Kim, Eun-Jin;Jung, Young-Ja;Kang, Shin-Jung;Chang, Seung-Yup;Huh, Keun;Nam, Doo-Hyun
BMB Reports
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제34권2호
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pp.114-117
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2001
Cervi Parvum Cornu is widely used as a hemopoietic, tonifying, growth-promoting, cardiotonic, and immuno-modulating agent in Korea. In order to develop the quality control method of Cervi Parvum Cornu by the identification of the biological source or origin, the molecular approach was applied using PCR (polymerase chain reaction) and PCR-RFLF (PCR-restriction fragment length polymorphism) analysis. In the PCR analysis of the mitochondrial 12S rRNA gene and cytochrome b gene regions, no distinctive DNA bands from Cervidae (deer) antlers and Rangifer (reindeer) antlers were observed. However, when the amplified products in the mitochondrial cytochrome b gene region were subjected to restriction digestion with TaqI, Cervidae antlers showed an undigested state of 380 by band, differently from two bands of 230 by and 1S0 by from Rangifer antlers. Based on this finding, the base sequences of amplified PCR products in the range of mitochondria) cytochrome b gene from Cervidae antlers and Rangifer antlers were determined and subjected to restriction analysis by various endonucleases. The results showed that antlers from Rangifer species could be simply discriminated with other antlers from 8 Cervidae species (Chinese deer, Russian deer, Hong Kong deer, New Zealand deer, Kazakhstan deer, elk, red deer and Sika deer) by PCR-RFLP analysis using AtuI, HaeIII, HpaII or Sau3AI(MboI) as well as TaqI in the range of the mitochondrial cytochrome b gene.
Objective : Kyenegum has been frequently used for characterizing digestive symptoms in the traditional and oriental medicines. This study was conducted to investigate the characteristics of extracts from velvet antlers using the 4 different kinds of extracting methods. Methods : The extracts of velvet antlers were extracted using a $65^{\circ}C$ DW (9hrs), a Kyenegum crude enzyme, a $121^{\circ}C$ DW (2hrs), and a Kyenegum protease. To evaluate the characteristic of velvet antler extracts, we examined the brix, soluble solid, amino acid, mineral composition, and collagen protein. Results : As a result of the comparisons of velvet antlers extracted by the traditional extraction and the crude enzyme of kyenegum, the brix and soluble solid showed the higher contents for kyenegum enzymes. Also, mineral contents of the extracted velvet antlers were higher, particularly in Ca and P for those. The contents of collagen protein, hydroxyproline and hydroxylysine, were found to be more than twice in kyenegum protease compared with other extracting methods. Conclusion : These results indicated that the Kyenegum crude enzyme and protease are very effective to extract of velvet antlers.
Antler has been used as one of the important traditional oriental medicines for many years. It contains many biochemical components including lipids, peptides, carbohydrates, and inorganic substances. The various biological activities of antler are being considered owing to such biochemical components. The purpose of this research is to compare the biochemical components of antlers after treatment of three different kinds of fodder. They are mulberry (group A), Lycii Fructus (group B) and the complex of herbs (group C). The chemical composition of each antler was determined in three sections (top, middle, and bottom) and compared with those of the control. The contents of sialic acid, uronic acid and glycosaminoglycans increased in the top antlers of the group B. Total lipids content increased in the top antlers of all groups (A, B, and C). The concentration of inorganic ions (Ca, Mg, and P) decreased in all groups. Fattyacid composition was also analyzed by GC-MS and expressed as percentage of total fatty acid concentration. The content of palmitic acid decreased in all groups. The content of 2-hydrox-yhexadecanoic acid, which has not been reported in aster, increased in the top antlers of all groups. These results suggest that the treatment of special fodder may affect the composition of the biochemical components of antlers.
우리나라는 세계 녹용 생산량의 80% 이상을 소비한다. 하지만, 중국산, 뉴질랜드산 녹용과 수입이 금지된 북미산 녹용이 원용이라고 불리는 고가의 러시아산 녹용으로 둔갑 판매, 유통되는 문제가 다수 보고되고 있다. 따라서 본 연구에서는 녹용의 원산지 동정 기술을 개발하고자 러시아, 중국, 뉴질랜드 및 북미산 녹용으로부터 미토콘드리아 D-loop 영역에 대한 원산지 특이적인 분자 마커를 탐색할 목적으로 수행되었다. 결과적으로 중국산 녹용으로부터 약 60~70 bp의 결실 부위를 확인하고 이들 부위를 특이적으로 확인할 수 있는 PCR법을 통해서 중국산 녹용의 정확한 감별 가능성을 확인하였다. 따라서 본 연구는 미토콘드리아 DNA 유래의 유전자들에 대한 염기서열 분석과 이를 이용한 PCR 동정법이 녹용의 원산지 감별에 적용될 수 있음을 보여주는 사례라 생각된다.
Velvet antlers from Cervus elaphus species are one of most famous, expensive and commonly used medicinal materials in traditional oriental medicine. Some distributor had illegal practice of disguising the origin of antlers in Korea market. Therefore, a test to distinguish antler essential to ensure the healthy development of the herbal industry. In this study, the variation in DNA sequences of the mitochondrial ATPase8 and cytochrome-coxidaseI (COI) genes of Cervus elaphus from China, the Republic of Altai, and Canada were evaluated. In addition, the sequence variation among, Rein deer and Cervus elaphus species was also evaluated. Although the sequences of deer from the Republic of Altai and Canada were very similar, polymorphisms that were conserved in each species were observed in the ATPase8 and COI genes. Therefore, these polymorphic markers could be used to distinguish Cervus elaphus antlers from different locations.
The ash content, mineral composition, total phenolics, antioxidant capacity, and neuroprotective effect of the antlers of deer fed with herb-incorporated feedstuff (HFS) or normal feedstuff (NFS) were comparatively evaluated. The contents of ash and mineral of the antler of deer fed with HFS were significantly lower than its counterpart. The ash and mineral contents of deer antlers decreased generally from the upper section toward the tip section. The ratios of Ca/ash, Ca/P, and Ca/Fe of antler of deer fed with HFS were lower than those of antler of deer fed with NFS. Antlers of deer fed with HFS had higher total phenolics, nitrite scavenging capacity, and antioxidant capacity than those of deer fed with NFS. Antlers of deer fed with HFS or NFS showed in vitro neuronal protection of PC-12 cells against oxidative stress in a dose-dependent manner, where antler of deer fed with HFS generally had higher cellular viability than NFS. These results above suggest that the incorporation of the medicinal herbal complex into feedstuff may improve the biological effects of deer antlers.
Antlers from deer species are alternative animal by-products. Due to the oriental trade, the velvet antler industry is rapidly emerging in North America. The unique biological property of antler wish a deciduous natural phenomenon offers the valuable model of biomedical research. Growing antlers showed different structures according to cell populations consisting of mesenchymes, chondroblasts, chondrocytes and osseous tissues from distal to proximal portions of main beam. Their structures were different from two tissues, cartilage and bone, in growing antlers. Zone of maturing ants calcifying chondrocytes referred as upper section was invaded by osteoblasts indicating the occurrence of endochondral ossification. The cartilaginous tissues were gradually replaced by osseous tissues downward. The bony tissues referred as the middle and base sections in this thesis contained spongy bone and cortical bone structure in the difference of the degree of mineralization antral the thickness of cortical bony in adjacent to outer velvet layer. In addition, the endocrinological regulators such as testosterone, prolactin, growth hormones and other growth factors are actively involved in the unique deciduous nature shown in the growth and development of antler.
우리나라는 전 세계 녹용의 약 80% 이상을 소비하고 있는 양록 대국이나 최근 국내 녹용시장에서의 녹용 둔갑판매 및 불법유통 현상이 문제점으로 대두되고 있다. 따라서 본 연구는 녹용의 종 감별 기술을 개발하고자 현재 국내에서 유통되고 있는 러시아산 원용, 북미산 대록, 국산화용, 중국산 깔깔이 및 알래스카산 순록 등 5종의 대표적인 녹용들을 대상으로 종간 염기서열 변이성이 매우 높은 유전자로 알려져 있는 mt DNA내 cytochrome b 및 D-loop 유전자 영역의 염기서열 분석 및 종간 변이성 비교분석을 수행하였다. 각 녹용시료에서 mt DNA를 분리하고 cytochrome b와 D-loop유전자의 특정 영역을 포함하는 primer를 설계 합성하고 PCR로 증폭한 후 DNA 증폭산물의 염기서열을 분석하여 종간 유전정보의 동일성 여부를 비교한 결과 녹용 종간에 명확한 차이를 보이는 염기서열 부위가 검출되었고 이러한 종간 염기배열 차이에 근거하여 녹용의 종 감별이 가능하였다. 또한, mt DNA cytochrome b유전자에서 종간 특이적 염기서열을 인지하는 두 종류의 제한효소(NlaIV 및 TaqI)을 이용한 PCR-RFLP 기법으로 녹용으로 인정되지 않는 순록의 종 특이적 RFLP 분자표지를 검출하였고 이를 이용하여 녹용과 순록간의 종 판별이 가능하였다. 한편, D-loop 유전자의 특정 영역 염기서열 분석기법을 이용하여 시중에서 러시아산 원용으로 유통되고 있는 녹용 절편 32개를 무작위표본 추출하여 녹용의 종 감별을 조사한 결과 러시아산 원용으로 인정되는 것은 62.5%에 불과하였고 나머지는 중국산 마록(25.0%)과 엘크 및 순록의 아종으로 추정되는 시료도 일부 검출되었다. 따라서 본 연구를 통해 사슴 녹용 mt DNA 유전자의 염기서열 유전정보 변이 차이를 이용한 염기서열 분석법과 특정 제한효소(NlaIV 및 TaqI)를 이용한 PCR-RFLP 기법은 녹용의 과학적인 종 감별과 이를 바탕으로 녹용 원산지의 추정도 가능할 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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