (1986-2014)

  • Chong, Vui Heng;Telisinghe, Pemsari Upali;LIM, Edwin;Abdullah, Muhammad Syafiq;Idris, Fidah;Chong, Chee Fui
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제16권16호
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    • pp.7097-7101
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    • 2015
  • Background: Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is linked to Epstein Barr virus infection and is particularly common in the Far East, particularly among some Chinese groups. Certain ethnicities have been reported to have low incidence of NPC. This study looked at NPC in Brunei Darussalam over a three decade period. Materials and Methods: The cancer registry from 1986 to 2014 maintained by the State Laboratory was retrospectively reviewed. The age standardized rates (ASR) and the age specific incidence rates (ASIR) were calculated. Non NPC tumors were excluded from the study. Results: Altogether, there were a total of 450 NPC cases diagnosed accounting for 4.4% of all total cancer cases over the study period, declining from 10.3% in 1986-1990 to 2.3% in 2011-2014. The most common tumor type was the undifferentiated carcinoma (96.4%). The case characteristics were mean age $50.4{\pm}14.4$ years old, male 69%, and predominately Malays 74.4%, followed by Chinese 16.7%. The mean age of diagnosis increased over the study period from $45.6{\pm}17.1$ years (1986-1989) to $54.1{\pm}12.5$ years (ANOVA, p<0.01 for trend). There were no differences in the mean age of diagnosis between the ethnic groups or genders. The ASR showed a declining trend from 11.1 per 100,000 in 1986-1990 to 5.95 per 100,000 in 2011-2014, similar trends been observedfor both genders. Among the age groups, declining trends were seen in all the other age groups apart from the >70 years group. The overall ASRs for the Malays and Chinese were 7.92/100,000 and 8.83/100,000 respectively, both showing declining trends. Conclusions: The incidence of NPC in Brunei Darussalam is comparable to rates reported from Singapore and Malaysia, but higher than rates reported from the other Southeast Asian nations. Unlike higher rates reported for Chinese compared to the Malays in other countries, the rates between the Malays and Chinese in our study was comparable. Importantly, the ASR is declining overall and for both genders and ethnic groups.

The Inhibitory Effects of Hydrogen Sulfide on Pacemaker Activity of Interstitial Cells of Cajal from Mouse Small Intestine

  • Parajuli, Shankar Prasad;Choi, Seok;Lee, Jun;Kim, Young-Dae;Park, Chan-Guk;Kim, Man-Yoo;Kim, Hyun-Il;Yeum, Cheol-Ho;Jun, Jae-Yeoul
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제14권2호
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    • pp.83-89
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    • 2010
  • In this study, we studied whether hydrogen sulfide ($H_2S$) has an effect on the pacemaker activity of interstitial cells of Cajal (ICC), in the small intestine of mice. The actions of $H_2S$ on pacemaker activity were investigated using whole-cell patch-clamp technique, intracellular $Ca^{2+}$ analysis at $30^{\circ}C$ and RT-PCR in cultured mouse intestinal ICC. Exogenously applied sodium hydrogen sulfide (NaHS), a donor of hydrogen sulfide, caused a slight tonic inward current on pacemaker activity in ICC at low concentrations (50 and $100{\mu}m$), but at high concentration ($500{\mu}m$ and 1 mM) it seemed to cause light tonic inward currents and then inhibited pacemaker amplitude and pacemaker frequency, and also an increase in the resting currents in the outward direction. Glibenclamide or other potassium channel blockers (TEA, $BaCl_2$, apamin or 4-aminopydirine) did not have an effect on NaHS-induced action in ICC. The exogenous application of carbonilcyanide p-triflouromethoxyphenylhydrazone (FCCP) and thapsigargin also inhibited the pacemaker activity of ICC as NaHS. Also, we found NaHS inhibited the spontaneous intracellular $Ca^{2+}$ ($[Ca^{2+}]_i$) oscillations in cultured ICC. In doing an RT-PCR experiment, we found that ICC enriched population lacked mRNA for both CSE and CBS, but was prominently detected in unsorted muscle. In conclusion, $H_2S$ inhibited the pacemaker activity of ICC by modulating intracellular $Ca^{2+}$. These results can serve as evidence of the physiological action of $H_2S$ as acting on the ICC in gastrointestinal (GI) motility.

서울 북부지역에 거주하는 정상 아동의 모발 미네랄 함량 (Trace element concentrations profiles in the hair of normal children living in the northern area of Seoul)

  • 권지원;김병의;박미정;김상우
    • Clinical and Experimental Pediatrics
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    • 제49권1호
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    • pp.18-23
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    • 2006
  • 목 적 : 영양상태, 환경 오염원에 노출, 질병상태의 한 검진 방법으로서 모발 미네랄검사의 타당성에 대해 아직 많은 이견이 있으며 아직 국내 정상 소아의 참고치는 연구된 바 없다. 이에 저자들은 건강한 아동들의 모발 미네랄 함량의 정상 참고치를 산출하고 그 특성을 알아보고자 하였다. 방 법 : 서울시의 북부지역에 거주하는 3-12세 사이의 질병이 없는 건강한 정상 아동 223명(남아 110명, 여아 113명, 평균 연령 $8.8{\pm}2.2$세)을 대상으로 모발을 채취하여 유도결합플라즈마질량분석기(ICP-MS)를 통해 영양 미네랄 11가지(나트륨, 마그네슘, 인, 칼륨, 칼슘, 크롬, 망간, 철, 구리, 아연, 셀레늄)와 독성 미네랄 6가지(알루미늄, 비소, 카드뮴, 바륨, 수은, 납)의 함량을 측정하고 이를 분석하였다. 결 과 : 칼슘 및 마그네슘의 농도는 여아에서 남아보다 높았고 카드뮴, 납 및 크롬의 농도는 남아에서 여아보다 높았다. 아연, 칼슘, 마그네슘, 구리 및 수은은 연령이 증가할수록 모발 중 함량이 증가하는 상관관계를 보였다. 한국 아동의 모발 미네랄 함량의 참고치를 외국과 비교하였을 때 우리나라 아동은 아연치가 외국에 비해 낮은 경향을 보였다. 결 론 : 본 연구를 통해 국내 정상 아동의 모발 미네랄 함량의 기준치가 제시되었으며 본 연구에서 제시된 참고치가 한국 아동들의 여러 가지 질병과 모발 내 미네랄 함량과의 관계를 연구하는 데 유용한 기초 자료로 쓰일 것이라 사료된다.

LPS로 활성화된 복강 대식세포에서 세신 추출물의 항염증 효과 (Anti-inflammatory effect of extract of Asarum sieboldii in LPS-stimulated Murine peritoneal macrophage)

  • 정원석;유현미;서상완;조준기;손지우;박민철;최창민;염승룡;황상욱;김영우;송달수;채영석;김영목;박성주;신민교;송호준
    • 대한본초학회지
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    • 제21권2호
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    • pp.189-195
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    • 2006
  • Objectives : The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effects of extract Asarum sieboldii(AS) on the peritoneal macrophage. Methods : To evaluate of anti-inflammatory of AS, we examined cytokines production in lipopolysacchride (LPS)-induced macrophages. Furthermore, we checked molecular mechanism using western blot. Results : 1. Extract from AS reduced LPS-induced Nitric oxide (NO), tumor necrosis factor-a (TNF-a), interleukin (IL)-6 and IL-12 production in peritoneal macrophages 2. Extract from AS itself does not have any cytotoxic effect. AS inhibited the activation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) such as p38, extracelluar signal-regulated kinase B a (IkBa) in the LPS-stimulated peritoneal macrophages Conclusion : AS down-regulated LPS-induced NO and cytokines production, which could provide a clinical basis for anti-inflammatory properties of AS

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SUPPRESSION OF PHORBOL ESTER-INDUCED EXPRESSION OF CYCLLOOXYGENASE-2 AND INDUCIBLE NITRIC OXIDE SYNTHASE BY SELCTED CHEMOPREVENTIVE PHYTOCHEMICALS VIA DOWN-REGULATION OF NF-$\textsc{k}$B

  • Surh, Young-Joon
    • 한국독성학회:학술대회논문집
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    • 한국독성학회 2002년도 국제심포지움
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    • pp.88.2-98
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    • 2002
  • A wide arry of naturally occurring substances particularly those present in dietary and medicinal plants, have been reported to possess substantial cancer chemopreventive properties. Certain phytochemicals retain strong antioxidative and anti-inflammatory properties which appear to contribute to their chemopreventive or chemoprotective activities. Inducible cyclooxygenase(COX-2) and nitric oxide synthase (iNOS) are important enzymes that mediate inflammatory processes. There is some evidence that expression of both COX-2 and iNOS is co-regulated by the eukaryotic transcription factor NF-$textsc{k}$B. Increased expression of COX-2 and/or iNOS has been associated with pathophysiology of certain types of human cancers as well as inflammatory diseases. Since inflammation is closely linked to tumor promotion, substances with potent anti-inflammatory activies are anticipated to exert chemopreventive effects on carcinogenesis, particularly in the promotion stage. An example is curcumin, a yellow pigment of turmeric (Curcuma longa L., Zingiberaceae), that strongly occurring diaryl heptanoids structurally related to curcumin have substantial anti-tumor promotional activities in two-stage mouse skin carcinogenesis. Thus, yakuchinone A [1-(4'-hydroxy-3'-methoxyphenyl)-7-phenyl-3heptanone] and yakuchinone B [1-(4'-hydroxy-3'methoxyphenyl)-7-phenylhept-1-en-3-one] present in Alpinia oxyphylla Miquel (Zingiberacease) attenuate phorbol ester-induced inflammation and papilloma formation in female ICR mice. These diarylheptanoids also suppressed phorbol ester-induced activation of epdermal ornithine decarboxylase and its mRNA expression when applied onto shaven backs of mice. Yakuchinone A and B as well as curcumin inhibited phorbol ester-induced expression of COX-2 and iNOS and their mRNA in mouse skin via inactivation of NF-$textsc{k}$B. Capsaicin, a major pungent ingredient of red pepper also attenuated phorbol ester-induced NF-$textsc{k}$B activation. Similar suppression of COX-2 and iNOS and down-regulation of NF-$textsc{k}$B activation for its DNA binding were observed with the ginsenosied Rg3 and the ethanol extract of Artemisia asiatica. We have also found that certain anti-inflammatory phytochemicals exert inhibitory effects on phorbol ester-induced COX-2 expression and NF-$textsc{k}$B activation in immortalized human breast epithelial (MCF-10A) cells in culture. One of the plausible mechanisms undelying inhibition by aforementioned phytochemicals of phorbol ester-induced NF-$textsc{k}$B activation involves interference with degragation of the inhibitory unit, I$textsc{k}$Ba, which blocks subsequent nuclear translocation of the functionally active p65 subunit of NF-$textsc{k}$B. the activation of epidermal NF-$textsc{k}$B by phorbol ester and subsequent induction of COX-2 hence appear to play an important role in intracellular signaling pathwasy leading to tumor promotion and targeted inhibition of NF-$textsc{k}$B may provide a new promising cancer chemopreventive strategy.

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유전자총과 아그로박테리움을 이용한 여러 가지 한국 잔디류의 형질전환체계 확립 (Establishment of a transformation protocol combination particle bombardment with Agrobacterium tumefaciens in different zoysiagrass cultivars)

  • 김종보;김경덕;박대섭
    • 아시안잔디학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.141-148
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    • 2004
  • 다양한 Zoysiagrass 4가지 품종들을 식물재료로 사용하여 Agrobacterium만 이용한 방법 그리고 particle bombardment로 배발생캘러스에 상처를 낸 후, Agrobacterium으로 공동배양 시키는 2가지 다른 형질전환 방법을 비교하였다. 예비실험에서 일반적으로 형질전환에 널리 사용되는 kanamycin과 PPT(phospinitricin)의 적적선발농도에 대해서 실험하였는데, kanamycin의 경우 300mg/l 그리고 PPT의 경위 50mg/l의 농도에서 가장 효과적인 선발 효율을 나타내었다. Agrobacterium을 이용한 형질전환은 Agrobacterium을 2일간 배양시킨 다음, 박테리아 농도를 O.D 600nm=1.0-1.2로 맞추고, 배발생캘러스를 30분간 간염 시키는 방법이 효과적이었는데, particle bombardment를 이용하여 캘러스에 상처를 유발시킨 후, Agrobacterium으로 감염시키면 3배 이상 높은 형질전환 수율을 획득할 수 있었다. 이상의 결과는 한국잔디 형질전환에 있어서 particle bombardment과 Agrobacterium을 병행하여 실시한 최초의 보고이고, 이러한 시스템을 기반으로 하여 향후 한국잔디를 포함하여 다른 난지형 및 한지형 잔디의 품종개량에 널리 이용되리라 생각된다.