These studies were investigated the effects of Gamicheungpyehwadam-tang (CPHDT) on immune-cell regulation in association with bronchial asthma in OVA-induced mouse model. The administration of 400 mg/kg CPHDT significantly reduced the number of total cells in lung, peripheral lymph node and spleen in OVA-induced bronchial asthma mouse model. The administration of 400 mg/kg CPHDT significantly reduced $CD3^+,{\;}CD19^+$and $CD3^+,{\;}CD69^+$ cell numbers separated from lung, peripheral lymph node and spleen in OVA-induced bronchial asthma mouse model. CPHDT significantly reduced $CD3^+/CCR3^+,{\;}CD4^+,{\;}B220^+/IgE^+$, and $CD3^+/DX5^+$ cell numbers separated from lung, peripheral lymph node and spleen in OVA-induced bronchial asthma mouse model in a dose dependent manner, However, CPHDT significantly reduced $CD8^+$ cell numbers from only lung and spleen. The administration of CPHDT significantly reduced $NK^+$ cell numbers separated from lung of OVA-induced bronchial asthma mouse model in all concentrations, but 200 mg/kg CPHDT reduced $NK^+$ cell numbers separated from peripheral lymph node. These results suggest that CPHDT has anti-asthma and anti-allergy effects. In addition to, CPHDT may be useful treatment of asthma based on the further studies about the individual efficacy search of the components of CPHDT and the adding of variety drugs to CPHDT.
천식이 유발된 Balb/c마우스와 동일한 조건의 IL-10 KO 마우스에 천식의 원인으로 알려진 DEP와 지하철역내에서 채집한 PM (10 ${\mu}g/m^3$)을 inhalation chamber,에 넣고 하루 4시간씩 흡입시킨 후 시료들을 채취하여 ICAM-1, VCAM-1의발현을 살펴 천식증상의 악화에 DEP와 PM이 어데한 영향을 미치는지 확인하였다. 본 실험의 결과 천식이 유발된 일반 Balb/c 마우스에 있어서는 DEP와 PM의 노출에 의하여 ICAM-1 및 VCAM-1의 발현이 세기관지 주위 조직들에서 미약하게 증가하였다. 그러나 IL-10 KO 마우스의 경우 DEP와 PM을 노출시켰을 때 ICAM-1 및 VCAM-1의 발현이 아주 강하게 증가하였다. 따라서, 본 결과는 IL-10에 대한 항체요법이 천식증상의 완화에 쓰일 수 있는 가능성을 암시하며, 한편 자동차 배기가스와 지하철 미세분진의 발생을 예방할 경우 천식과 관련한 세기관지의 염증을 완화시킬 수 있음을 간접적으로 증명한 것이라 할 수 있다.
Objectives : The present study was to investigate the effect of extract of Chelidonii herba (ECH) on the proliferation and activation of eosinophils which were prepared from lung cells of asthma-induced mouse by ovalbumin (OVA) treatment. Methods : C57BL/6 mouse was exposed to OVA three times a week for 6 weeks. The mouse lung tissues were dissected out, chopped and dossiciated with collagenase (1 ${\mu}g$/ml). Eosinophils were activated by rIL-3/rmIL-5 co-treatments. The lung cells were treated with ECH, incubated for 48 hr at $37^{\circ}C$, and analyzed by flow cytometery, ELISA, RT-PCR, and immuno-histochemical analysis. Results : In FACS analysis, number of granulocyte/lymphocyte, $CD3e^-$/$CCR3^+$, $CD3e^+$/$CD69^+$, $CD4^+$ and $CD23^+$/$B220^+$ in asthma-induced lung cells were significantly decreased by ECH treatment compared to the control group. And mRNA expression for IL-4, IL-5, IL-13, CCR3 and eotaxin in asthma-induced lung cells, which was induced by rIL-3 plus rmIL-5 treatments, was significantly decreased by ECH treatment. In ELISA analysis, production levels of IL-3, IL-5, IL-13 and histamine in asthma-induced lung cells, which were induced by rIL-3 plus rmIL-5 co-treatment, were significantly decreased by ECH treatment. ECH treatments significantly inhibited the proliferation of eosinohils prepared from asthma-induced mouse lung tissues compared to the non-ECH treated control cells. Immunohistochemical analysis revealed that ECH treatment significantly decreased the levels of eosipnphil activation compared to non-treated cells. Conclusions : The present data suggested that Chelidonium majus L. may have an effect on the inhibition of parameters associated with asthma responses in eosinpophils, and thus implicate the possibility for the clinical application of Chelidonium majus L.
Cordyceps sinensis has been clinically used for the treatment of recovering fatigue, promoting the production of body fluid and qi, resolving sputum and arresting cough. Recent studies showed that Cordyceps sinensis produced immune-modulatory, anticarcinogenic and antioxidative effects. But, there are lack of studies regarding the effects of Cordyceps sinensis on the asthma. So, this study was performed to investigate the oral administrated effects of this herb against the disease. Asthma was induced to Balb/c mouse by i.p. injection and aerosol immunization with ovalbumin, and the change of the eosinophil number in the bronchoalveolar avage fluid(BALF) was observed. Concentrations of Interleukine-4(IL-4), Interleukine-5(IL-5) in BALF and splenocyte were assessed by ELISA, ImmunoglobinG(IgG) and ImmunoglobinE(IgE) from serum were calculated by same method. We found that the effects of Cordyceps sinensis in asthma mouse was implicated in reductions of IL-4, IL-S released from type2 T helper (Th2) cell, and decreases of IgE from plasma cell. These findings suggest that Cordyceps sinensis can produce anti-asthmatic effect, which may play a role in allergen-induced asthma therapy.
본 연구진은 일차로 BALB/C 마우스를 이용하여 항원으로 ovalbumin을 사용하여 천식을 유발하여 폐 내 세포구성에 미치는 영향을 다른 실험방법에 의해 만들어진 천식모델과 비교하여 살펴보았고 이차로 천식 발생에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 IL-4와 IL-10 knock out (KO) 마우스를 이용하여 천식모델을 구축하여 천식인자를 가진 개체에서의 반응과 천식관련인자가 결핍된 개체에서의 반응성의 차이를 살펴보았다. 천식의 유발은 실험 1일째 $20\;{\mu}g$ ovalbumin으로 감작시킨 후 실험 14일에 재감작을 시켰다. 그 후 nebulizer를 이용하여 nasal inhalation을 28일, 29일, 30일에 실시하여 천식을 유발시켰다. 천식 유발의 확인은 기관지폐포 세척술로 채취한 폐 내 세포액을 이용하여 총 세포수 및 염증세포의 증가와 폐 내 세포와 폐조직의 염색을 통해 분포율을 확인하였다. 천식의 발병 과정에서 IgE 관련 과민반응을 주도하는 IL-4와 Th2 세포의 기능을 억제한다고 알려진 IL-10의 면역화학염색을 통해 그 발현정도를 관찰하였다. BALB/c 마우스의 천식유발군의 경우 천식의 특징인 염증세포의 증가와 호산구의 증가와 세기관지 주위 염증세포의 침윤 및 기도 상피의 비후를 관찰할 수 있었다. 따라서 본 실험에 응용된 천식유발 방법은 적합하였으며 천식유발 절차가 성공적으로 수행되었음을 확인하였다. IL-4 및 IL-10 KO 마우스를 이용한 천식유발군의 경우 BALB/c 마우스를 이용한 천식유발군보다 호산구의 증가 정도가 미약하게 관찰되었고, 폐조직 내 염증세포의 침윤 정도도 감소하였다. 천식매개인자인 IL-4와 IL-10의 면역조직화학염색 결과에서도 양성반응이 거의 나타나지 않았다. 본 연구 결과, IL-10이 IL-4와 같이 천식과 관련하여 세기관지 염증 반응을 증가시키는 역할을 하는 것으로 생각된다.
In order to study the effect of oral administration of Mawhangyounpye-tang against to asthma, astham was induced to allergy-sensitive Balb/c mouse with ovalbumin using method of Hatfield et al (1997). The changes of diameter lumen of upper portion of the trachea, lung weight, gross appearance of lung, histological profiles of lung and trachea, numbers of cellular compartments in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF), numbers and morphology of the mast cells in the trachea, numbers of mucus-secretory cell in the broncus, morphology of the bronchus, ultramicroscopical appearance of surface of trachea and number of cilia and mucous-secretory cells by scanning electron microscope. Obtained results were as follows. 1. The diameters of trachea lumen were significantly decreased in asthma induced control groups and these decreasing were result from hypertrophy of mucous membrane. However, these phenomena were dramatically recovered in the Mawhangyounpye-tang dosing groups. 2. Lung weights and black spots, which were result from infiltration of inflammatory cells, were significantly increased in asthma induced control groups but these phenomena were dramatically recovered in the Mawhangyounpye-tang dosing groups. 3. Hypertrophy of mucous membrane of trachea and bronchus and !bronchioles in the lung, peritracheal, peribronchus and peribronchiolar inflammatory cell infiltration, and mucoid exudate deposit in the lumen were observed in asthma induced control groups but these phenomena were dramatically recovered in the Mawhangyounpye-tang dosing groups. 4. Cellular compartments including neutrophil and eosinophil were dramatically increased in the BALF of asthma induced control groups but these phenomena were dramatically recovered in the Mawhangyounpye-tang dosing groups. 5. Mast cell degranulation and decreasing of the numbers of mast cells were detected in the trachea of asthma induced control groups. However, these phenomena were dramatically recovered in the Mawhangyounpye-tang dosing groups. 6. Shed, decreasing of cilia cell and increasing of mucous-secretory cells in the surface of the trachea of asthma induced control groups but these phenomena were dramatically recovered in the Mawhangyounpye-tang dosing groups. In conclusion, it Is considered that Mawhangyounpye-tang has somewhat favorable effect on the asthma because the asthma specific series of abnormalities in respiratory system were decreased after oral administratin of Mawhangyounpye-tang in this study. In future, it is needed that the toxicological and dosagespecific study of Mawhangyounpye-tang to use against asthma with safe.
Objectives : The present study was carried out to investigate the effect of Trichosanthis Radix extract (TRE) on the proliferation and activation of eosinophils which were prepared from lung cells of asthma-induced mice by ovalbumin (OVA) treatment. Methods : C57BL/6 mouse was exposed to OVA three times a week for 6 weeks. The mouse lung tissues were dissected out, chopped and dossiciated with collagenase (1 $\mu$g/ml). Eosinophils were activated by rmIL-3/rmIL-5 co-treatments. The lung cells were treated with TRE, incubated for 48 hr at 37$^{\circ}C$, and analyzed by flow cytometer, ELISA and RT-PCR methods Results : To measure cytotoxicity, mouse lung fibroblast cells (mLFCs) were pretreated with various concentrations of TRE. TRE at 100 $\mu$g/ml, the highest concentration, examined did not have any cytotoxic effects on mLFCs. In FACS analysis, number of granulocyte/lymphocyte, CD3e-/CCR3+, CD3e+/CD69+, CD4+/CD8+ T cells in asthma-induced lung cells were significantly decreased by TRE treatment compared to the control group. But CD4+/CD25+ T cells were not examined significant change in lung cells treated with TRE. In ELISA analysis, production levels of IL-3, IL-5, IL-13 and histamine in asthma-induced lung cells, which were induced by rIL-3 plus rmIL-5 co-treatment, were significantly decreased by TRE treatment. Conclusions : The present data suggested that Trichosanthis Radix on the inhibition of parameters associated with asthma responses in eosinpophils, and thus implicate the possibility for the clinical application of Trichosanthis Radix.
천식이 유발된 Balb/c 마우스와 동일한 조건의 Il-10 KO 마우스에 천식의 원인으로 알려진 DEP와 지하철역내에서 채칩한 PM ($10mg/m^{3}$)을 inhalation chamber에 넣고 하루 4시간씩 5일간 흡입시킨 후 시료를 채취하여 기관지 상피하부의 섬유화정도와 술잔세포의 증식 정도를 살펴 천식증상의 악화에 DEP와 PM이 어떠한 영향을 미치는지 확인하였다. 본 실험의 결과 천식이 유발된 일반 Balb/c 마우스에 있어서는 DEP와 PM의 노출에 의하여 상피하부의 섬유화가 증가하였고, 술잔세포의 수도 증가함을 확인하였다. 그러나, Il-KO 마우스의 경우 상피하부의 섬유화정도와 술잔세포의 수가 거의 증가하지 않았다. 따라서, 본 결과는 IL-10에 대한 항체요법이 천식증상의 완화에 쓰일 수 있는 가능성을 암시하며, 한편 자동차 배기가스와 지하철 미세분진의 발생을 예방할 경우 천식과 관련한 세기관지의 염증을 완화시킬 수 있음을 간접적으로 증명한 것이라 할 수 있다.
Objectives : The aim of this study was to investigate the effect of Peucedani Radix herbal acupuncture(PR-HA) at St36(joksamni) on ovalbumin-induced asthma in mice. Methods : C57BL/6 mice were sensitized and challenged with OVA(ovalbumin) for 12 weeks(once a week) C57BL/6 mice were injected, inhaled and sprayed with OVA for 12 weeks (3times a week). One of the two experimental groups was just treated with needle-prick on St36 and the other group was treated with 1% concentrations of PR-HAS at St36, for the later 8 weeks (3times /week). Results : 1. The weight and total cells of lung of the mice group treated with PR-HA decreased significantly compared with those of control group. 2. Total Leukocytes and Eosinophils in BALF of the mice group treated with PR-HA decreased significantly compared with those of control group. 3. Eosinophils in BALF of the mice group treated with PR-HA in Photomicrographs decreased significantly compared with those of control group. 4. According to Histological analysis of lung sections, it decreased significantly adhension of collagen in PR-HA than those of control group 5. The concentration of IgE, IL-4, IL-5, in BALF and IL-4, IL-5, Il-13 in serum of the mice group treated with PR-HA decreased significantly compared with that of control group. 6. The number of Gr-1+/CD11b+, CD11b+, CD3-/CCR3+, CD4+, CD3e+/CD69+ , CD23+B220+ cells in the lungs of the mice group treated with PR-HA decreased significantly compared with those of control group. 7. The cytokine's manifestation of mRNA of the mice group treated with PR-HA with RT-PCR decreased significantly compared with that of control group. Conclusion : We conclude that PR-HA is effective on OVA-induced asthma of C57BL/6 mouse.
This experiment was designed to investigate the effect of Gamcho(Glycyrrhiza uralensis Fisch, GLU) on Antiallergy in asthma. We measured IL-4, IL-5, UL-13, IgE in bronchoalveolar lavage fluid of ovalbumin induced asthmatic mouse and observed murine lung tissue. The results were obtained as follows: 1. GLU decreased the proliferation of IL-4, IL-5, IL-13, IgE significantly. According to the above results, it is suggested that GLU extract might be useful applied for prevention and treatment of allergic asthma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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