Biosensors consist of biochemical recognition agents like antibodies immobilized on the surfaces of transducers that change the recognition into a measurable electronic signal. Here we report a piezoelectric immunosensor made to detect Vibrio vulnificus. A 9MHz AT-cut piezoelectric wafer attached with two gold electrodes of 5mm diameter was used as the transducer of the QCM biosensor with a reproducibility of ${\pm}0.1Hz$ in frequency response. We have tried different approaches to immobilize antibody on the sensor chip. Concerning the orientation of antibody for the best antigen binding capacity, the antibody was immobilized by specific binding to protein G or by cross-linking through hydrazine. In addition, protein G was cross-linked on glutaraldehyde activated immine layer (PEI) or EDC/NHS activated sulfide monolayer (MPA). PEI was found to be more effective to immobilize protein G following glutaraldehyde activation than MPA. However, hydrazine chip showed a better capability to immobilize more IgG than protein G chip and a higher sensitivity. The sensor system was able to detect V. vulnificus in dose dependent manner and was able to detect bacterial cells within 5 minutes by monitoring frequency shifts in real time. The detection limit can be improved by preincubation to enrich the bacterial cell number.
Purpose : Studies on the duration of immune response against Japanese encephalitis virus from recipients with JE vaccine (Nakayama-NIH strain) in Korea. Methods : To determinate the immune response and the duration of antibody against JE vaccine, 213 students were examined since 1994 using hemmaglutination inhibition test and plaque reduction neutralization test (PRNT). Results : 24 months after the first vaccination, haemmaglutination inhibition and neutralizing antibody maintained from the recipients 63.4% (>1:20) and 100% (>1:20), respectively. In April 1996, one dose booster to the same recipients those who were vaccinated in 1994, the GMT antibody for HI and PRNT titer were both increased from 1:11.6 to 1:13.2 and 1:275.7 to 1:348.1, respectively, after 6 months booster (after 30 months from the initial vaccination). This results showed that the antibody from the active immunity could be maintained more than 12 months after the initial vaccination. On the basis of these results, inactivated killed JE vaccine (Nakayama-NIH strain) using for preventing against JE purpose seems to produce antibody enough to protect against JE at present. Conclusions : Along with the results of this study demonstrating duration of antibody, the active immunization could be maintained as long as by initial vaccination of 2 doses, a single dose of booster vaccination made during a period of 1 month to 12 months and the successive booster vaccination by 2 or 3 year intervals. However, the immunization schedule should be concerned with both epidemiology of disease and the immune response of vaccinated individuals.
The present experiment was designed to investigate the effects of behavioral, response to immune function in response to electric footshock in mice. Mice were subjected to electric footshock for 3 days(two sessions a day, 11 times of shock for about 31 minutes a session). The humoral immune response was measured using mice immunized with rat RBC. The cell-mediated immune responses were evaluated by contact hypersensitivity to 2, 4-dinitrofluorobenzene(DNFB) and by phytohemagglutin(PHA)-stimulated splenocytes proliferation assay. In stressed group, electric footshock suppressed significantly anti-rat RBC antibody production(p<0.05), but enhanced significantly $T_{48}$ relative to $T_{24}$ in contact hypersenstivry (P<.01) and T-cell proliferation response(P<.05) by PHA stimulation elative to control group. T-cell proliferation response by PHA stimulation was significantly correlated to the movement than the sensitivity and coping behavior in the mouse, in response to the electric footshock. These data supper the importance of behavioral response in stress-induced changes of immune functions.
Dose-dependent, immune modulatory effects of aconitine and heated aconitine were studied in mice. Mice, administered aconitine and heated aconitine intraperitoneally every other day for 4 weeks, were sensitized and challenged with sheep red blood cells. Serum antibody titer, foot pad swelling and rosette forming cell number were measured to evaluate hurmoral and cell mediated immune responses. The results show that Humoral immune response was suppressed by aconitine 0.05 mg/kg and heated aconitine but increased by aconitine 0.10 mg/kg administration. Cell mediated immune response was suppressed in all groups. Especially heated aconitine administration significantly suppressed the cell mediated immune response. The number of peripheral circulating white blood cell was reduced by aconitine but was not affected by heated aconitine.
Effect of the butanol fraction of Astragali Radix (BFAR) on the humoral immune response were investigated in ICR mice. Mice were divided into 4 groups and BFAR at doses of 5,25 and 125 mg/kg were administered orally to mice daily for 3 weeks, and the normal animals were given vehicle. The results of this study are summarized as follows; the relative weight of spleen was markedly increased by BFAR treatment, compared with that in normal mice. However, the body weight gain and the relative weight of liver were not affected. Splenic plaque forming cells and hemagglutination titers to sheep red blood cells, and the secondary IgG antibody response to bovine serum albumin were also dose-dependently enhanced by BFAR treatment. In these mice, BFAR did not increase serum alanine aminotransferase total protein, sect albumin and albumin/globulin ratio when compared with those in normal mice. Thus, these findings indicate that BFAR significantly enhances humoral immune response to antigen in concentrations that do not affected liver function.
Kim, Wi-Sik;Han, Jong-Seok;Jang, Min-Seok;Seo, Han-Gil;Jung, Sung-Ju;Park, Jung-Jun;Kim, Seok-Ryel;Oh, Myung-Joo
Journal of fish pathology
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v.24
no.2
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pp.153-160
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2011
The specific antibody response of olive flounder, Paralichthys olivaceus to change in rearing-environmental conditions post immunization with antigen (bovine serum albumin, BSA) and different routes of antigen administration were investigated by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). To test the effect of routes of antigen administration, flounder were injected intraperioneally or intramuscularlly with 1 mg of BSA. In addition, to test the effect of change in environmental condition post immunization, flounder were injected intraperioneally with 1 mg of antigen, and then were exposed to acute thermal change (the water temperature (WT) was decreased from $21^{\circ}C$ to $15^{\circ}C$ within 30 min and maintained at $15^{\circ}C$ for 3 h), handling (fish were caught and subsequently held out of water for 1 min) or heavy oil (76 g/200 L for 2 days). Consequently, there was no significant difference between intraperioneal (IP) and intramuscular (IM) injections except at 10 days post-immunization. With these results, it suggests that both 1M and IP injections may be used as route of vaccination. Furthermore, no significant difference was observed in the antibody response among the groups exposed to heavy oil, handling, sudden drop of WT and positive control except at 10 days post-immunization. From these results, it was confirmed that specific antibody response was not affected by the above mentioned rearing-environmental conditions, suggesting that vaccination can be employed at changing rearing-environmental conditions.
This study was carried out in order to investigate the immunosuppressive factor and immune response of color carp. The protection and serum antibody production of juvenile color carp aganist Aeromonas hydrophila were investigated on the effect of temperature differences and injected several aquatic drugs, i.e. Hydrocortisone, Oxytetracycline, Chloramphenicol and Ascorbic acid. The fish were injected intraperitoneally with 1mg/fish of HKC and FKC at three different temperature conditions as $16^{\circ}C$, $24^{\circ}C$, and $32^{\circ}C$ respectively. There were induced better protection and serum antibody production in the fish which had been kept at $24^{\circ}C$ than in the fish which had been kept at $16^{\circ}C$ and $32^{\circ}C$. The FKC immunized fish were followed 24 hrs later with intraperitoneal injection of 40mg/kg body weight of Hydrocortisone, 60mg/kg body weight of Oxytetracycline. 60mg/kg body weight of Chloramphenicol and 30mg/kg body weight of Ascorbic acid, respectively. The control fish were injected PBS only. The fish given the above aquatic drugs reduced serum antibody production level and protection rate when compared to control fish. As the results, immune response of juvenile color carp immunized FKC at $24^{\circ}C$ was more effective than $16^{\circ}C$ or $32^{\circ}C$ and immune response of juvenile color carp injected several aquatic drugs which was seemed to be immunosuppressive factor.
Monoclonal antibodies against human chorionic gonadotropin (hCG) were prepared and characterized by examining isotype, epitope binding, cross reactivity and affinity constants. And a sandwich type enzyme immunoassay for native hCG was developed with solid phase monoclonal antibody against the conformational determinant expressed only on native hCG and horseradish peroxidase conjugated monoclonal antibody against the $\beta$-subunit of hCG. The assay was sensitive to 1 mIU hCG/ml and shown a linear response up to 200 mIU hCG/ml. The cross reactivity for luteinizing hormone and $\beta$-subunit of hCG were 1% and 0.18%, respectively.
A one-step, two-site enzyme immunoassay was developed for measuring human alpha-fetoprotein (AFP) in serum and amniotic fluid using monoclonal antibodies (McAb) by eliminating the high-dose hook effect. Three McAbs that recognize different epitopes were selected among 16 different clones on the basis of epitope mapping, two for immobilization and one for horseradish peroxidase conjugation. This one-step immunoassay system is more convenient and rapid compared to a conventional two-step sandwich immunoassay system. It did not exhibit the hook effect to around 2.7 mg/ml of AFP, which is probably one of the highest concentrations of AFP in the serum. The dose-response curve of the system was linear to 500 mg/ml of AFP and the system could differentiate as low as 1 mg/ml of AFP The intra- and inter-assay variations were in an acceptable range; 95~104% and 97~105% respectively Its correlation with other commercial systems was around 95%.
Park, Kyeong-Mee;Jeong, Tae-Cheon;Kim, Young-Sook;Shin, Han-Jae;Nam, Ki-Yeul;Park, Jong-Dae
Natural Product Sciences
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v.6
no.1
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pp.31-35
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2000
Effects of red ginseng acidic polysaccharides (RGAP) on immune system were studied. The proliferation of spleen cells was induced by RGAP treatment per se. Cotreatment of lipopolysaccharide $(100\;{\mu}g/ml)$ or concanavalin A $(1\;{\mu}g/ml)$ with RGAP further stimulated the spleen cell proliferation. BALB/c mice treated with RGAP showed a slight splenic hyperplasia and increased antibody forming cell response to sheep red blood cells. Flow cytometry analysis revealed an influx of macrophages in the mice treated with RGAP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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