Purpose: Recombinant ScFv lym-1 was produced, using pET vector system for large scale production. Methods: ScFv lym-1 gene inserted pET-22b (+) vector, was expressed in E.coli BL-21 strain. ScFv lym-1 antibody extracted from periplasm, was purified with His-Taq column. To evaluated immunoreactivity with Raji cell, ScFv lym-1 was labeled with I-125 and I-125 ScFv lym-1 was purified with desalting column. Raji cell was injected into the C57BR/cdJ SCID mice. Gamma camera imaging were taken time point at 1, 8, 24, and 48 hr with 8 mm pinhole collimator. Results: An active scFv lym-1 could be produced in E. coli with soluble iron using PET vector system. Immuuoreaetivity and affinity constant of IgG lym-1 were 54% and $1.83{\times}10^9M^{-1}$, respectively, and those of scFv lym-1 were 53.7% and $1.46{\times}10^9M^{-1}$, respectively. Biodistribution of I-125 scFv lym-1 antibody showed faster clearance in blood, spleen, kidney and than I-125 IgG lym-1 antibody. Gamma camera image of I-125 scFv lym-1 antibody showed faster clearance and tumor targeting liver than I-125 IgG lym-1 antibody. Conclusions: In vitro properties of scFv lym-1 were similar to those of IgG lym-1. ScFv lym-1 showed faster blood clearance than IgG lym-1 There results suggest that scFv lym-1 antibody can be useful for tumor imaging agent.
Snail is a zinc finger transcription factor that induces epithelial-to-mesenchymal transition (EMT), which promotes tumor invasion and metastasis by repressing E-cadherin expression. In addition, Snail restricts the cellular apoptotic response to apoptotic stimuli or survival factor withdrawal; however, its molecular mechanism remains largely unknown. In this study, we have investigated the mechanism underlying Snail-mediated chemoresistance to 5-fluorouracil (5-FU), one of the most widely used anti-cancer drugs. When Snail was overexpressed by doxycycline (DOX) in MCF-7 #5 cells, it inhibited 5-FU-induced apoptotic cell death and switched the cell death mode to necrosis. Snail expression, either by DOX treatment in MCF-7 #5 cells or by the transfection of Snail expression vectors pCR3.1-Snail-Flg, phosphorylation-resistant pCR3.1-S104, and 107A Snail-Flg in MCF-7 cells specifically induced PTEN down-regulation/inactivation and Akt/PKB activation, without affecting ERK1/2 activity. In addition, Snail prominently suppressed 5-FU-induced increases in p53 levels. These findings demonstrate that Snail switches 5-FU-induced apoptosis to necrosis through the activation of Akt/PKB and the down-regulation of p53 levels.
This study investigated that anti-browning effects of Atractylodis Rhizoma Alba extract and L-cysteine combination. Mushrooms were dipped in solutions (0.1% Atractylodis Rhizoma Alba extract containing 0.05% L-cysteine) for 3 min. The dipped mushrooms were packaged in a polystyrene (PS) tray and wrapped with a polyvinyl chloride (PVC) film, and stored for 14 days at $10^{\circ}C$. The browning inhibition activity (Hunter L, a, b color scale and tyrosinase inhibition activity) and quality changes (weight loss rate, gas composition, firmness and sensory evaluation) were analyzed during storage period. After 14 days, the Hunter L and ${\Delta}E$ value of mushrooms treated in 0.1% Atractylodis Rhizoma Alba extract containing 0.05% L-cysteine were 87.24 and 5.56, respectively. The mushrooms treated with 0.1% Atractylodis Rhizoma Alba extract containing 0.05% L-cysteine also showed higher firmness (13.31 N) and smaller weight loss rate (2.87%) than the untreated mushroom (11.42 N, 3.04%) on storage day 14. During storage period, the sensory evaluation showed that overall acceptability of mushrooms treated with 0.1% Atractylodis Rhizoma Alba extract containing 0.05% L-cysteine were higher than those of the untreated mushrooms, except those that were stored for five days. Overall, the mushrooms treated with 0.1% Atractylodis Rhizoma Alba extract containing 0.05% L-cysteine had a higher tyrosinase inhibition activity than the untreated mushrooms during storage period. This study suggests that the browning of the mushrooms treated with 0.1% Atractylodis Rhizoma Alba extract containing 0.05% L-cysteine solution were inhibited, and the that their shelf life was extended.
Kim, Ji-Soo;Heo, Jin-Sun;Choi, Jong-Won;Kim, Gun-Do;Sohn, Kie-Ho
Journal of Life Science
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v.25
no.10
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pp.1081-1090
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2015
Diabetes has been one of major health risks in industrialized countries. Allium hookeri is a wild herb distributed in India and Myanmar. The root of the plant has been used as food and medicine in Southeast Asia. We investigated Allium hookeri extract improves type 2 diabetes mellitus in C57BL/KSJ db/db obese mouse. C57BL/KSJ db/db obese mouse arise out of Type 2 diabetes and we treated Allium hookeri methanol extract 400 mg/kg (AH 400), 800 mg/kg (AH 800), positive control group (thiazolidinedine;TZDs) were administered orally for 8weeks. AH treated group normalized lipid enzyme system (triglyceride, total cholesterol, HDL-cholesterol and LDL-cholesterol) and serum glucose, HbA1c and plasma insulin level. AH treated group recovered β-cell damage by hyperglycemia and fatty liver disease. AH treated group significantly up regulated expression of Peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR-γ), pyruvate dehydrogenase kinase4 (PDK4), Sterol regulatory element-binding protein 1c (SREBP 1) and fork head box O1 (FOX 01) proteins in C57BL/KSJ db/db obese mouse liver. And we found that AH treated group decreased hepatic malondialdehyde formation in C57BL/KSJ db/db obese mouse liver. These results indicate that Allium hookeri methanol extract might be a potential anti-diabetic agent and could be useful in the treatment of type 2 diabetes mellitus.
The red pepper (Capsicum annuum L.) is one of the most important vegetables in traditional Korean food, containing vitamins A, C, and E, polyphenol, and flavonoids. In addition, red peppers have high anti-oxidant ability and are known to be effective in preventing obesity, diabetes, hypertension, digestive disorders, stress, and aging. In this study, we investigated the effects against obesity and diabetes of both fermented and non-fermented red pepper. C57BL/6N mice with induced obesity from an eight-week 45% high fat diet (HFD) were then fed either an HFD or diets containing 2.5% non-fermented red pepper marc (NRM), 1.25% fermented red pepper marc (FRM), or 2.5% FRM for a further eight weeks. An oral glucose tolerance test was performed seven weeks after dietary intake, and body weight, liver, epididymal fat weight, serum insulin level, and HOMA-IR were measured and a lipid content test performed at eight weeks. The results show that the 2.5% FRM diet reduced body and tissue weight, lipid content, serum insulin levels, and HOMA-IR compared to the 2.5% NRM and HFD diets. These results suggest that fermented red pepper is effective against obesity and diabetes. We will use this information as the basic data for the development of health food materials using red pepper.
The objective of this study was to investigate levels of serum creatinine, CuSOD and MnSOD protein expression in the kidney after renal ischemic reperfusion with pre-exercise using heat shock protein 70.1 in knock-out mice (KO). The C57/BL6 strain (Wild type: WT) and KO were divided into 4 groups as follows: Sham control group (Sham), pre-exercise group (Ex), pre-exercise +ischemia group (Ex+IR), and ischemia group (IR). CuSOD and MnSOD expression were significantly decreased (p<0.01, p<0.05) and blood creatinine concentration was significantly increased (p<0.01) in the IR group of KO. In contrast, CuSOD and MnSOD expression in the Ex+IR group of KO were higher than the IR group, while creatinine concentration was significantly lower. These results suggest that Hsp70 is directly correlated to renal ischemic reperfusion injury. Pre-exercise in renal ischemia might prevent or inhibit positive oxidative stress inhibitory effects by increasing anti-oxidative enzymes (CuSOD, MnSOD) within the kidney and improve to prevent renal function. Thus, pre-exercise may have a protective role against renal injury after renal ischemia.
A pathogenic free-living amoeba, Naegleria fowleri, causes primary amoebic meningoencephalitis to human and experimental animals. This infection is rare, but the mortality is very high. Nowadays, drug treatment or active immunization of human or mice are being tried with partial effectiveness. This study shows passive immunization effect by transfer of immunized spleen cells, serum, or milk from immunized mother in mouse experimental model. Young BALB/c mice were immunized intraperitoneally with $2~3{\times}10^{6}$ trophozoites of N. fowleri, and spleen cells and sera were collected for injection to recipient mice. There were seven transfer groups, i.e., immunized mouse serum, spleen cells, serum and spleen cells, normal mouse serum, spleen cells, serum and spleen cells, and control group. Three days later, BALB/c mice were inoculated with $1{\times}10^{4}$ trophozoites of N. fowleri intranasally. After infection, decreased mortality ana prolonged survival time of mice were noted in immunized Bloops compared with non.immuniBed control group. The groups Injected with immunized spleen cells or normal serum shewed lower moltality than that of controls bult showed no changes of Serum IgG level. The groups injected with immunized serum or normal spleen cells showed increased serum IgG level after immunization but hundred percent mortality was observed. Mother mice were ifnfnunised increperitqneeliy with $2~3{\times}10^{6}$ trephozoites of N. fowleri at the end of pregnancy and weaning Period. Soon after the delivery, Jitters born of non-immunszed mother were matched with immunized mother for feeding immune milk. After three weeks, the litters were infected with $1{\times}10^{4}$ trophozeites of N. fowleri or sacrificed for serum collection to measure the IgG levels. The results show that anti-JV. fowleri IgG from mother was transferred to litter through milk but this IgG did not inauence the mortality or survival time of the infected mice.
Kim, Mi-Sun;Kwon, Kyung-Jin;Lee, Min-Jin;Ahn, Seon-Mi;Sohn, Ho-Yong
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.40
no.2
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pp.144-151
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2012
In the course of this study aimed at the development of functional food ingredients from seaweeds, the in vitro antimicrobial activities of methanol extracts prepared from 35 different seaweeds (17 phaeophyta, 11 rhodophyta and 7 chlorophyta) were determined against food-borne diseases and pathogenic microorganisms including multi-drug resistant (MDR) Pseudomonas sp. and Candida sp. Based on disc-diffusion assays at 500 g/disc concentration of the methanol extracts, Ishige okamurai, I. foliacea, Sargassum confusum, and S. yamade exhibited strong antibacterial activities in a broad-spectrum, except against Pseudomonas aeruginosa. In addition to the latter four seaweeds, Ecklonia stolonifera, E. cava and Eisenia bicyclis also demonstrated antifungal activity against C. albicans. Among these 8 selected seaweeds, I. okamurai, I. foliacea, and S. yamade exhibited strong hemolytic activity (55-93%) at 500 g/ml against human RBC. Organic solvent sequential fractions using hexane, ethylacetate and butanol, and water residues were prepared from the 8 selected seaweeds and their anti-Candida sp. activities were further determined. The ethylacetate and butanol fraction of I. okamurai, and the hexane fraction of I. foliacea demonstrated antifungal activity against MDR-pathogenic Candida sp. Although the solvent fractions had no activity against MDR-Pseudomonas sp., our results suggest that seaweeds, especially Ishige okamurai, I. foliacea, S. confusum, and S. yamade could be developed as broad-spectrum antimicrobial ingredients.
Sa, Young-Hee;Kim, Hyun Joo;Kweon, Tae Dong;Kim, Ji-Young;Lee, Bae Hwan;Hong, Seong-Karp
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
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2018.05a
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pp.584-587
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2018
Many viruses including mouse hepatitis virus, corona, measles, and sidbis viruses are known as causative virus of inducing demyelination which means destruction of myelination in nervous system of mice. The purpose of this study is to investigate processing of myelination by co-culture of Schwann cells and neuronal cells and demyelination induced by infection of sindbis virusin rat. Schwann cells and neuronal cells from dorsal root ganglion (DRG) in embryos (E16) of rat were cultured in vitro respectively. The purified neuronal cells with anti-mitotic agents and purified Schwann cells were co-cultured. After that, infection of sindbis virus into this myelinated co-culture system was performed. Myelination and demyelination process were observed using antibody of myelin basic protein meaning presence of myelination.We identified myelination and demyelination processing using antibody of peripheral myelin protein 22 (PMP 22) meaning presence of myelinated neuron. This study was supported by the Basic Research Program through the National Research Foundation (NRF) funded by the Ministry of Science, ICT & Future Planning (NRF-2015R1C1A1A01053484 and 2017R1A2B3005753).
Beimu (Fritillaria thunbergii Miquel), a bulbous plant of Liliaceae found in Korea, Japan and China, has been used as an antitussive and expectorant agent, and is also useful in alleviating stonsillitis and bronchiolitis. Most researches have been focused on micro-propagation and plant regeneration, component analysis, and dormancy relieving of beimu. Reports regarding the biological activity of beimu, such as anti-Helicobacter pyroli or platelet aggregation inhibition activity, are few and not widely available. In this study, methanol extract and its organic solvent fractions were prepared from Fritillaria thunbergii Miquel and their antimicrobial, antithrombin, and antioxidant activities were evaluated, respectively. The methanol extract contained lots of water-soluble materials (58.98%) and hexane-soluble oils (14.85%). The ethylacetate and butanol fraction at $500{\mu}g$/disc concentration showed strong antibacterial activity against tested bacteria, except Escherichia coli. Antifungal activity was not observed in methanol extract and its fractions. The hexane, ethylacetate and butanol fractions showed strong antithrombin activity at 4.8 mg/ml concentration. Especially, the ethylacetate fraction showed 95.4 sec of thrombin time at a concentration of 1.2 mg/ml, which is comparable to aspirin, a widely used antithrombosis agent. For antioxidation activity, the ethylacetate and butanol fraction showed good 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl scavenging activity ($IC_{50}$ of $344{\sim}368{\mu}g$/ml). In superoxide dismutase-like activity and reducing power, the fractions showed $20{\sim}25%$ of vitamin C, and $51{\sim}54%$ of butyl hydroxytoluene, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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