본 실험에서는 에탄올로 추출한 Psidium guajava 잎과 컬럼크로마토그래피를 이용한 메탄올 분획물의 항산화 능력을 측정하기 위해 DPPH, ABTS 라디컬소거능법, 총 페놀, 플라보노이드법, SOD assay법을 활용하였다. 항산화 활성 결과에서 40, 60% 메탄올 분획물이 의미있는 측정값을 나타냈고, 두 분획물을 선정하여 HPLC와 핵자기공명(NMR)을 활용한 화학적 분석을 통해 주요 성분의 분리 및 물질탐색을 진행하였다. HPLC 정제를 통해 quercitrin (1)와 isoquercetin (2) 두 종류의 quercetin 유도체를 분리 및 구조 동정하였다. SOD assay 결과에서 컬럼크로마토그래피법을 활용하여 얻은 몇몇의 분획물과 단일물질로 분리한 화합물들은 추출물보다 향상된 항산화 활성을 보였다.
Objectives : The anti-inflammatory and antioxidant effects of water extracts of Sasangja-tang(SSJ) and Gami-sasangja-tang(GSJ) were investigated. The effects of SSJ and GSJ were compared. Methods : We performed cell viability assay in HaCaT cells and RAW 264.7 cells using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5 diphenyltetrazolium bromide(MTT) assay. We measured chemokines(regulated on activation normal T-cell expression and secreted ; RANTES/CCL5, interferon-inducible protein; IP-10/CXCL10, macrophage-derived chemokine; MDC/CCL22) in HaCat cells, also we measured cytokines (tumor necrosis factor-${\alpha}$; TNF-${\alpha}$, interleukin-6; IL-6) and nitric oxide(NO) production in RAW 264.7 cells using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and NO assay. Western blot assay was used to evaluate the expression for inducible nitric oxide synthase(iNOS) in RAW 264.7 cells. Results : SSJ and GSJ did not affect the cell viability at the concentrations treated ($0-800{\mu}g/ml$). As a result of SSJ and GSJ treatment in HaCat cells stimulated by TNF-${\alpha}$(10 ng/ml) and interferon(IFN)-${\gamma}$(10 ng/ml), the production of RANTES and IP-10 was inhibited significantly. However there was no significant difference in the secretion of MDC. And in RAW 264. 7 cells stimulated by lipopolysaccharide(LPS, $1{\mu}g/ml$), SSJ and GSJ treatment significantly inhibited the secretion of TNF-${\alpha}$ and IL-6 and the production of NO. The expression of iNOS was also decresed by SSJ and GSJ treatment in RAW 264. 7 cells. Compared with SSJ, GSJ was superior to SSJ in inhibition of RANTES, IP-10, TNF-${\alpha}$, IL-6 and NO production at the concentration of $200{\mu}g/ml$. Conclusion : Both SSJ and GSJ have anti-inflammatory and antioxidant effects. And GSJ has better effects than SSJ.
The present study was attempted to investigate the antioxidant capacity of popular yellow-green vegetable juices (kale, Angelica keishei, carrot, small water dropwort) and to investigate the effect of vegetable juices on protecting oxidative damage to DNA in cultured Chinese hamster lung (CHL) cells. Antioxidant capacity was analyzed by TRAP assay (Total radical-trapping antioxidant potential). Cellular DNA dmamage was measured by SCGE (single-cell gel electrophoresis, also known as comet assay. Cells incubated in medium with PBS (negative control) or with various concentration of the freeze dried green juices (25, 50, 100, 250 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) resuspended in PBS were treated with $H_2O_2$ (200 ${\mu}{\textrm}{m}$) as an oxidative stimulus for 5 min at 4$^{\circ}C$. The physiological function of each vegetable juice on oxidative DNA damage was analyzed and expressed as tail moment (tail length X percentage migrated DNA in tail) . Kale juice had the highest TRAP value suggesting that kale has the highest antioxidant capacity followed by Angelica keishei, small water dropwort and carrot. Cells treated with $H_2O_2$ had extensive DNA damage compared with cells treated with PBS or pre-treated with vegetable juice extracts. All green juices inhibited $H_2O_2$-induced DNA damage with kale being the most effective juice among the tested juices. These results indicate that green juice supplementation to CHL cells followed by oxidative stimulus inhibited damage to cellular DNA, supporting a protective effect against oxidative damage induced by reactive oxygen species. (Korean J Nutrition 36(1) : 24-31, 2003)
Objective : The purpose of this study was to investigate anti-aging and antioxidant effects of extracts of Nelumbo nucifera leaves (NN-L) using ethanol on skin .Methods : Each part of leaves(NN-L), flowers(NN-F) and stem(NN-S) was extracted with 70% ethanol. We performed radical scavenging assay(DPPH, ABTS+, Superoxide anion radical), elastase inhibition assay, collagenase inhibition assay. NN-L extracts were tested for cell viability(MTT assay), MMP-1 inhibition and MMP-1 protein expression on CCD-986sk cells (human fibroblast line).Results : Recently, many studies have reported that elastin is also involved in inhibiting or repairing wrinkle formation, although collagen is a major factor in the skin wrinkle formation. We measured its free radical scavenging activity, elastase inhibitory activity and expression of MMP-1 (matrix metalloprotease-1) in human fibroblast cells. Among the parts of Nelumbo nucifera, NN-L showed the highest antioxidant activities and in radical scavenging. DPPH, ABTS+ and Superoxide anion radical scavenging activity of NN-L at concentration of 1,000 μg/mL were 91.43%, 99.31% and 73.7% respectively. In vitro elastase and collagenase inhibition effects of NN-L at concentration of 1,000 μg/mL was 42.8% and 55.3% respectively. The ethanol extract of NN-L showed cell viability of 95.4% in 50 μg/mL concentration. In addition, The results from Western blot assay showed that NN-L decreased the expression of MMP-1 protein in a dose-dependent manner (by up to 35.0% at 50 μM).Conclusion : The findings suggest that the NN-L great potential as a cosmeceutical ingredient with antioxidant and anti-wrinkling effects.
Water, methanol and ethanol extracts of ginseng leaves were assayed for total phenolics and flavonoids, ascorbic acid, cupric and ferrous ion chelating activities, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, ferric reducing antioxidant power (FRAP) assay and ABTS radical cation decolourization (TEAC) assay for their antioxidant properties. The ethanol extract of ginseng leaves contained significantly (p<0.05) higher amounts of total phenolics and flavonoids (600.57 and 1701 mg/100 g) than methanol (374.43 and 1512.64 mg/100 g) and water extracts (248.30 and 680.05 mg/100 g). Among solvent extracts of ginseng leaves, the ethanol extract showed the most powerful antioxidant activities. However, the ferrous ion chelating activity of ginseng leaf extracts were lower than the cupric ion chelating ability. These differences in concentrations of key antioxidants among various solvent extracts seemed to be responsible for their differences in antioxidant activities. These results suggest that ethanol extract of ginseng leaves has the most effective antioxidant capacity compared to the methanol and water extracts tested in the present study. Thus, it can be applied for the effective extraction of functional material from ginseng leaves for the usage of pharmaceutical and/or food industries.
Antioxidant activity, total phenolic, total flavonoid compounds and cytotoxicity to cancer cell lines of propolis extracts from two extraction methods were investigated in this study. Propolis was collected from Phayao province and extracted with 70% ethanol using maceration and sonication techniques. The antioxidant activity was evaluated by DPPH assay. Total phenolic and flavonoid compounds were also determined. Moreover, the cytotoxicity of propolis was evaluated using MTT assay. The percentage propolis yield after extraction using maceration (18.1%) was higher than using sonication (15.7%). Nevertheless, antioxidant and flavonoid compounds of the sonication propolis extract were significant greater than using maceration. Propolis extract from sonication showed antioxidant activity by $3.30{\pm}0.15$ mg gallic acid equivalents/g extract. Total phenolic compound was $18.3{\pm}3.30$ mg gallic acid equivalents/g extract and flavonoid compound was $20.49{\pm}0.62$ mg quercetin/g extract. Additionally, propolis extracts from two extraction methods demonstrated the inhibitory effect on proliferation of A549 and HeLa cancer cell lines at 24, 48 and 72 hours in a dose-dependent manner. These results are of interest for the selection of the most appropriate method for preparation of propolis extracts as potential antioxidant and anticancer agents.
Egg yolk is widely used to extract lecithin, which is utilized in the food and cosmetics industry. After lecithin is removed, the rest of egg yolk is generated as a by-product. Thus, it is necessary to properly utilize it. In this study, egg yolk protein extracts were produced using ethanol (EYE-E) and water (EYE-W). Their antioxidant and immunomodulatory effects were then evaluated. Antioxidant activities of EYE-E and EYE-W were determined using cellular antioxidant capacity (CAC) assay and comet assay. EYE-E and EYE-W showed significant (p<0.05) scavenging effects on intracellular reactive oxygen species (ROS) in a dose dependent manner. At a concentration of 50 ㎍/mL, EYE-W showed higher (p<0.05) antioxidant activity than EYE-E. EYE-E and EYE-W also exhibited protective effects against DNA damage caused by oxidative stress. After treatment with EYE-E and EYE-W, DNA damage level of 48.7% due to oxidative stress was decreased to 36.2% and 31.8% levels, respectively. In addition, EYE-E and EYE-W showed immunomodulatory effects by regulating Th1 cytokines (TNF-α and IL-2) and Th2 cytokines (IL-10 and IL-4) in Balb/c mouse splenocytes. These data suggest that EYE-E and EYE-W could be used as functional food ingredients with excellent antioxidant and immunomodulatory activities in the food industry.
The rhizome of Phragmites communis Trin. is used for vomiting and belching by clearing stomach and the sprout is used as tea. Phragmites japonica is similar with P. communis except the color of sheath is purple. This study is aimed to compare the in vitro antioxidant activity, total polyphenol and flavonoids contents of P. communis and P. japonica. The antioxidant activities of fractions from the two Phragmites plants were evaluated by 1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging assay. The antioxidant activity varied with plant parts and extract solvents. The fractions of leaf extract from the two Phragmites plants (4.06±1.32-16.47±1.28%) showed higher antioxidant activity by DPPH assay compared with rhizome fractions of two Phragmites plants (0.00±0.00-14.15±0.07%), these are lower compared with ascorbic acid and butylhydroxyanisole (BHA). The highest ABTS radical scavenging activity was found for rhizome ether fraction, namely 74.95±0.56% and 73.04±1.85% for P. communis and P. japonica, these are higher than BHA. The total polyphenol and flavonoids contents were different with plant parts and extract solvents, likewise antioxidant activity. A significant correlation was shown between DPPH and ABTS radical scavenging activity. Considering the results of this study, the leaves and stems of P. communis and P. japonica are expected to be used as natural antioxidants.
Mushrooms collected from Deogyu mountain, Korea, in 2011, were identified as four classes, four orders, 13 families, 22 genera, and 33 species. In particular, agaricales was most abundant and comprised more than 70%. Their antioxidant activities were estimated using three different bioassay methods, the 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate) (ABTS) radical scavenging assay, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging assay, and reducing power assay. As a result, the methanol extracts of Stereum ostrea, Laetiporus sulphureus var. miniatus, and Tyromyces sambuceus exhibited potent antioxidant activity in all bioassays tested.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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