Kim, Bong-hwan;Tak, Ryun-bin;Cho, Gil-jae;Jang, Hee-kyung
Korean Journal of Veterinary Research
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v.31
no.4
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pp.457-469
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1991
Clinical and bacteriological observations on infectious atrophic rhinitis of swine were conducted in order to obtain some basic information for the clinical and immnnological control of the disease prevailing in the republic. Samples were collected from nasal cavities of 135 4~12 week old pigs from 12 herds and from turbinates of 199 slaughtering pigs from 14 swine herds to investigate the prevalence of Bordetella bronchiseptica and/or Pasteurella multocida in the nasal cavities of the pigs. On the examination of nasal swabs by cultural techniques and of gross lesion of snouts of slaughtering pigs, all the swine herds investigated were found to be affected by atrophic rhinitis and a total of 84 B bronchiseptica and 139 P multocida cultures were isolated from the nasal cavities of the pigs. Of the 199 slaughtering pigs, some 48% revealed gross pathological lesion typical of atrophic rhinitis and the prevalence of B bronchiseptica and P multocida were 27.6% and 46.7%, respectively. Biochemical properties, antimicrobial susceptibilities, serological characteristics and toxigenicity of the isolates of B bronchiseptica and P multocida were investigated.
Bordetella (B.) bronchiseptica, Mycoplasma (M.) cynos, and M. canis are the major bacterial pathogens that cause canine infectious respiratory disease complex (CIRDC). In this study, we developed a triplex real-time polymerase chain reaction (tqPCR) assay for the differential detection of these bacteria in a single reaction. The assay specifically amplified three bacterial genes with a detection limit of below 10 copies/reaction. The assay showed high repeatability and reproducibility, with coefficients of intra- and inter-assay variations of less than 1%. The diagnostic results of the assay using 94 clinical samples from household dogs with CIRDC clinical signs, the prevalence of B. bronchiseptica, M. cynos, and M. canis was 22.3%, 18.1%, and 20.2%, respectively, indicating that the diagnostic sensitivity was comparable to those of previously reported qPCR assays. The dual infection rate of B. bronchiseptica and M. cynos, B. bronchiseptica and M. canis, and M. cynos and M. canis was 5.3%, 7.4%, and 3.1%, respectively. Moreover, the triple infection rate of B. bronchiseptica, M. cynos, and M. canis was 2.1%. These results indicate that coinfections with B. bronchiseptica, M. cynos, and M. canis have frequently occurred in the Korean dog population. The newly developed tqPCR assay in the present study will be a useful tool for etiological and epidemiological studies on these three CIRDC-associated bacterial pathogens. The prevalence and coinfection data revealed through this study will contribute to expanding knowledge on the epidemiology of CIRDC in the recent Korean dog population.
Bordetella (B.) bronchiseptica, Mycoplasma (M.) felis, and Chlamydia (C.) felis are considered as main bacterial pathogens of feline upper respiratory tract disease (URTD). In this study, a new triplex quantitative real-time polymerase chain reaction (tqPCR) assay was developed for the rapid and differential detection of these bacteria in a single reaction. The assay specifically amplified three bacterial genes with the detection limit of below 10 copies/reaction. The assay showed high repeatability and reproducibility, with coefficients of intra-assay and inter-assay variation of less than 1%. Based on the diagnostic results of the assay using 94 clinical samples obtained from cats with URTD signs, prevalence of B. bronchiseptica, M. felis, or C. felis was 10.6%, 36.2%, or 6.4%, respectively, indicating that the diagnostic sensitivity was comparable to those of previously reported monoplex qPCR assays. The dual infection rates for B. bronchiseptica and M. felis or M. felis and C. felis was 2.1% or 3.2%, respectively. These results indicated that M. felis has been widely spread, and its co-infection with B. bronchiseptica or M. felis has been frequently occurred in Korean cat population. The developed tqPCR assay will serve as a promising tool for etiological and epidemiological studies of these three bacterial pathogens and the prevalence data obtained in this study will contribute to expanding knowledge about the epidemiology of feline URTD in Korea.
An attempt was carried out to purify the cell components of Bordetella bronchiseptica by the mild procedures. From the supernatant of sonic treated colls, the K-agglutinogen, hemagglutinogen and skin necrotizing factor were separated by a successive use of DEAE-cellulose column chromatography and ammonium sulfate precipitation. The specific activity of purified K-agglutinogen was demonstrated by a gel-diffusion test and was also found to be free from other biologically active substances of B. bronchiseptica: namely hemagglutinin, skin-necrotizing factor and O-antigen.
During 2 years from Octorber 1992 to April 1994, prevalence of general respiratory diseases and atrophic rhinitis in the pig herds located in the Western Chungnam was investigated, and isolation of B. bronchiseptica was attempted for the pigs manifested with the clinical signs of atrophic rhinitis(AR). The isolates were characterized and identified in aspects of biochemical properties, antigenicity, drug sensitivity and pathogenicity. The results obtained through the experiments are summarized as follows; 1. During 2 years of investigation, the overall prevalence of the general respiratory diseases in the pi8 herds in Western Chungnam was 35.3%, consisting of 35.1% in the pig farms and 38.8% in a slaughter house. The prevalence by age groups accounts for 9.2% in adults, 44.7% in rearings and 25.3% in sucklings. By farm size, The highest prevalence of 56.5% was observed in the smallest farm with 1 to 200 heads. 2. The prevalence of clinical cases of artrophic rhinitis was recorded by 12.7% in the group that is the sows and piglets vaccinated, 28.9% in the group that is the sows only vaccinated and 39.8% in the group of the non-vaccinated groups. In the slaughter house, 53(24.8%) of 214 pigs examined exhibit the AR lesions. 3. A total of 189 strains of B. bronchiseptica were isolated from the pig herds. Isolation rates were 12.6% in the group that is the sows and piglets vaccinated, 34.1% in the group that is the sows only vaccinated and 45.7% in the group of the non-vaccinated groups. Isolation rate in the specimen from the slaughter house was 93( 43.5% ) of 214 pigs examined. Of the AR-non-vaccinated group, the piglets aged bet- ween 61 to 90 days revealed the highest isolation rate of 58.5%. 4. The titers of antibody against B. bronchiseptica were measured by tube agglutination test. The group that is the sow and piglet-vaccinated showed the highest titer of 640-2, 560 in sow and 640longrightarrow5, 120 in piglet. The group that is the sows only-vaccinated revealed 640-2, 560 in sows and 640-1, 280 in piglets. Both of the vaccinated groups showed 100% positive reaction. The group of the non-vaccinated sho-wed relatively lower titer of 0-1, 280 in both of sows and piglets. The positive rate of the sera obtained from the slaughter house was 53.3% with the antibody titer of 0-1, 280. 5. Biochemical and serological properities of 189 isolates were very similar to those of the reference B. bronchiseptical phase I type, indicating that most of isolates are B. bronchiseptica phase I type. 6. In antimicrobial drug susceptibility, 87.3% of 189 isolates was susceptible to chloramphenicol, 79.9%, to amikacin, 64.6%, to cephalothin and less than 35.4% to others. 7. In agar-gel immunodiffusion and SDS-PAGE analysis, the isolates presented the identical antigenicity and protein profiles to the reference standard strains. 8. The whole cells and bacterial filtrates of the isolates were inoculated to guinea pigs and mice. The isolates showed the hish pathogenicity and dermonecrotoxiciy.
Atrophic rhinitis (AR) is the one of important respiratory diseases and causes severe economic losses in pig industry. Severe attempts have been made to reduce the economic losses by preventing the disease. One of the methods is the spraying of antibiotics into nasal cavity of piglets. Recently, the efficacy of the spraying with kanamycin and gentamicin was reduced in the Korean swine industry. Therefore, the preventive methods have been required to be changed based on the antimicrobial susceptibility profiles of causative agents of swine AR. Based on the current situations of this disease, Bordetella (B.) bronchiseptica and Pasteurella (P.) multocida 4D were isolated from pigs with clinical signs of AR. The isolation rates of B. bronchiseptica and P. multocida 4D were 58.5% and 32.9%, respectively. In the antimicrobial susceptibility test, the bacteria were resistant to kanamycin and gentamicin which have been used as the spraying agents, but they were susceptible to amikacin. A new spraying agent was developed using amikacin using ${\beta}$-glucan and yakbaltag as supplementary agents. Field efficacy of the agent was carried out with different schedule. The results from this study suggested that the newly developed spraying agents might be helpful to prevent AR in swine.
This study was carried out to produce IgY against B. bronchiseptica, parvovirus and distemper virus that are major pathogens in alimentary and/or respiratory diseases of dogs. In the comparison of adjuvants, ISA70 was the best in the rapid induction and maintence of antibody titers. Agglutination antibody titers against B. bronchiseptica were 1:1,280 ~ 1:10,240 in sera and 1:160 ~ 1:1,280 in egg yolk. Hemagglutination inhibition(HI) titers against parvovirus in sera and egg yolk were 1:80 ~ 1:320 and 1:64 ~ 1:256, respectively. Virus neutralization titers against canine distemper was 1:8 ~ 1:64 in sera and egg yolk. These results suggested that egg yolk antibody titers could be variable according to a sort of adjuvant and antigens of the pathogens.
Atropic rhinitis (AR) is one of major respiratory diseases in pigs. AR causes a great economic losses and is considered to be a multifactorial disease in which herd management, heredity, and environment. Several vaccines against have been developed commercially and used in pig farms but the efficacy of each vaccine is still questionable. In this study, one of commercial AR vaccines, which contains inactivated Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida type D and their toxoid was evaluated for vaccine efficacy by challenge test. Twenty piglets were divided into four groups as follows; group I was piglets from vaccinated sows (twice before parturition); group II was piglets from vaccinated sows (same as group I) and were vaccinated at 1 day old; group III and IV were piglets without any vaccination. Groups I, II, and III were challenged by intranasal instillation of $5.3{\times}10^7$ CFU of B bronchiseptica twice and $1{\times}10^9$ CFU of P multocida five times. Group IV was control group without any vaccination and any challenge. We compared serological results, recovery rate of P multocida by polymerase chain reaction, clinical signs and pathological findings between vaccinated groups and unvaccinated groups for efficacy of the vaccine, Serological responses against B bronchiseptica and toxigenic P multocida type D were not showed evident discrepancy between vaccinated groups and unvaccinated groups assuming that the antibody responses against the vaccine is very delayed. However, growth rate, clinical signs and snout lesion grading in vaccinated groups showed more favorable than those in unvaccinated group. Therefore, AR vaccination in this study is considered to be effective in the prevention of AR in pigs.
Park, Mi-Young;Jeon, Oh-Sook;Cho, Yun-Kyoung;Choi, Kyung-Mook;Woo, Jong-Tae
Korean Journal of Veterinary Service
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v.32
no.2
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pp.165-169
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2009
Suppuratives bronchopneumonia was found in a 3-month old domestic muskrat (Ondatra zibethicus). Dead muskrat showed hemorrhagic nasal discharge, severe hemorrhage and consolidation were observed in the lungs in necropsy. Histologically, severe polymorphic neutrophils and alveolar macrophages were infiltrated in the bronchus, bronchioles, alveoli. P. multocida and B. bronchiseptica were identified from the lungs, Klebsiella was isolated from the cecum. We demonstrated those organisms by biochemical test and confirmed P. multocida capsular type A by means of polymerase chain reaction (PCR).
For prevention of atrophic rhinitis of swine by Bordetella bronchiseptica and fowl typhoid by Salmonella gallinarum, bacterial strains showing antimicrobial activity against those pathogenic bacteria were isolated from various samples collected at animal farms. Among 372 bacterial isolates strain TK3 showed the highest antibacterial activity against both pathogens, and was identified as Bacillus amyloliquefaciens by 16S rRNA gene sequence analysis. B. amyloliquefaciens TK3 could inhibit growth of both pathogens by secretion of antibacterial compounds such as siderophore, rhamnolipid and antimicrobial peptide. Production radius of siderophore on Chrome azurol S agar plate by strain TK3 was 0.53 cm after 14 days of incubation, and concentration of siderophore in King's B medium was 1.06 mmol/ml. It also secreted 82.4 mg/L of rhamnolipid, and antimicrobial peptide that completely inhibited growth of both pathogens at concentration of $30{\mu}l/ml$ in LB medium.
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