• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제10권3호
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• pp.198-204
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• 2005

Seeds of neem were collected from different parts of India and analyzed for their azadirachtin content by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). In order to assess the effects of genotypic and geographical variation on azadirachtin content in cell cultures, callus development was attempted in the seeds containing high and low concentration of azadirachtin. The concentration of azadirachtin in callus cultures was significantly affected by the explant source. Seed kernels with higher azadirachtin content produced higher azadirachtin content in callus cultures and lower azadirachtin content was seen in callus cultures produced from seed kernels with low azadirachtin content. The protocol for development of elite stock culture of Azadirachta indica was established with the objective of selecting a high azadirachtin-producing cell line. The highest azadirachtin-producing cell line was selected and the effects of different media and illumination conditions on growth and azadirachtin production were studied in shake flask suspension culture. Detailed batch growth kinetics was also established. These studies provided elite starter culture and associated protocols for cultivation of A. indica plant cell culture in the bioreactor.

• 한국동물학회지
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• 제32권4호
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• pp.441-449
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• 1989

Azadirachtin은 Leucophaeq muderae (Fabricius연 하루 활동주기길이를 0.16 $\pm$ 0.03 h 단축시켰으며, 실험동물의 40 %에서 리듬의 Splitting현상이 관찰되었다. 하루에 두개의 활동주기를 보이는 Splitting현상은 서로 180$^{\circ}$를 유지하여 나타났고, 이는 동물의 실험 전의 본래 주기길이가 평균보다 더 긴 주기를 지닌 동물에게 주로 나타났다. 또한 활동주기의 Splitting현상을 보이는 동물의 안구와 뇌신경(optic lobe) 절단수술 후 Splitting이 사라짐으로써 Azadirachtin이 뇌신경에 자극을 주어 Splitting을 야기시켰으며, 한쌍의 optic lobe 중 어느 한쪽만으로도 동물의 활동주기 조절가능성이 있다는 것이 본 실험을 통하여 밝혀졌다. Azadirachtin shortens the period length of the locomotor activity rhythm in the circadian rhythm of Leucophoeo maderae and induces splitting of this rhythm in ho components in about 40% of the animals. The phase relationship between the ho components is 180$^{\circ}$Both shortening of period and splitting are more pronounced in animals processing longer periods before the injection of azadirachtin. Splitting disappears after the surgical transection of optic lobe.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제7권4호
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• pp.185-193
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• 2002

With Increasing awareness towards environment-friendly and non-toxic pesticide azadirachtin obtained from neon tree (Azadirachta indica) is gaining more and more importance. Its broad-spectrum activity, Peculiar mode of action. eco-friendly and non-toxic action towards beneficial organisms has offered many advantages over chemical pesticides. All currently use commercial formulations based on azadirachtin contains azadirachtin extracted from seeds of naturally grown whole plants which is labour intensive process depending upon many uncontrollable geographical and climatic factors. Plant tissue culture can be a potential process for the pro-duction, offering consistent, stable and controlled supply of this bioactive compound, However the research on tissue culture aspects of production are in preliminary stage and requires culture and process optimization for the development of a commercially viable process. This review states the present status and future challenges of plant tissue culture for azadirachtin production.

• 농약과학회지
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• 제13권4호
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• pp.315-324
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• 2009

배추좀나방(Plutella xylostella L.)의 효과적인 방제를 위해서 현재 상용화되고 있는 친환경 농자재인 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki($30{\times}10^8\;cfu/mg$)와 Neem oil(0.5% azadirachtin)을 사용하였다. 두 약제를 추천농도로 처리했을 때 배추좀나방 1. 2령 유충에서 B. thuringiensis는 2일만에 100%의 사충률을 보였으며, Azadirachtin은 7일까지 지효적 효과를 보였다. 배추좀나방 1, 2, 3, 4령 유충에 대한 B. thuringiensis의 $LC_{50}$ 값은 각각 $2.8{\times}10^4$, $3.1{\times}10^4$, $3.4{\times}10^4$, $1.5{\times}10^5\;cfu/ml$이였으며, Azadirachtin은 2.7, 3.9, 4.7, 7.1 ppm이였다. B. thuringiensis와 Azadirachtin를 배추좀나방 성충에 처리하였을 경우에 산란수는 무처리와 비교하여 Azadirachtin 25 ppm에서 57.5개의 감소를 보였다. 또한 알의 부화율은 무처리와 비교하여 B. thuringiensis는 큰 차이가 없었고, Azadirachtin 50 ppm에서 45.4%의 부화율 감소를 나타냈다. 배추좀나방은 B. thuringiensis와 Azadirachtin을 혼합처리할 경우, 각각의 처리구에서 각각을 단독으로 처리하였을 때보다 높은 방제효과를 나타내었다. 포트시험의 경우에서도 B. thuringiensis와 Neem oil의 혼합처리 사용은 배추좀나방 알, 유충, 번데기, 성충의 친환경적인 방제에 효과를 나타냈다.

• Natural Product Sciences
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• 제25권2호
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• pp.150-156
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• 2019

Conventional extraction of oil and azadirachtin, a botanical insecticide, from Azadirachta indica involves defatting the seeds and leaves using hexane followed by azadirachtin extraction with a polar solvent. In order to simplify the process while maintaining the yield we explored a binary extraction approach using Soxhlet extraction device and hexane and ethanol as non-polar and polar solvents at various ratios and extraction times. The highest oil and azadirachtin yields were obtained at 6 h extraction time using a 50:50 solvent mixture for both neem leaves (44.7 wt%, $720mg_{Aza}/kg_{leaves}$) and seeds (53.5 wt%, $1045mg_{Aza}/kg_{leaves}$), respectively.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제5권2호
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• pp.121-129
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• 2003

Callus cultures of Azadirachta indica flower petals were established on MS medium supplemented with naphthalene acetic acid (1 mg/L), kinetin (0.5 mg/L) and sucrose $(3\%\;w/v)$. Cell cultures of Azadirachta indica were established and studied the growth and production kinetics. Half 85 medium supplemented with dicamba (2 mg/L), kinetin (1 mg/L) and sucrose $(3\%\;w/v)$ was found to be suitable for initiation and maintenance of cell cultures from the calli. MS medium supplemented with naphthalene acetic acid (NAA) (1 mg/L), kinetin (0.5 mg/L) and sucrose $(3\%\;w/v)$ was found to be suitable as production medium. Around $80\%\;(0.05\%\;w/v)$ of azadirachtin was found to be intracellular. The effect of various precursors, elicitors, permeabilizing agents and growth retardants in cell cultures was studied. The addition of precursors sodium acetate (10 mg/L), squalene (10 mg/L), isopentenyl pyrophosphate (1 mg/L) and geranyl pyrophosphate (1 mg/L) to the cell cultures on day 3 has shown significant increase in bioproduction of azadirachtin $(64.94{\pm}4.40\;mg/L,\;72.81{\pm}0.04\;mg/L,\;51.63{\pm}1.26\;mg/L\;and\;30.70{\pm}0.28\;mg/L\;respectively)$ over the control cultures $(4.70{\pm}0.27 mg/L)$. $5\%$ v/v cell extracts of Fusarium solani has shown moderate increase in the content of azadirachtin $(5.71{\pm}0.34\;mg/L)$ when compared to control cultures $(2.40{\pm}0.56\;mg/L)$. The addition of methyl jasmonate $(500\;{\mu}M/L)$ on day 3 has shown $\~4$ fold improvement in bioproduction of azadirachtln $(6.92{\pm}0.11\;mg/L)$ when compared to control cultures $(1.63{\pm}0.02\;mg/L)$. There was no significant effect of the studied growth retardants and permeabilizing agents on bioproduction of azadirachtin. Cells are cultivated in large volumes using the effective precursors.

• 농약과학회지
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• 제19권2호
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• pp.88-92
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• 2015

님 추출물 또는 고삼 추출물을 주원료로 하는 유기농업자재의 유효성분인 limonoid계 4성분 (azadirachtin A, azadirachtin B, deacetylsalannin, salannin)과 alkaloid계 2성분 (matrine, oxymatrine)을 중심으로 열 안정성을 평가하였다. 시험은 $30^{\circ}C$, $35^{\circ}C$, $40^{\circ}C$, $45^{\circ}C$, $54^{\circ}C$에서 각각 진행하였으며, 님 추출물을 주성분으로 하는 유기농업자재 3종에서 유효성분 반감기는 25.6-220일로 제품에 따라 열 안정성의 차이가 큰 것을 확인하였다. 반면, 고삼 추출물을 주성분으로 하는 유기농업자재의 유효성분 반감기는 231-346일로 님 추출물에 비해 상대적으로 열 안정성이 높은 것으로 나타났다.

• 한국유기농업학회지
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• 제22권3호
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• pp.435-444
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• 2014

Neem제를 이용한 가지 담배가루이 친환경 방제기술을 개발하고자 azadirachtin 0.5%가 함유된 Neem제를 100~2,000배까지 희석배수 5처리를 두고, 담배가루이 방제효과와 가지생육과 수량을 조사하였으며, 경제성을 분석하였다. 담배가루이 성충과 약충의 발생상황은 Neem제 희석배수가 높아질수록 성충과 약충의 발생량이 증가하여 방제효과가 낮았다. Neem제 처리농도별 가지 생육상황은 낮은 희석배수에서는 약해가 발생하였고, 높은 희석배수에서는 담배가루이에 의한 피해가 나타났다. 생육 및 수량은 48일후 조사에서 500배가 초장, 엽장, 절수 등 생육이 양호하였다. 또한 Neem제 500배 처리에서 과실의 발육이 좋아 수량성 및 상품률도 가장 높았다. 경제성 분석결과에서도 Neem제 500배 처리에서 10a당 13,545천원으로 소득이 가장 높았다. 따라서 담배가루이 방제를 위한 Neem제 희석배수는 500배였다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제60권4호
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• pp.463-471
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• 2021

열대식물인 인도멀구슬나무(Azadirachta indica)는 병해충과 방제와 의학적인 목적으로 오랫동안 이용하였다. 본고에서는 님제의 활성성분인 아자디라크틴의 해충에 대한 곤충생장조절, 기피, 섭식저해, 산란억제 등 다양한 작용기작과 국내 이용현황에 대하여 고찰하였다. 국내 유통되는 친환경유기농자재 중에서 님제 제품은 총 57종이었다. 그중 효능효과가 표시된 자재는 7종이었고 평균 아자디라크틴 함량은 0.38%로써 세계적으로 유통되는 평균 함량 2.1%와 비교할 때 약 5.5배 낮았다. 국내에서 님제의 방제효과에서 진딧물은 실험에서 다소 변이는 있었으나 대부분 90% 이상의 방제효과를 보였다. 꽃매미 약충에 누적살충률은 73~77%를 보였고, 총채벌레에 대한 방제가는 50~72% 범위로 살포효과가 인정되었다. 노린재와 나방류에 대한 방제효과는 대체적으로 낮았다. 본고는 유통되는 님제품의 이해와 실험자료의 해석에 필요한 주요한 정보를 제공해줄 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국약용작물학회:학술대회논문집
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• 한국약용작물학회 2009년도 심포지엄 및 춘계학술발표회
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• pp.375-376
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• 2009