Thirty strains of methicillin resistant Staphylococcus aureus were obtained from the clinical isolates. In order to investigate the pursuit of the pathogens of nosocomial infection, these strains were studied for antibiotic sensitivity as well as its resistant pattern. Among the methods of hybridization which directly confirm the specific antibiotic resistant genes by means of the recently developed specific probe DNA, dot blot hybridization and southern blot hybridization were performed and these two methods were compared in their sensitivity and specificity. Strains that is sensitive to cephalothin to the subject of methicillin resistant Staphylococcus aureus were in 43%. Those that are sensitive to cefoperazone and cefuroxime were 26% and 23%, respectively. In case of MIC, MIC50 of cefoperazone was 8 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$, and MIC90 was 128 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ to be the lowest. As the results of plasmid DNA electrophoresis, most of methicillin resistant Staphylococcus aureus strains had more than 4 plasmids. These plasmids digested by BamHI, methicillin resistant Staphylococcus aureus is distributed as 10 fragments with the size of 65 kb to 1.5 kb. Dot blot hybridization were performed to examine the existence of mecA gene to show the detection rate of 50%. Southern blot hybridization were done to see if DNA bands which amplify the activity of digoxigenium-labeled probe by PCR were actually PCR products of mecA gene and it showed the detection rate of 53%. It can be concluded that the southern blot hybridization seemed to be better in sensitivity and specificity when it is compared with the results of dot blot hybridization.
A comparative study was performed with 176 cultures of Salmonella organisms on tetracyline, neomycin and colistin in order to find out the relationship between the results obtained from the Ericsson's single disk method and the tube dilution method of antibiotic sensitivity tests which may be carried out in many hospital laboratories. With tetracycline, thirty-three out of 163 cultures of Salmonella typhi were found to be either sensitive or moderate sensitive by means of the disk method and thirty one(ca 94%) out of the thirty three cultures showed less than 1.0 ${\mu}g$ of the Minimal Inhibitory Concentretions(MIC) in the tube-dilution tests, which mean that there were a quite good agreement between the two methods. With neomycin, a hundred and five out of 163 S.typhi were appeared to be either sensitive or moderate sensitive by means of Ericsson's single disk method, among which 103 cultures showed less than 10.0 ${\mu}g$ MIC in the tubedilution method. And also there was a quite correlative pat. terns observed in the result of testing with 13 salmonella cultures other than S. typhi. With colistin, it was hard to observe any particular tendency in the distribution of plotting for 148 cultures showing less the 18 mm in the inhibiting zone diameters between MIC and disk sensitivity patterns except the fifteen, cultures out of 176 salmonella, which appeared to be sensitive in the single disk method and showed less than 1.0 ${\mu}g$ MIC in the tube dilution method.
This study investigated the effect of low dose ${\gamma}$-irradiation on the damage of the cell envelopes and antibiotic sensitivity profiles of Bacillus cereus, Escherichia coli, and Salmonella Typhimurium. The bacteria suspension in tryptic soy broth was exposed to the ${\gamma}$-irradiation doses of 0, 1, 1.5, 3, and 5 kGy, and then stored at $0^{\circ}C$ for 24 h. A viability test, an antimicrobial sensitivity profile, and an electron microscopy were performed to observe the effects due to ${\gamma}$-irradiation treatment. B. cereus could survive the ${\gamma}$-irradiation up to 5 kGy while E. coli and S. Typhimurium were all deactivated at 1.5 kGy and 5 kGy, respectively. At 5 kGy, the cell count of B. cereus was significantly reduced, and the survived bacteria cells retained their important features. There were no significant changes observed in the antimicrobial sensitivity profile (p>0.05) for the recovered bacteria after irradiation treatment. Low dose ${\gamma}$-irradiation below 3 kGy was found to be insufficient to achieve decontamination of B. cereus and S. Typhimurium. Cell envelope damage and deactivation of different bacteria did not occur in the same manner; thus, deferent doses of ${\gamma}$-irradiation may be required for deactivation of different bacteria.
Porcine E coli infection is a disease caused by Enterotoxin produced by Enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC). Enteric colibacillosis has become an economically important disease in pigs as a result of increasing intensification of farrowing management. The present study undertaken to obtain the antibiotic sensitivity and distribution of serogroups and pili producibility test of ETEC from E. coli isolates in Chonnam. The results obtained were as follows. 1. A total of 71 isolates identified as E, coli employing IMViC system from rectal specimens of 54 piglets with diarrhea. 2. In antibiotic sensitivity test, isolates showed high sensitivity to AN, CM, Fox, GM, but resistance to EM, NA TC. 3. The distribution of 25 Isolates of serogroups were 0141:K85(11.3%), 08:K87(8.5%), 064:K (5.6%), 0138:K8l (4.2%), 0139 :K82(2.8%), 0157:K88ac(1.4%) and 0149:K9l (1.4%). 4. MRHA of guinea pig erythrocytes was detected in 8 out of 25OK serotypes and 9 out of 46 unidentified serotypes. MRHA titers of serotypes showed from 64 to 128 in 0141: K85, 2 in 0138:K8l and no titers in 0139:K82. 5. The production of heat labile enterotoxin of ETEC was detect 39 out of 52 isolates showed $\beta$-hemolysin, 7 out of 52 isolates showed ${\gamma}$-hemolysin and 6 out of 52 isolates showed ${\gamma}$-hemolysin by $GM_1$ganglioside ELISA. The distribution of LT toxin were in 12 isolate showed $\beta$-hemolysin, 2 isolates showed ${\alpha}$-hemolysin and 3 isolates showed ${\gamma}$-hemolysin in 25 OK serotypes.
The essential oil fraction was extracted from the aerial parts of the plant by steam distillation method and its composition was analyzed by GC-MS (gas chromatography-mass spectrometry) which led to the identification of 43 compounds. Dehydroelsholtzia ketone (56.81%) and elsholtzia ketone (30.05%) were identified as the predominant components of this oil. The antibacterial activities of the essential oil fraction were assessed by micro-dilution tests against antibioticsusceptible and -resistant strains of Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Salmonella enteritidis, and S. typhimurium. The oil inhibited most of the tested strains significantly resulting MICs (minimum inhibiting concentrations) between 2 mg/ml and >16 mg/ml. In most cases of this study Streptococcus pneumoniae and Staphylococcus aureus showed higher sensitivity to this oil than Salmonella strains.
Kim, Jun-Seob;Cho, Da-Hyeong;Park, Myeongseo;Chung, Woo-Jae;Shin, Dongwoo;Ko, Kwan Soo;Kweon, Dae-Hyuk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권2호
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pp.394-401
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2016
Recently, the clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-associated protein 9 (CRISPR/Cas9) system, a genome editing technology, was shown to be versatile in treating several antibiotic-resistant bacteria. In the present study, we applied the CRISPR/Cas9 technology to kill extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Escherichia coli. ESBL bacteria are mostly multidrug resistant (MDR), and have plasmid-mediated antibiotic resistance genes that can be easily transferred to other members of the bacterial community by horizontal gene transfer. To restore sensitivity to antibiotics in these bacteria, we searched for a CRISPR/Cas9 target sequence that was conserved among >1,000 ESBL mutants. There was only one target sequence for each TEM- and SHV-type ESBL, with each of these sequences found in ~200 ESBL strains of each type. Furthermore, we showed that these target sequences can be exploited to re-sensitize MDR cells in which resistance is mediated by genes that are not the target of the CRISPR/Cas9 system, but by genes that are present on the same plasmid as target genes. We believe our Re-Sensitization to Antibiotics from Resistance (ReSAFR) technology, which enhances the practical value of the CRISPR/Cas9 system, will be an effective method of treatment against plasmid-carrying MDR bacteria.
Augmentin is a formulation of amoxycillin trihydrate and potassium clavulanate, a fused beta-lactam molecule produced by the fermentation of Streptomyces clavuligerus. Most clinically important resistance is due to the production by bacteria of antibiotic destroying enzymes. In the case of penicillins and cephalosporins these enzymes are termed beta-lactamase as they destroy the beta-lectern ring of these antibiotics, completely inactivating them. The presence of clavulanic acid extends the spectrum of amoxycillin to include bet On clinical study of the intravenous Augmentin in the field of thoracic and cardiovascular surgical cases, we selected randomly 30 patients, 21 male and 9 female, age from 13 to 72, in the period from April to December 1985. Among the total 30 patients, 22 were preoperatively infected [11 thoracic empyema, 5 lobar pneumonia, 2 lung abscess, 2 bronchiectasis, one acute pyelonephritis with ureter stone and one rheumatic carditis], and 8 were not infected preoperatively [Table 1, 2]. Of the preoperatively infected group, 11 cases [50%] were culture positive [4 staphylococcus, 3 pseudomonas, 2 Serratia group, and one E. coli], and preoperatively non-infected group [8 cases] revealed expectedly negative findings on bacterial culture. All of the culture positive bacteria were sensitive to Augmentin on disc culture sensitivity test except one case of E. coli. Daily doses of intravenous Augmentin were 2.-1-6.0gm divided in 2-5 injections. Every injection administered [1.2gm at Augmentin dissolved in 20ml distilled water] slowly for more than 20 minutes. Duration of injection was variable according to the clinical conditions from minimum 5 to maximum 31 days. The results of antibiotic treatment with Augmentin and some other antibiotic combinations pre- and postoperatively were subgrouped as EXCELLENT, EFFECTIVE, and FAILURE. Clinical criteria of the therapeutic result were symptomatic, objective and laboratory improvement. 8 cases were excellent, 13 effective, and one failure among the preoperatively infected group, and all 8 cases of the preoperatively non-infected group were effective as pro;hylactive antibiotic therapy. Overall effective ratio was 97% in both subgroup. There was no side effect clinically and laboratory study including liver and kidney function test during and after the I.V. administration of Augmentin. Oral swallow tablets which were administered after discharge from hospital also revealed good effects with some degree of gastrointestinal trouble.
Song, Hun-Suk;Bhatia, Shashi Kant;Choi, Tae-Rim;Gurav, Ranjit;Kim, Hyun Joong;Lee, Sun Mi;Park, Sol Lee;Lee, Hye Soo;Joo, Hwang-Soo;Kim, Wooseong;Seo, Seung-Oh;Yang, Yung-Hun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권1호
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pp.115-122
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2021
Phenol-soluble modulins (PSMs) are responsible for regulating biofilm formation, persister cell formation, pmtR expression, host cell lysis, and anti-bacterial effects. To determine the effect of psm deletion on methicillin-resistant Staphylococcus aureus, we investigated psm deletion mutants including Δpsmα, Δpsmβ, and Δpsmαβ. These mutants exhibited increased β-lactam antibiotic resistance to ampicillin and oxacillin that was shown to be caused by increased N-acetylmannosamine kinase (nanK) mRNA expression, which regulates persister cell formation, leading to changes in the pattern of phospholipid fatty acids resulting in increased anteiso-C15:0, and increased membrane hydrophobicity with the deletion of PSMs. When synthetic PSMs were applied to Δpsmα and Δpsmβ mutants, treatment of Δpsmα with PSMα1-4 and Δpsmβ with PSMβ1-2 restored the sensitivity to oxacillin and slightly reduced the biofilm formation. Addition of a single fragment showed that α1, α2, α3, and β2 had an inhibiting effect on biofilms in Δpsmα; however, β1 showed an enhancing effect on biofilms in Δpsmβ. This study demonstrates a possible reason for the increased antibiotic resistance in psm mutants and the effect of PSMs on biofilm formation.
A total of 360 Staphylococcus isolates from 26 raw cow milk sample in milk plants of Jeonju district during Octover 1977, identified by $7.5\%$ salt resistant reaction and other biological properties. Antibiotic sensitivity test was also perfor
Membrane proteins of facultatively anaerobic Escherichia coli K12 which was logarithmically grown in aerobiosis and anaerobiosis were compared on 5 to 10% liner gradient gel electrophoresis (Na Dod $SO_4 -PAGE$). Membrane proteins were formed as different patterns between aerobiosis and anaerobiosis. Among them, 91Kdal protein (pbp1a) was not synthesized in aerobiosis and 60Kdal protein (fts cluster), in anaerobiosis. Thereby cells cultured aerobically were differenciated as diversiform cell shape, comparing cells cultured anaerobically and the latter were resistant to penicillin G. Thus it is believed that in facultative anaerobes atmospheric oxygen regulated the synthesis of membrane proteins and even the expression of equivalent genes, and moreover alleviated the resistance to an antibiotic penicillin.
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