Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.17
no.3
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pp.239-248
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1997
This study was conducted to investigate the effects of antagonistic microorganisms, Bacillus spp., on growth of alfalfa(Medicag0 sativa L.) in repeated cultivation soil(RCS) and unrepeated cultivation soil(URCS). Alfalfa was established by seeding into pots 12 cm in diameter and 9 cm in depth containing 1 : 1 mixture of soil and vermiculite with antagonistic bacteria and pathogenic fungi. The growth experiment of alfalfa was conducted in pots in a vinyl house. The bacteria used in this study were Bacillus subtilis and hsants. B. subtilis was isolated and identified 60m forage rhizosphere soil and hsants isolated through cell fusion fiom B. subtilis 101 and B. thuringiensis. B. subtilis was named B. subtilis 101 and hsants named F -3 and F -8. From dark culture experimenf alfalfa was longer lived in treated soil with antagonistic bacteria than that in non-treated soil, and longer lived in URCS than that in RCS. However, alfalfa was shorter lived in RCS and URCS than that in autoclaved RCS. The number of leaves of alfalfa were positively affected by the inoculation of the antagonistic bacteria in both RCS and URCS. Dry weight of shoot and root was increased by the inoculation of the antagonistic bacteria(P< 0.05). However, the growth of alfalfa was decreased by the inoculation of the pathogenic hngi both RCS apd URCS.
Park Hyung-Soon;Chung Hun-Gwan;Cho Yoon-Jin;Kim Sea-Hyun;Kim, Hyeong-Hwan;Kim Ji-Soo
The Korean Journal of Soil Zoology
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v.9
no.1_2
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pp.1-5
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2004
Insect pests and their natural enemies of Hibiscus Linne (Malvaceae) were investigated from March 2002 to November 2004. Fourteen insect pest species of 9 families in 5 orders were collected from Hibiscus syriacus: 5 species in Homoptera, 3 species in Lepidoptera, 2 species in Coleoptera, 1 species in Orthoprera, 1species in Hemiptera, 1 spedies in Acarina, and 1 species in Stylommatophora. Especially, Aphis gossypii Glover (Aphididae), Anomis megogona Walker(Noctuidae) and Tetranychus urticae Koch (Tetranychidae) were very important species because of their increasing daminge. The highest donsities were observed from May to June in August in Tetranychus urticae. As the enemies and ento-mopathogens of insect pests on Hibiscus syriacus, 1 species of bacteria, 3 species of fungi, 1 species of fungi, 1 species of Hemiptera, 1 species of Coleoptera, 2 species of Hymenopetera, 2 species of Diptera, and 1 species of Acarina were investigated. As the predators and parasitoids of Aphis gossypii, Aphidoletes aphidoletes aphidimyza Rondani (Cecidomyiidae), Meliscaeva cinctella Zetterstedt (Syrphidae), Harmonia axyridis Pallas (Coccinellidae), and Aphidius gifuensis Ashmead (Braconidae), entomopathogenic fungi, Vericillium lecani naturalis strain (Moniliaceae) and Beauveria bassiana naturalis strain strain (Hypocreaceae) were observed and Bacillus thuringiensis naturalis strain (Bacillaceae), B. bassiana, Metarhizium anisopliae naturalis strain (Hypocreaceae), predators of Tetranychus urticae, Amblyseius sp. (Phytoseiidae), and Orius sp. (Anthocoridae) were observed.
These studies were carried out to identify Bacillus cereus group 1..5-] strain isolated from 5uyeong Bay. This strain was differentiated from B. cereus group using conventional, API system and fatty acid composition analysis. Colony characteristics were opague. mucoid, entire margin. convex. circular and non hemolysis on sheep blood agar plates, and were observed with central spore forming positive bacilli in a Gram stained preparation. and had no motility. The carbohydrates tested; glucose.maltose, and sucrose were assimilated but neither trehalose nor salicin were assimilated. This strain ultilized gelatin and was also inhibited by 6.5% NaCI. The results of biochemical examination were differented from B. cereus group LS-1 compared with others B. cereus group. The fatty acid composition contained major amounts of branched chain acids. iso $C_{15}$ and iso $C_{13}$ and the range of chain length was $C_{12}$ to C"$C_{17}$ and n$C_{15}$, acid was not detected. Automated fatty acid computer profile indicated "B. mycoides GC subgroup B of 0.312 similarity index." The results agreed with other research cases. On the other hand. A TB computer prolile index of API system (API 50 CHB & API 20E) identified" Doubtful profile of 99.7% B. firmus" . These results were presented with considerable discrepancies between API system and fatty acid analysis. With 67 biochemical characters. the similarity matrix of B. mycaides (KCTC 1033). B. thuringiensis (KCTC 1033). B. cereus (5-3) and B. mycoides (S-12) showed 42%. 42%. 59%, and 52%. respectively. Through the key tests and fatty acid analyses. we could notice the appearance of B. mycoides of the B. cereus group and this leads us to suspect the existence of a new biotype B. mycoides.
The production of enzymes that help digestion, assimilation of essential nutrients, and prevent pathogenic bacteria are important for probiotics used in aquaculture. The objective of this study was to investigate enzyme activities for macromolecular organic matters and antimicrobial properties of the selected potential probiotics isolated from gut of surf clam (Tresus keenae) against well-known shellfish-pathogenic bacteria. Among 65 isolates from guts of 60 surf clams, seven Bacillus strains with outstanding degradation capability of macromolecule organic matter were selected as potential probiotics as follows: TKI01 (B. vietnamensis), TKI02, TKI26 (B. thuringiensis), TKI14, TKI32, TKI42 (B. amyloliquefaciens), and TKI18 (B. stratosphericus). After in vitro antimicrobial activity test was performed against five shellfish-pathogenic bacteria including Listonella anguillarum, Vibrio parahaemolyticus, V. splendidus, V. harveyi, V. tubiashii, PCR assay was performed to detect bacteriocin-producing strain. PCR results revealed that the five Bacillus strains possessed diverse bacteriocin genes including ericinA, coagulin, surfactin, iturin, bacyllomicin, fengycin, bacylisin, subtilin, and lantibiotics. In the present study, the selected seven Bacillus strains showed different enzyme activities according to types of macromolecule organic matters. And their antimicrobial activities varied based on the species of pathogenic bacteria. In addition, at least five Bacillus strains had genetic potential to produce several natural lipopeptide antibiotics that may help biological control of surf clam aquaculture. Therefore, mixed use of probiotics might show co-operative effect and increase the efficiency of probiotics rather than separate use. To the best of our knowledge, it is the first report on antimicrobial properties of Bacillus species isolated from surf clam.
The expression in Escherichia coli of a cloned insecticidal protein (ICP) gene from Bacillus thuringiensis var. kurstaki HD1 in pHLN1-80 (+) and pHLN2-80(-) plasmids was investigated through deletions in promoters, transcription start point, and termination region. Six recombinant plasmids were constructed in an attempt to analyze the overexpression of the ICP in relations to its gene structure. The amounts of ICP produced from the recombinants were measured by SDS-PAGE and confirmed by Western blot analysis. One clone was not overexpressed which having only -80 bp (contained BtI promoter) part of the ICP gene promoter (without Plac promoter), the right-oriented ICP gene and the termination region. Removal of 350 bp from upstream region of the Plac of the clone pHLN2-80 (-) resulted in overexpression of the ICP. One clone was not overexpressed in which the clone consisted of -72 bp part of the ICP promoter without the transcription start point and the transcriptional termination region, and having the right-oriented ICP gene sequence. One clone consisting of the inverted ICP gene sequence, the -72 bp ICP gene promoter, and without the termination region caused overexpression. One clone which consisted of the inverted ICP gene, the -72 bp ICP gene promoter and the termination sequence was overexpressed. These results indicated that the Plac promoter, transcription termination region, the inverted ICP gene insertion, and the -80 bp or -72 bp part of the ICP gene promoters were concerned in the overexpression of the ICP gene in the recombinant plasmid, and also the overexpression mechanism might result from the disruption of the transcription-suppressing regions in the promoter regions.
Kim, Won-Yong;Song, Tae-Wook;Song, Mi-Ok;Nam, Ji-Yeon;Park, Chul-Min;Kim, Ki-Jung;Chung, Sang-In;Choi, Chul-Soon
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.35
no.1
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pp.31-40
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2000
Bacillus anthracis, the etiological agent of anthrax has been classified into the Bacillus subgroup I with B. cereus, B. mycoides and B. thuringiensis based on morphological and DNA similarity. DNA studies have further indicated that these species have very AT-rich genomes and high homology, indeed it has been proposed that these four sub-species be recognized as members of the one species. Several methods have been developed to obtain good differentiation between these species. However, none of these methods provides the means for an absolutely correct differntiation. The analysis of fatty acid methyl esters (FAMEs) was employed as a quick, simple and reliable method for the identification of 21 B. anthracis strains and closley related strains. The most significant differences were found between B. anthracis and B. anthracis closely related strains in FAMEs profiles. All tested strains of B. anthracis had a branched fatty acid C17:1 Anteiso A, whereas the fraction of unsaturated fatty acid Iso C17:1 w10c was found in B. anthracis closely related strains. By UPGMA clustering analysis of FAMEs profiles, all of the tested strains were classified into two clusters defined at Euclidian distance value of 24.5. The tested strains of B. anthracis were clustered together including Bacillus sp. Kyungjoo 3. However, the isolates of B. anthracis closely related spp. Rho, S10A, 11R1, CAU9910, CAU9911, CAU9912 and CAU9913 were clustered with the other group. On the basis of these results, isolates of B. anthracis Bongchon, Kyungjoo 1, 2 and Bacillus sp. Kyungjoo 3 were reclassified as a B. anthracis. It is concluded that FAMEs analysis provides a sensitive and reliable method for the identification of B. anthracis from closely related taxa.
Plasmid-cured derivative strains of Bacillus anthracis are frequently used in laboratory studies. Plasmid incompatibility, which does not increase the risk of chromosomal mutation, is a useful method for plasmid curing. However, in bacteria containing multiple plasmids, it often requires the sequential introduction of multiple, specific incompatibility plasmids. This lengthy process renders the traditional plasmid incompatibility method inefficient and mutation-prone. In this study, we successfully cured plasmids pXO1 and pXO2 from B. anthracis A16 simultaneously using only one recombinant incompatible plasmid, pKORT, to obtain a plasmid-free strain, designated A16DD. This method may also be useful for the simultaneous, one-step curing of multiple plasmids from other bacteria, including Bacillus thuringiensis and Yersinia pestis.
Seo, Young-Ho;Cho, Byoung-Ouk;Choi, Jun-Keun;Kang, An-Seok;Jeong, Byung-Chan
Korean Journal of Organic Agriculture
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v.17
no.2
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pp.253-264
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2009
This study was conducted to establish agricultural practices to control diseases and insects for chemical pesticide-free cultivation of leafy vegetables. Two diseases, gray mold(Botrytis cinerea) and soft rot(Erwinia carotovora), on lettuce were reduced by controlling temperature and humidity using air-circulation fan. The aphidophagous lady beetle(Harmonia axyridis) and primary parasitoids(Aphidius colemani) showed activity to control aphids density on Chinese cabbage. Co-application of cooking oil and yolk mixture (COY) and BT(Bacillus thuringiensis) decreased diseases including soft rot(Erwinia carotovora), downy mildew(Peronospora brassicae Gaumann), and powdery mildew(Eryslphe polygoni), and insects such as diamondback moth(Plutella xylostella) and beet armyworm(Spodoptera exigua Hubner). Neem extract treatment reduced downy mildew(Peronospora destructor) on Welsh onion.
Balavenkatasubbaiah M.;Nataraju B.;Sharma S.D.;Selvakumar T.;Chandrasekharan K.;Rao P. Sudhakara
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.12
no.1
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pp.7-14
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2006
Silkworm diseases are better prevented than cured. Disinfection and hygiene are the two important aspects in silkworm rearing to prevent the diseases. Suitable disinfectant is the primary need to disinfect the rearing house, its surroundings and appliances to eliminate the persistent pathogens from the rearing environment. In this direction, Serichlor, a new disinfectant in Indian Sericulture marketed as Serichlor-60 (contains 60,000 ppm of chlorine dioxide) and Serichlor-20 (contains 20,000 ppm of chlorine dioxide) has been evaluated for its germicidal effect against the pathogens of silkworm, viz., spores of Nosema bombycis, Bacillus thuringiensis, polyhedra of BmNPV and conidia of Beauveria bassiana both in vitro and in vivo. Results indicated that high concentration (2,500 ppm of chlorine dioxide) is required to kill all the pathogens at 100% level. The efficacy of the Serichlor was greatly enhanced by the addition of 0.5% slaked lime solution. 500 ppm of chlorine dioxide in 0.5% slaked lime solution was found effective against all the pathogens tested. This concentration of disinfectant was also found effective for disinfection of rearing house, rearing appliances and silkworm egg surface. The disinfectant is stable, non hazardous, least corrosive and most suitable for Indian Sericulture.
Polyhydroxyalkanoate (PHA) synthase is a key enzyme for PHA production in microorganisms. The class IV PHA synthase is composed of two subunits: PhaC and PhaR. The PhaR subunit, which encodes the phaR gene, is only present in class IV PHA synthases. Therefore, the phaR gene is used as a biomarker for bacteria that contain a class IV PHA synthase, such as some Bacillus spp. The phaR gene was developed to screen phaR-containing Bacillus spp. The phaR screening method involved two steps: phaR gene amplification by PCR and phaR amplicon detection using a DNA lateral flow assay. The screening method has a high specificity for phaR-containing Bacillus spp. The lowest amount of genomic DNA of B. thuringiensis ATCC 10792 that the phaR screening method could detect was 10 pg. This novel screening method improves the specificity and sensitivity of phaR gene screening and reduces the time and cost of the screening process, which could enhance the opportunity to discover good candidate PHA producers. Nevertheless, the screening method can certainly be used as a tool to screen phaR-containing Bacillus spp. from environmental samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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