본 연구에서는 몇 가지 생물공학 기반 기술로서 이미 한방 화장품의 소재로 사용되고 있는 쇠비름 에탄올 추출액의 tyrosinase 저해, collagen 합성, 항염증 기대 효과, 항노화 대한 효능을 알아보기 위하여 B16F10 mouse melanoma cell, NIH3T3 mouse embryonic fibroblast, MCF-7 human breast adenocarcinoma cell에 쇠비름 추출액을 처리하여 실험하였다. 실험 결과, 쇠비름 에탄을 추출액 (0.5mg/mL)은 tyrosinase 발현을 억제하여 멜라닌 합성을 억제하며, 농도 의존적으로 NIH3T3 mouse fibroblast 세포의 collagen 합성을 촉진시켰다. 또한 2.0 mg/mL 농도의 쇠비름 추출액은 목단피보다 더욱 효과적으로 cytokine (TNF-$\alpha$)에 의한 NF-${\kappa}B$ 활성을 억제시켰다. Doxorubicin에 의한 과노화에서도 효과적인 항노화 작용을 하는 것으로 나타났다. Tyrosinase 합성을 억제하므로 미백에 대한 효과와 세포의 생장을 도와 collagen 합성을 촉진함으로서 노화방지에 효과적인 것으로 사료되며, TNF-$\alpha$에 의한 NF-${\kappa}B$의 활성화를 저해함으로서 염증반응 억제 효과도 기대 할 수 있다.
Vaccinium uliginosum L. (VU) is a flowering plant in the genus Vaccinium has berry fruit. This study was performed to investigate the effect of water extract of Vaccinium uliginosum L. and fractions on inhibition of melanogenesis and wrinkle formation. One hundred grams of the Vaccinium uliginosum L. was extracted with 2,000 mL of water ($90^{\circ}C$, 16h, 2 times). The water extracts were lyophilized and stored at $4^{\circ}C$ until used. Vaccinium uliginosum L. extracts showed scavenger activities on DPPH radical, superoxide anion radical, hydroxyl radical, hydrogen peroxide and singlet oxygen radical, dose dependently. And VU extract and fractions reduced melanin contents on B16F10 melanoma and inhibited the expression of melanogenesis-related proteins, tyrosinase, tyrosinase-related protein (TRP-1) and dapachrometa utomerase (Dct, TRP-2). Moreover VU extract and fractions stimulated procollagen production and inhibited MMP-1 production in human fibroblast. And it decreased degree of wrinkle formation in hairless mouse skin that induced by DVB irradiation for 9 weeks. From the above results, it is possible that Vaccinium uliginosum L. may be developed to be the health functional food and functional cosmetics that have anti-melanogenesis and anti-wrinkle effect.
천연물로부터 미백활성 성분의 개발을 위하여 국내 자생식물 60종으로부터 추출물을 얻어, 이들의 멜라닌 생성과정의 주된 효소인 tyrosinase 활성 억제력을 평가하였다. 평가결과 노랑하늘타리(열매), 죽황, 누리장나무(잎), 우산고로쇠(잎) 추출물이 비교적 높은 tyrosinase 활성억제효과를 보였고, 이들의 $IC_{50}$ 값은 $50{\sim}100{\mu}g/mL$ 이었다. 이들의 멜라닌생성 억제효과를 B16F10 흑색종세포주를 이용하여 실험한 결과, 죽황추출물이 가장 높은 52%의 멜라닌생성 저해활성을 보였으며, 이는 기존 미백제인 arbutin (42%)에 비해 10% 높은 것이다. 죽황추출물로부터 용매추출 및 크로마토그래피 등의 분리과정을 거쳐 10가지 미백활성 성분을 분리하였다. 이들은 모두 페놀유도체 화합물로서, SM701과 SM702, SM703, BPR211은 hydroquinone계 화합물이며, SM707은 gallic acid계, SM704와 SM705, SM706, SM708, SM709는 ferulic acid계로 확인되었다. 이들의 유리기 소거효과를 hydorquinone과 비타민 C와 비교하여 측정하였을 때. $SC_{50}$ 값이 SM702와 SM709의 경우 $60{\sim}70{\mu}M$로 hydroquinone과 유사하였고, SM701과 SM708은 $30{\sim}40{\mu}M$로 비타민 C ($45{\mu}M$)보다 낮은 값을 보여 죽황추출물은 항산화활성이 높은 성분들을 함유하고 있음을 확인하였다. 이들 중 1,2-O-diferulylglycerol로 확인된 SM709 성분은 tyrosine hydroxylase 및 DOPA oxidase 활성을 각각 18, 60% 억제하였고, B16F10 흑색종세포주를 이용한 멜라닌생성량 억제시험에서 62%의 저해효과를 나타내 가장 높은 미백활성을 보였다. 따라서 죽황추출물의 미백활성은 주로 멜라닌 생성과정의 DOPA oxidsae 저해효과와 항산화효과에 의해 나타나는 것으로 생각된다.
본 연구에서는 쥐참외뿌리 추출물의 항산화 활성 및 미백, 항염증 활성에 대한 생리활성 효과와 기능성 소재로써의 활용 가능성을 확인해 보고자 하였다. 쥐참외뿌리 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 통한 항산화 활성, 멜라닌 세포인 B16F10 melanoma 세포에 대한 멜라닌 생성 억제능을 통한 미백 활성 효과, 대식 세포인 RAW 264.7 세포에 대한 NO 생성 억제능을 통한 항염증 활성 효과를 확인해 보고자 하였다. 연구결과, 쥐참외뿌리 추출물은 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거활성이 확인되었으며, 양성 대조군인 Ascorbic acid와 비슷한 DPPH 라디컬 소거활성이 확인되었다. 100 nM 𝛼-MSH로 유도된 멜라닌 생성 억제 활성과 LPS 1 ㎍/mL로 유도된 NO 생성 억제능을 유의하게 억제 하는 것을 확인되었다. 이에 따라 쥐참외뿌리 추출물은 항산화 및 미백, 항염증 효과를 가진 기능성 소재로써의 활용 가능성이 있음이 사료되어 진다.
Jo, Ha Neul;Kim, Hyun Woo;So, Yangkang;Yoo, Byoung Wan;Kim, Ji Hyo;Lee, Tae Bum
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2018년도 추계학술대회
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pp.91-91
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2018
The Rosa multiflora, a well-known plant belonging to Rosacea, is widely used in orthodox medicine in worldwide. However, its biological activity as a functional ingredient for cosmetic products have not yet been studied. Accordingly, an investigation of the above mentioned atrributes was performed on a 50% ethanol extract of Rosa multiflora. The antioxidant activities were determined by DPPH. Additionally, the contents of total phenols and flavonoids were analyzed. Also, the phenolic compounds were detected using HPLC. The melanogenesis regulatory effect was evaluated using melanin content and cellular tyrosinase activity in B16F10 melanoma cells. The elastase inhibitory activity assay was performed for anti-wrinkle effect. The antimicrobial activity was assessed using the disc diffusion assay. The DPPH radical scavenging ability, denoted by the $SC_{50}$ value was found to be $123.1{\mu}g/ml$, whereas that of positive control (ascorbic acid) was $27.5{\mu}g/mL$. The content of total polyphenol and flavonoid content were 202 mg/g and 86.77 mg/g, respectively. In addition, astragalin and gallic acid were identified in the extract. Also, the ethanol extract significantly inhibited ${\alpha}$-MSH-induced melanogenesis in B16F10 cells. For anti-wrinkle effect, elastase inhibition activity of the ethanol extract was 53.2% at a concentration of $100{\mu}g/ml$. The antimicrobial activity of the extract against S. aureus and E. coli was observed to be 0.5 - 5%, and no significant activity was noted against C. albicans. Therefore, the ethanol extract of Rosa multiflora can be used effectively for development of functional cosmetic materials.
본 연구는 윈터체리 추출물의 미백 활성을 검증하여 기능성 미백 소재로서의 가능성을 확인하였다. 먼저, DPPH, ABTS, FRAP를 이용한 항산화 활성 검증에서 윈터체리 추출물은 매우 높은 항산화 효과를 보였으며, 티로시나아 제의 활성에도 농도 의존적인 억제 효과를 보여주었다. 마우스 유래 B16-F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 생성에서 윈터체리 추출물이 미치는 영향을 확인한 결과, 세포 내에서 생합성 되는 멜라닌의 양이 상당히 감소하고 있음을 확인하였다. 또한, 멜라닌 생성을 더욱 유도하는 ${\alpha}-MSH$를 세포에 처리하였을 때, 윈터체리 추출물은 농도 의존적인 억제 효능을 보여주었다. 이러한 윈터체리 추출물의 멜라닌 생성 억제는 MITF 전사인자의 발현을 억제함으로써 일어나고, 결과적으로 멜라닌 생합성과 관련된 티로시나아제와 Tyrp-1 등의 단백질 발현을 감소시킴으로써 일어나게 됨을 확인하였다. 이러한 결과들로 볼 때, 윈터체리 추출물은 기존의 미백 원료들을 대체할 수 있을 뿐만 아니라 함께 사용할 경우 상승 효과를 낼 수 있는 새로운 미백 소재로 활용될 수 있을 것이다.
본 연구는 제주도 근해에 자생하는 참가죽그물바탕말 (Dictyota coriacea)의 에탄올 추출물 및 순차적 용매분획물을 얻어 B16F10 mouse melanoma 세포및 RAW 264.7 세포에 처리하여 멜라닌 생합성 및 tyrosinas 억제활성, NO 억제활성을 통하여 유용자원으로서 미백 및 기능성 화장료로 산업적 활용 가능성이 있는지 알아보고자 연구를 시행하였다. 실험한 결과 B16F10 세포에서 참가죽그물바탕말 에탄올 추출물과 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물이 tyrosinase와 멜라닌 합성을 농도 의존적으로 뛰어나게 억제하였으며, 단백질 및 mRNA 발현양이 tyrosinase와 TRP-1 유전자에서 농도 의존적으로 감소함을 보였다. 하지만 TRP-2 단백질과 mRNA 유전자의 발현을 확인한 결과, TRP-2 단백질과 mRNA 발현이 농도에 관계없이 일정하였다. 또한 LPS로 자극한 RAW 264.7 세포에서 참가죽그물바탕말의 에탄을 추출물과 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물이 가장 높은 NO 생성 억제 활성을 보였다. 따라서 본 연구결과는 참가죽그물바탕말 추출물이 항염증 활성을 가지는 미백 관련 기능성 소재로서의 활용가치가 있음을 보여준다.
To investigate anti-cancer effects of wild ginseng herbal acupuncture and mitigation of anti-cancer drug when taken concurrently, cancer cells from B16/F10 melanoma were injected intraperitoneally in C57BL/6. After inducing cancer, anti-cancer effects and mitigation of reproductive toxicity of Doxorubicin were evaluated. 1. For changes in weight, Doxorubicin treated group showed significant decrease, and administration of wild ginseng herbal acupuncture didn't cause any weight change. 2. Volume of tumor was significantly reduced in Doxorubicin teated group. Wild ginseng herbal acupuncture groups showed slight decrease but insignificant compared to the control group. 3. For hematological evaluation, Doxorubicin only group's reticulocytes were significantly decreased compared to the control group, and Platelet Count was significantly increased. Wild ginseng herbal acupuncture group showed significant increase of Neutrophils and significant decrease of Lymphocytes compared to the control group. 4. For histological evaluation of the tumor, necrosis occurred in a wide range in the Doxorubicin treated group. Wild ginseng herbal acupuncture didn't cause much histological changes. 5. For histological evaluation of the testis, seminiferous tubules of the control group suffered severe damage on epithelial cells. When wild ginseng herbal acupuncture was administered concurrently, damage on the seminiferous tubules was significantly inhibited compared to the Doxorubicin only group. 6. Diameter of seminiferous tubules and spermatogonia count were insignificant between the experiment groups. 7. For BrdU positive reaction of testicle tissue, Doxorubicin only group failed to show any reaction of spermatogonia, but spermatocytes and spermatids showed slight positive reaction. When wild ginseng herbal acupuncture was treated concurrently, much greater positive reaction was made but similar to that of the control and normal groups. 8. For observation of changes in BrdU spermatogonia count of the testicle tissue, Doxorubicin only group didn't show any positive reaction, and relative increase was shown in the group with concurrent administration of wild ginseng herbal acupuncture. 9. For observation of TUNEL positive reaction cells of the testicle tissue, no significant changes were witnessed in all the experiment groups.
In this study were evaluated the whitening and anti-oxidative activities from the extracts of Sorbus alnifolia branches, and identified the chemical structures of the active ingredients. In the whitening tests using α-MSH stimulated B16F10 melanoma cells, the 70% ethanol extract and n-butanol (n-BuOH) fractions concentration-dependently inhibited cellular melanogenesis and intracellular tyrosinase activities without causing cell toxicity. The total polyphenol content of n-BuOH and ethyl acetate (EtOAc) fractions were measured to be respectively 241.1 ± 1.1 and 222.9 ± 2.4 (mg/g GAE), and the total flavonoid content of EtOAc fraction was 75.3 ± 2.0 (mg/g QE). Upon anti-oxidant studies with DPPH and ABTS+ radicals, potent radical scavenging activities were observed in the EtOAc and n-BuOH fractions. Moreover, in the study of cell protection efficacy using HaCaT keratinocytes damaged by H2O2, the EtOAc and n-BuOH fractions showed a very positive results on prevention of oxidative stress. Phytochemical studies for this extract resulted in the isolation of four compounds; 2-oxopomolic acid (1), euscaphic acid (2), epi-catechin (3), prunasin (4). These results suggested that the extract of S. alnifolia branches containing compounds 1-4 as natural ingredients could be used as whitening and anti-oxidant ingredients in cosmetic formulations.
본 연구는 화장품 소재로서 인삼복합물의 가능성을 확인하기 위한 것이다. 이를 위해 우리는 인삼복합물 에탄올 추출물을 사용하여 항염증, 미백 효과에 대한 생물학적 활성 평가를 수행하였다. 시료는 인삼(A), 상황(B), 리기다소나무(C)를 각 70% 에탄올로 추출한 후 (A)1 : (B)1 : (C)0.5의 비율로 혼합한 시료를 사용하였다. 대식세포(RAW 264.7 cells)내에서 시료의 항염증 효과를 평가하기 위해 MTT assay를 이용한 샘플의 독성평가와 nitric oxide 생성 저해 활성 및 염증관련 단백질 및 유전자의 발현량을 확인하였다. 시료의 미백 효과를 평가하기 위해서 멜라노마(B16F10 cell)를 이용해 MTT assay를 통한 샘플의 독성평가, cellular tyrosinase 저해율 측정 및 멜라닌 생합성량을 측정하였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포내에서 시료의 nitric oxide 저해 활성 결과는 $25{\mu}g/mL$ 농도에서 71.2%의 우수한 효능을 나타내었으며 western blot 실험결과 iNOS, COX-2 단백질의 발현은 농도 의존적으로 감소하는 것을 확인하였다. Tyrosinase 활성 억제 실험에서 인삼복합물의 농도 $50{\mu}g/mL$에서 36.8%의 감소를 나타냈으며 멜라닌 생합성 억제 평가 결과에서 농도 $50{\mu}g/mL$에서 47.8%의 감소를 나타냈다. 상기 실험 결과로부터 인삼복합물의 우수한 항염증, 미백 효능을 확인하였으며 향후 안전한 천연 화장품 원료로 사용될 수 있음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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