Pyricularia oryzae (P. oryzae), the cause of rice blast, is one of the most important fungal pathogens of rice. Seventy strains of marine fungi were isolated from marine algae, and it was measured antifungal activity against P. oryzae. Metabolites of marine fungus A-248 which isolated from marine algae showed strong antifungal activity against P. oryzae. The antifungal substance from the metabolites of marine fungus A-248 was extracted with ethylacetate, and then purified by preparative TLC and reverse-phase HPLC. The minimum inhibitory concentration (MIC) value was $0.18\mu g/mL$ for the antifungal activity of the substance purified from A-248 metabolites. The purified substance was similar to antifungal activity of rhizoxin, which is a commercial antifungal agent.
The saprophytic fungus Ulocladium atrum Preuss is a promising biological control agent for Botrytis cinerea in greenhouse- and field-grown crops. However, despite its known potent antifungal activity, no antifungal substance has yet been reported. In an effort to characterize the antifungal substance from U. atrum, we isolated an antibiotic peptide. Based on extensive spectroscopic analyses, its structure was established as a cyclopeptolide with a high portion of N-methylated amino acids, and its $^1H$ and $^{13}C$ chemical shifts were completely assigned based on extensive 1D and 2D NMR experiments. Compound 1 exhibited potent antifungal activity against the plant pathogenic fungus Botrytis cinerea and moderate activity against Alternaria alternate and Magnaporthe grisea.
The purified antifungal substances produced by Bacillus amyloliquefaciens IUB158-03 was positive to ninhydrin but negative to aniline, suggesting that the antifungal substance could be a peptide. FAB-MS, UV adsorption spectrum, and amino acid composition analysis revealed that the molecular weight of the antifungal substance was 1042 and that maximal adsorption was at 220 nm and 277 nm. The antifungal substance was composed of $Asn_3$, $Gln_2$, $Ser_1$, $Gly_1$, and $Tyr_1$. The composition and structural characteristics of antifungal substance were analysed by $^1H$-NMR spectrum, $^1H$-COSY, HMQC, which revealed that the compound belongs to the iturin A family. Temperature and pH had little effect on the stability of the antifungal substance in the ranges of $-70{\sim}121^{\circ}C$ and pH 6.0~10.0, respectively. It showed strong antibiotic activity against fungi. An in vitro cytotoxicity test using NIH3T3 cell showed that the antifungal substance does not have cytotoxicity. The number of circulating leukocytes and the hematobiological analysis of the mice administered with the antifungal substances was similar to those of the control group, indicating no cytotoxicity in vivo. Therefore, the antifungal substances extracted from culture broth of Bacillus amyloliquefaciens IUB158-03 have future potential as biocontrol agents against plant diseases caused by fungi.
This study was undertaken to separate and identify antifungla substances produced by Gilocladium virens G1, a biocontrol agent used for the control of plant diseases caused by Rhizoctonea solani. The culture of G. virens G1 effectively inhibited the growth of R. solani, Colletotrichum gloeosporioides, and Phytophthora capsici, but less that of Fusarium oxysporum. The n-hexane extract of the G. virens culture, which was used for the purification of responsible substances, strongly inhibited R. solani and C. gloeosporioides, but not P. capsici, although the n-butanol extract was effective on all of the pathogens tested. An antifungal substance was purified using the n-hexane extract by Silica gel column chromatography and HPLC. The substance was examined for purity by HPLC and for nature by UV spectrometry, which differed from known antibiotic compounds such as gliotoxin, viridin and gliovirin. The antifungal substance was very liphophilic based on its solvent-solubility and Rf values on TLC, and more inhibitory to C. gloeosporioides than other fungal pathogens tested.
To develop an environment-friendly fungicide for controlling tomato wilt diseases, antifungal active substance was isolated Rheum australe D. Don roots against Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici, a pathogen of tomato wilt, in this study. Methanol extract obtained from Rheum australe roots was successively fractionated with hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. The ethyl acetate fraction, which showed the highest antifungal activity, was separated by column chromatography, and 60 subfractions were obtained. The 60 subfractions were anlayzed for antifungal activities by bioassay. The active compound was identified as 5-[(E)-2- (3-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethenyl]benzene-1,3-diol (rhapontigenin) by NMR and GC-MS analysis. As a result of testing antifungal activity of rhapontigenin against Fusarium oxysporum, EC50 of rhapontigenin was showed strong antifungal activity at 7.48 mg/L. Therefore, this study showed that the Rheum australe roots extract can be a potential candidate which is a environment-friendly fungicide against Fusarium oxysporum.
The antifungal studies on the triterpenoids from the pericarp of Forsythia viridissima LINDL. were conducted. The pericarp was obtained from the plant which was cultivated at Eusung, Kyungsang-bukkdo, Korea. Substances A and B were isolated by column fractionation and purified by recrystallization. Antifungal actions of substance A, acetyloleanolic acid, show significant inhibition effect against Trichophyton rubrum, T. mentagrophytes, T. tonsurans, Microsporum nanum, M. canis, and M. cookei. Substance B, viridissimic acid, shows negative effect against Candida albicans and shows lower effects against other test fungi.
Bacillus lichemiformis Kll, a plant growth promoting rhizobacterium was reported as a producer of auxin, siderophore, as well as antifungal cellulase under some culture conditions. In vitro test, B. licheniformis Kll represented excellent antagonistic ability against Fusarium oxyspoum (KACC 40037), and showed broad spectrum against other phytopathogenic fungi. B. licheniformis Kll had cellulolytic activity toward not only carboxymethyl-cellulose (CMC) but also insoluble cellulose, such as fungal cell wall cellulose, filter paper (Whatman No. 1), and Avicel. In addition, we confirmed antifungal substance production by butanol-extract methods. The strain produced optimally the antifungal substance when it was cultivated at pH 9.0, 30${\circ}$C for 4 days on nutrient medium. The biological control mechanisms of B. lichemiformis Kll were caused by antifungal substance, cellulase and siderophore against phytopathogenic fungi.
Kim Hyunkyung;Lee Jue-Hee;Shim Jin Kie;Han Yongmoon
YAKHAK HOEJI
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v.49
no.4
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pp.323-329
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2005
Antimicrobial peptides are evolutionary ancient weapons for animal and plant species to depend themselves against infectious microbes. In the present study, we investigated if an antimicrobial peptide was produced from Coptidis Rhizoma. For the determination, protein substance from the medicinal plant was isolated by various preparations. Among the preparations, the protein portion dissolved in phosphate-buffered saline solution (CRP-DS) that contained the most amount of protein $(90\%)$ resulted in maximal inhibition of Candida albicans which causes local and systemic infections. Analyses by gel-electrophoresis and gel-permeation chromatography showed the CRP-DS formed a single band of approximately 11.8 KDa as molecular size. Antifungal activity of the CRP-DS was almost equivalent to antifungal activity by fluconazole, resulting in MIC (minimal inhibitory concentration) of approximately $50{\mu}g/ml$. The antifungal activity was a dose-dependent. The antifungal activity appeared to be inactivated by heat-treatment and ionic strength, respectively. In a murine model, the CRP-DS enhanced resistance of mice against disseminated candidiasis. The HPLC analysis demonstrated maximum $4\%$ of berberine as residual content in the CRP-DS preparation resulted in no influence on the antifungal activity. In addition, protein portion isolated from Phellodendri Cortex producing the alkaloid component like Coptidis Rhizoma had no such anticandidal effect. These results indicate that the protein substance from Coptidis Rhizoma was responsible for the antifungal activity.
In order to produce environmental-friendly fermented compost, a cattle manure-sawdust compost (antifungal compost) was developed by inoculation of B. licheniformis KJ-9 to cattle manure-sawdust. The thermal stability of the antifungal substance produced by B. licheniformis KJ-9 maintained more than 60% antifungal activity with heat treatment at $100^{\circ}C$ for 10 min, and the optimum pH of antifungal activity of the substance was 7.0. In a pot experiment with red pepper, the antifungal compost increased 1.5~2 times in leaf number and stem and root growth rate compared to those of commercial compost. Also, the diameter of stems increased 1.5-3 times in the antifungal compost treated group. The amount of microbes increased markedly in soil supplemented with antifungal compost compared to the control. In the field experiment for cultivation of garlic and Perilla japonica, the growth of both crops was significantly enhanced in the field treated with antifungal compost as compared to the commercial compost.
Kim, Jin-Cheol;Park, Gyung-Ja;Kim, Hyun-Ju;Kim, Heung-Tae;Ahn, Jong-Woong;Cho, Kwang-Yun
The Plant Pathology Journal
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v.18
no.2
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pp.102-105
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2002
A strain of Acremonium strictum, the mycoparasite of Botrytis cinerea, showed strong antifungal activities both in vitro and in vivo against several phytopathogenic fungi. An antifungal substance was purified from the liquid cultures of A. strictum and identified as verlamelin by instrumental analyses. Verlamelin exhibited in vitro antifungal activity against some phytopathogenic fungi such as Magnaporthe grisea, Bipolaris maydis, and Botrytis cinerea, while it was net active against all the bacteria tested. In viva, verlamelin exhibited strong protective and curative activities, particularly against barley powdery mildew. At 100 μg/ml, it inhibited the development of barley powdery mildew with control values of more than 90% in 7-day protective and 2-day curative applications. This is the first report on the production of verlamelin by Acremonium species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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