• 한국잠사곤충학회지
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• 제34권1호
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• pp.41-48
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• 1992

해충의 미생물적 방제를 위하여 Bacillus thuringiensis 살충제(BT제) 개발에 관한 기초자료를 얻고자 3균주의 공시균주인 B. thuringiensis var. kurstaki, B. thuringiensis var. dendrolimus, B. thuringiensis var. aizawai와 3종의 공시충으로 누에, 흰불나방, 배추흰나비의 유충을 이용하고 B. thuringiensis 내독소단백질을 alkalidyddor 또는 공시된 3종의 곤충소화액으로 처리하여 전기영동을 비교하여 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. 3균주의 B. thuringiensis에서 생산된 내독소단백질은 alkali 또는 곤충의 소화액 처리에 따라서 변화되는 뚜렷한 차이가 없는 것으로 나타났다. 2. 각 균주의 내독소단백질의 분자량은 B. thuringiensis var. aizawai가 130kDa, B. thuringiensis var. kurstaki가 140kDa, 130kDa, 그리고 B. thuringiensis var. dendrolimus가 140kDa의 부분에 2band로 나타났으며, 이들 내독소단백질은 alkali 용액이나 숙주곤충의 소화액으로 처리시 활성화되어 40-65kDa의 저분자 단백질로 전환되었다. 또한 숙주곤충소화액에 따라 내독소단백질의 활성화 속도에 약간의 차이가 있는 것으로 확인되었다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제35권1호
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• pp.85-90
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• 1996

국내에서 분리된 Bacillus thuringiensis NT0423은 나비목과 파리목 곤충에 독성을 보이는 130 kDa의 전형적인 다이아몬드형 내독소 단백질을 생성한다. 이 균주의 파리목에 대한 독성을 강화하기 위하여, B. thuringeinsis NT0423에 모기 유충에 강한 독성을 보이는 B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14의 cryVID유전자를 가지고 있는 pCG10 플라스미드를 electroporation 방법을 이용하여 형질전환하였다. 형질전환체인 B. thuringiensis PT1227내에서 cryIVD와 숙주가 생성하는 원래의 다이아몬드형 130kDa 내독소 단백질 유전자는 그 자신의 형태로 잘 발현되었다. 형질전환체의 모기 유충에 대한 독성은 원래 숙주의 내 독소 단백질과ㅏ 도입된 CryIVD의 상승효과에 의해 현저히 증가하였다.

• 미생물학회지
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• 제44권4호
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• pp.333-338
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• 2008

Bacillus anthracis, B. cereus, B. thuringiensis 를 분류하기 위해 rpoB 유전자 배열을 이용한 컴퓨터 분석 작업을 수행하였다. 17개의 B. anthracis, 9개의 B. cereus, 7개의 B. thuringiensis 를 database에서 구하였다. B. anthracis 는 rpoB 유전자의 in silico 제한효소 절단에 의해, B. cereus, B. thuringiensis 2 group과 구별되었다. 그러나 B. cereus와 B. thuringiensis 는 제한효소 절단에 의해 구분되지는 않고, 염기배열과 Blast 탐색의 도움으로 구분이 가능하였다. 본 연구를 통해 3 종류의 Bacillus 종을 동정할 수 있는 알고리즘이 개발되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.772-776
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• 2004

Physiological and molecular characteristics of Bacillus thuringiensis SR6 and SR8 were investigated, and phase contrast and electron microscopies revealed that a large rhomboidal crystal protein was present in the sporulating cells. SDS-PAGE and Western blot analyses showed that B. thuringiensis SR8 produced 70 kDa protein much more than other proteins, and that the 70 kDa protein could bind to the antibody of B. thuringiensis subsp. tenebrionis-crystal toxin protein, indicating that the crystal 70 kDa protein has an immunological homology with B. thuringiensis subsp. tenebrionis-crystal toxin protein. The DNA fragment of B. thuringiensis subsp. tenebrionis-toxin gene was detected in B. thuringiensis SR6 and SR8 by using PCR amplification analysis. Furthermore, the insect bioassay showed the insecticidal activity against Colorado potato beetle larvae. Based on the physiological and molecular similarities to B. thuringiensis subsp. tenebrionis, it is suggested that the B. thuringiensis SR6 and SR8 may be mutants of the B. thuringiensis subsp. tenebrionis strain overexpressing the crystal of 70 kDa toxin protein.

• 한국응용곤충학회지
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• 제34권3호
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• pp.243-248
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• 1995

효과적인 미생물 제제로 사용할 수 있는 Bacillus thuringiensis 균주들을 분리하기 위하여 경기도 일원의 72군데의 저곡창고에서 먼지를 채취하여 B. thuringiensis의 분포와 독성을 조사하였다. 총 411개의 채취된 저곡창고의 먼지에서 포자와 내독소 단백질을 생산하는 146개에 이르는 많은 수의 B. thuringiensis가 분리되었다. 저곡창고에서 분리된 146개 Bt의 독성 분포는 나비목의 누에 (Bombyx mori)유충에 독성을 띠는 균주가 84%로 가장 많이 분리되었고, 파리목의 빨간 집모기(Culex pipiens)유충에는 3%, 나비목과 파리목에 동시에 독성을 띠는 균주는 1%였다. 그러나 딱정벌레목의 쌀바구미(Sitophitus oryzae)에 독성을 띠는 균주는 분리되지 않았으며, 내독소 단백질은 형성하지만 독성을 띠지 않는 B. thuringiensis가 12%의 비율로 분리되어 흔히 존재함을 알 수 있었다. 이상의 결과로서 저곡창고는 B. thuringiensis의 유리한 분리장소임을 알 수 있었다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제37권2호
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• pp.176-180
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• 1995

나비목과 파리목 곤충에 독성을 보이는 B. thuringiensis NT0423을 수용체로 하여 형질전환된 B. thuringiensis PT0529에서 원래 수용체가 생성하는 내독소 단백질과 도입된 CryIVD 및 CytA 단백질들간의 발현 특성을 분석하기 위하여, B. thuringiensis PT0529에서 내독소 단백질들간의 발현을 성장 과정에 따라 투과 전자 현미경 관찰 및 단백질 전기영동으로 분석하였다. 그 결과, B. thuringiensis PT0529에서 내독소 단백질의 발현은 원래의 수용체 내독소 단백질보다 도입된 CryIVD와 CytA가 먼저 합성되었으며, 그 발현량에 있어서도 높게 나타났다. 또한, B. thuringiensis PT0529에서 세가지 내독소 단백질은 그들 자신의 고유 형태로 잘 발현되었으나, 수용체인 B. thuringiensis NT0423의 내독소 단백질은 그 크기에 있어서 다소 작게 관찰되었다. 따라서 형질전환체 내에서 도입된 내독소 단백질 유전자의 발현은 수용체의 내독소 단백질 유전자 발현에 영향을 받지 않는 반면 외부 유전자의 도입으로 인하여 수용체가 생성하는 내독소 단백질은 그 발현에 있어서 간섭을 받는 것으로 나타났다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제33권2호
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• pp.75-81
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• 1991

해충의 미생물적 방제를 위하여 Bacillus thuringiensis 살충제 개발에 관한 기초자료를 얻고자 3종의 B. thuringiensis var. Kurstaki, dendrolimus, aizawai와 2종의 공시충으로 누에와 흰불나방에 대한 독성을 검정하여 아래와 같은 연구결과를 얻었다. 1. B. thuringiensis의 누에에 대한 독성검정에서는 kurstaki를 제외하고 3령에 비해 4령의 경우 LD50이 5배의 증가량을 보였고, 변종간 독성의 세기는 dendrolimus, kurstaki, aizawai 순이었다. 2. Bacillus thuringiensis의 흰불나방에 대한 독성검정에서는 kurstaki를 제외하고 4령에 비해 6령의 경우 LD50이 3배의 증가량을 보였고, 변종간 독성의 세기는 dendrolimus, kurstaki, aizawai 순이었다. 3. 령기에 관계없이 사망시간이 큰 차이를 나타내지 않았는데 그 이유는 충체가 증가됨에 따라 단위시간당 섭식량도 증가하므로 치사에 필요한 철대량을 섭식한 것으로 추정된다. 4. B. thuringiensis 변종 중에서 kutstaki는 독성의 세기가 령기에 관계없이 가장 안정된 것으로 나타났다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제2권2호
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• pp.185-189
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• 2001

Wild type Bacilus thuringiensis subsp. israelensis and B. sphaericus toxins have been used separately as active in ingredients for bacterial insecticides to control mosquito larvae due to their comparable toxicity to chemical insecticides. Cry11B, recently cloned from B. thuringiensis subsp. jegathesan, shows higher toxicity against three major species of mosquito larvae than Cry11A, one of the major component of B. thuringiensis subsp. israelensis inclusion body. To determine whether the combination of cry11B and B. sphaericus binary toxins is as toxic as B. thuringiensis subsp. israelensis parental strain, cry11B and B. sphaericus binary toxins genes were co-expressed as an operon using cytlA promoters/STAB-SD hybrid expression system in B. thuringiensis subsp. israelensis acrystalliferous strain 4Q7. However, unexpectedly, B. sphaericus binary toxins were barely produced, whereas relatively large amount of Cry11B was produced. When this strain was grown in four different media, NB+G and Peptonized Milk produced more toxin proteins and spores per unit of media than GYS and G-Tris. Toxicity of this strain against fourth instar Culex quinquefasciatus was ranged from of 8.3 to 45.7 ng/ml, with NB+G culture being the highest, and GYS culture was the lowest.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권1호
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• pp.110-117
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• 1995

This study was carried out to immunologically characterize Bacillus thuringiensis (B.t) antigens. Protein patterns of ultrasonicated- antigens of B. thuringiensis subspecies using SDS- PAGE revealed marked similarities among all the strains analyzed except for the difference between quantative variations of bands and some protein antigens. The comparison of the protein patterns showed that the protein antigen of 45 kilodalton (kd) was common in 11 strains and that the difference between B. thuringiensis subsp. canadensis and galleriae was noticed in quantative variations of bands despite of ambiguous serogrouping, suggesting a useful method for identification. All strains examined showed similar antigenic patterns in SDS-PAGE, while immunodominant bands differed in antigenic reactivity in western blot using polyclonal antibodies. Polyclonal antibody to B. thuringiensis subsp. thuringiensis and israelensis in indirect immunofluorescence assay reacted with flagella and cell surface antigens. The present study indicates that SDS-PAGE and western blot analysis may be used as tools for differentiation and identification of B. thuringiensis subspecies.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권5호
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• pp.393-398
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• 1993

One strain of mosquitocidal Bacillus thuringiensis, H9B, was isolated from soil. The biochemical characteristics and flagella antigenicity of the strain H9B is similar to that of B. thuringiensis subsp. darmstadiensis. The delta-endotoxin of the strain H9B coincided with that of B. thuringiensis subsp. darmstadiensis strain 73E10-2 on agarose double immunodiffusion test. The delta-endotoxin of B. thuringiensis subsp. israelensis contains hemolysin fragment (28 kb) on SDS-PAGE when the delta-endotoxin was solubilized in alkali, while that of the strain H9B does not contain 28 kb protein.