Objective : Paeoniae radix alba(PRA) can enrich the blood and regulate menstruation, astringe yin and arrest sweating, calm the liver and arrest pain. This study was designed to investigate effects of PRA on skin whitening and elasticity using melanoma cells. Methods : In this experiment, effect of PRA on cell viability, inhibition of melanin synthesis and inhibitory effect on tyrosinase and elastase. Results : 1. More than $1,000\;{\mu}g/ml$ of PRA treated group showed lowered proliferation rates significantly compared to non-treated control group. 2. All of treated groups were lower levels of melanin synthesis respectively. 3. PRA did not show inhibitory effect on tyrosinase activities in vitro. But, PRA suppressed tyrosinase activities in B16F10 cells significantly. 4. PRA suppressed elastse type 1 activities in dose-dependent manner in vitro. But, PRA slightly suppressed elastase type 4 activities in vitro, and PRA also slightly suppressed elastase activities in vivo. Conclusion : These results suggest that PRA can inhibit melanin synthesis through ihhibitory action on tyrosinase activity and inhibt elastase activity, and also suggest that these results can be used for the study on maintaining skin whitening or elasticity.
Cornis fructus has been traditionally used for treating allergy, asthma, hepatitis, and chronic nephritis. It major chemical constituents have been saponins, phenolic acids and loganin. The main aim of the present study was to examine the effect of methanol extract from Cornis fructus on melanogenesis. Cell were cultured in the presence of methanol extracts from Cornis fructus for 48 h, and there were estimated total melanin content as a final product and activity of tyrosinase, a key enzyme, in melanogenesis. Methanol extract from Cornis fructus increased the melanin content and tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Particularly, it was observed that only methanol extract $200\;{\mu}g/ml$ stimulated the melanin secretion in B16/F10 melanoma cells by 152% at 48 h treatment and the activity of tyrosinase was increased by 261% in the presence of same concentration.
Glycosylation of resveratrol was carried out by using the amylosucrase of Deinococcus geothermalis, and the glycosylated products were tested for their solubility, chemical stability, and biological activities. We synthesized and identified these two major glycosylated products as resveratrol-4'-O-α-glucoside and resveratrol-3-O-α-glucoside by nuclear magnetic resonance analysis with a ratio of 5:1. The water solubilities of the two resveratrol-α-glucoside isomers (α-piceid isomers) were approximately 3.6 and 13.5 times higher than that of β-piceid and resveratrol, respectively, and they were also highly stable in buffered solutions. The antioxidant activity of the α-piceid isomers, examined by radical scavenging capability, showed it to be initially lower than that of resveratrol, but as time passed, the α-piceid isomers' activity reached a level similar to that of resveratrol. The α-piceid isomers also showed better inhibitory activity against tyrosinase and melanin synthesis in B16F10 melanoma cells than β-piceid. The cellular uptake of the α-piceid isomers, which was assessed by ultra-performance liquid chromatography (UPLC) analysis of the cell-free extracts of B16F10 melanoma cells, demonstrated that the glycosylated form of resveratrol was gradually converted to resveratrol inside the cells. These results indicate that the enzymatic glycosylation of resveratrol could be a useful method for enhancing the bioavailability of resveratrol.
Lee, Hyun Jeong;An, Sungkwan;Bae, Seunghee;Lee, Jae Ho
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제26권2호
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pp.113-123
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2022
Diarylpropionitrile (DPN), a selective agonist for estrogen receptor β (ERβ), has been reported to regulate various hormonal responses through activation of ERβ in tissues including the mammary gland and brain. However, the effect of DPN on melanogenesis independent of ERβ has not been studied. The aim of this study is to examine the possibility of anti-melanogenic effect of DPN and its underlying mechanism. Melanin contents and cellular tyrosinase activity assay indicated that DPN inhibited melanin biosynthesis in alpha-melanocyte stimulating hormone-stimulated B16F10 melanoma cell line. However, DPN had no direct influence on in vitro tyrosinase catalytic activity. On the other hand, 17β-estradiol had no effect on inhibition of melanogenesis, suggesting that the DPN-mediated suppression of melanin production was not related with estrogen signaling pathway. Immunoblotting analysis showed that DPN down-regulated the expression of microphthalmia-associated transcription factor (MITF), a central transcription factor of melanogenesis and its down-stream genes including tyrosinase, tyrosinase-related protein (TRP)-1, and TRP-2. Also, DPN attenuated the phosphorylation of protein kinase A (PKA) and cAMP-response element-binding protein (CREB). Additionally, DPN suppressed the melanin synthesis in UVB-irradiated HaCaT conditioned media culture system suggesting that DPN has potential as an anti-melanogenic activity in physiological conditions. Collectively, our data show that DPN inhibits melanogenesis via downregulation of PKA/CREB/MITF signaling pathway.
For the purpose of the development of skin-whitening or therapeutic agents against hyperpigmentation, aqueous extract from Nardostachys chinensis (AENC) was evaluated for melanogenesis inhibitory activity in B16F10 melanoma cell. The treatment with AENC at the 0.2, 0.5 and 1.0 mg/ml level significantly inhibits the biosynthesis of melanin compared with untreated control. The tyrosinase activity also significantly decreased in AENC-treated cells at the 0.2 and 0.5 mg/ml level and inhibitory effects were more efficient than commercial arbutin at 0.1 mg/ml. The Western analyses confirmed the significantly decreased expression of tyrosinase and tyrosinase-related protein-2 by AENC treatment. These results indicate that AENC may contribute to the inhibition of melanin biosynthesis through regulating the expression as well as activity of tyrosinase and AENC may be useful as a new candidate in the design of new skinwhitening or therapeutic agents.
Acquired pigmentary skin diseases such as abnormal melanogenesis, vitiligo, chloasma and inflammatory pigmentation are related to regulate the melanin production, In this study, an ethanol extract of Hovenia dulcis Thunb.(EHD) makedly inhibited melanin biosynthesis and suppressed, the protein expression of tyrosinase, tyrosinase-related protein 1(TRP-1), and tyrosinase-related protein 2(TRP-2) in B16F10 cells. On the other hand, EHD did not inhibit mushroom tyrosinase activity. These results indicate that EHD may contribute to the inhibition of melanin biosynthesis through regulating tyrosinase activity and expression, and serve as a new candidate in the design of new skin-whitening or therapeutic agents.
${\beta}$-Agarase cleaves the ${\beta}$-1,4 linkages of agar to produce neoagarooligosaccharides (NAO), which are associated with various physiological functions. However, the immunological functions of NAO are still unclear. In this study, we demonstrated that ${\beta}$-agarase DagA-produced neoagarohexaose (DP6), an NAO product, promoted the maturation of dendritic cells (DCs) by Toll-like receptor 4 (TLR4). DP6 directly and indirectly enhanced the activation of natural killer (NK) cells in a TLR4-dependent manner in vitro and in vivo. Finally, the antitumor activity of DP6 against B16F1 melanoma cells was inhibited in NK cell-depletion systems by using NK-cell depleting antibodies in vivo. Collectively, the results indicated that DP6 augments antitumor immunity against B16F1 melanoma cells via the activation of DC-mediated NK cells in a TLR4-dependent manner. Thus, DP6 is a potential candidate adjuvant that acts as an immune cell modulator for the treatment of melanoma.
Melanin is a natural skin pigment produced by specialized cells called melanocytes via a multistage biochemical pathway known as melanogenesis, involving the oxidation and polymerization of tyrosine. Melanogenesis is initiated upon exposure to ultraviolet (UV) radiation, causing the skin to darken, which protects skin cells from UVB radiation damage. However, the abnormal accumulation of melanin may lead to the development of certain skin diseases, including skin cancer. In this study, the antioxidant and antimelanogenic activities of the cell-free supernatant (CFS) of twenty strains were evaluated. Based on the results of 60% 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl scavenging activity, 21% 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) scavenging capacity, and a 50% ascorbic acid equivalent ferric reducing antioxidant power value, Limosilactobacillus fermentum JNU532 was selected as the strain with the highest antioxidant potential. No cytotoxicity was observed in cells treated with the CFS of L. fermentum JNU532. Tyrosinase activity was reduced by 16.7% in CFS-treated B16F10 cells (but not in the cell-free system), with >23.2% reduction in melanin content upon treatment with the L. fermentum JNU532-derived CFS. The inhibitory effect of the L. fermentum JNU532-derived CFS on B16F10 cell melanogenesis pathways was investigated using quantitative reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting. The inhibitory effects of the L. fermentum JNU532-derived CFS were mediated by inhibiting the transcription of TYR, TRP-1, TRP-2, and MITF and the protein expression of TYR, TRP-1, TRP-2, and MITF. Therefore, L. fermentum JNU532 may be considered a potentially useful, natural depigmentation agent.
소사나무(Carpinus turczaninowii, C. turczaninowii) 잎 추출물의 멜라닌 생성 억제활성을 B16F10 melanoma 세포를 이용하여 측정하였다. 그 결과, 에탄올 추출물($100{\mu}g/mL$)에서 72.2%의 생성 억제 효과를 확인하였으며, 동일 농도에서 MTT 세포독성은 거의 나타나지 않았다. 분획물(헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물)을 제조한 후 실험을 진행한 결과, 에틸아세테이트 분획에서 가장 우수한 활성이 관찰되었다. 에틸아세테이트 분획에서 활성성분을 규명하기 위하여 크로마토그라피를 진행하였으며, 4개의 화합물을 분리 동정하였다; ethyl gallate (1), quercetin rhamnose (2), kaempferol rhamnose (3), quercetin galloylrhamnose (4). 화합물의 구조규명은 핵자기공명분광기 등을 이용하여 이루어졌으며, 4개의 화합물 모두 소사나무 잎에서는 처음 분리된 물질이다. 분리된 화합물을 대상으로 멜라닌 생성 억제활성 실험을 진행한 결과, 화합물 4에서 세포독성 없이 농도의존적인 억제활성을 확인하였다. 또한, 화합물 4는 세포 내에서 티로시나제 발현양을 감소시키고 있음을 ELISA를 통하여 확인하였다. 이상의 결과를 바탕으로, 소사나무 잎 추출물이 화장품에서 미백제로 활용될 가능성이 있다고 판단된다.
Kim, Kyuri;Jeong, Hae-In;Yang, Inho;Nam, Sang-Jip;Lim, Kyung-Min
Journal of Ginseng Research
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제45권1호
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pp.98-107
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2021
Background: Ginseng extracts and ginseng-fermented products are widely used as functional cosmetic ingredients for their whitening and antiwrinkle effects. Recently, increasing attention has been given to bioactive metabolites isolated from endophytic fungi. However, little is known about the bioactive metabolites of the fungi associated with Panax ginseng Meyer. Methods: An endophytic fungus, Penicillium sp. SNF123 was isolated from the root of P. ginseng, from which acremonidin E was purified. Acremonidin E was tested on melanin synthesis in the murine melanoma cell line B16F10, in the human melanoma cell line MNT-1, and in a pigmented 3D-human skin model, Melanoderm. Results: Acremonidin E reduced melanogenesis in α-melanocyte-stimulating hormone (α-MSH)-stimulated B16F10 cells with minimal cytotoxicity. qRT-PCR analysis demonstrated that acremonidin E downregulated melanogenic genes, including tyrosinase and tyrosinase-related protein 1 (TRP-1), while their enzymatic activities were unaffected. The antimelanogenic effects of acremonidin E were further confirmed in MNT-1 and a pigmented 3D human epidermal skin model, Melanoderm. Immunohistological examination of the Melanoderm further confirmed the regression of both melanin synthesis and melanocyte activation in the treated tissue. Conclusion: This study demonstrates that acremonidin E, a bioactive metabolite derived from a fungal endophyte of P. ginseng, can inhibit melanin synthesis by downregulating tyrosinase, illuminating the potential utility of microorganisms associated with P. ginseng for cosmetic ingredients.
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