6개 고추재배지의 근권 및 해안가 토양으로부터 고추 역병균(Phytophthora capsici)과 벼 도열병균(Magnaporthe grisea)에 길항효과가 있는 53개의 방선균을 분리하였다. 분리된 방선균 중에서 고추 역병균의 균사생장을 억제시켜 5 mm 이상 저지원을 형성하는 32균주를 선발하여 이들 균주의 균총형태, 색깔 등에 따라 20군으로 유별하였다. 이들 길항방선균의 고추 역병균에 대한 길항효과는 균주간에 매우 다양하여 V-8 juice agar에서 5.7-17.5, tryptic soy agar에서는 2.5-l7mm의 저지효과를 보였다. 몇가지 방선균의 길항효과는 두 배지에서 상당히 다르게 발현되었다. 길항균들은 비교적 넓은 항진균성 스펙트럼을 나타내었으나, 세균에 대해서는 Pseudomonas solanacearum을 제외하고는 항균작용이 거의 없었다. 길항방선균 배양여액의 butanol 추출액이 고추 역병균과 벼도열병균의 균사생장을 억제하는 것으로 보아서 이들 길항균이 항균물질을 생성함을 강하게 시사하고 있다. 몇가지 길항방선균의 배양여액은 고추 역병방제 효과가 뚜렷하였다.
An appropriate amount of samples, collected from three each paddy forest, field and riverside soil near Taegu city, was suspended in sterile water and then diluted in order to isolation of antagonistic to oral cancer. The diluted samples were inoculated on separating medium in the routing spreading method. So, seven hundred and eighteen strains were isolated on HV agar and 220 strains were on methanol medium from soil samples. So, during the screening of anti-oral cancer activity from soil, we isolated microorganisms showing powerful antagonistic activity. Among them, No. 78 strain exhibited the most strongly anti-oral cancer activity. Microbiological properties were investigated by the methods described in the Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and experimental methods of identification of actinomycetes by Hamada et al. As a result, a methylotrophic actinomycetes strain No. 79 was estimated as Amycolatopsis sp. based on taxonomic studies.
A serious leaf disease caused by Colletotrichum dematium was found during the cultivation of Sarcandra glabra in Jingxi, Rong'an, and Donglan Counties in Guangxi Province, which inflicted huge losses to plant productivity. Biological control gradually became an effective control method for plant pathogens. Many studies showed that the application of actinomycetes in biological control has been effective. Therefore, it may be of great significance to study the application of actinomycetes on controlling the diseases caused by S. glabra. Strains of antifungal actinomycetes capable of inhibiting C. dematium were identified, isolated and screened from healthy plants tissues and the rhizospheres in soils containing S. glabra. In this study, 15 actinomycetes strains were isolated and among these, strains JT-2F, DT-3F, and JJ-3F, appeared to show antagonistic effects against anthracnose of S. glabra. The strains JT-2F and DT-3F were isolated from soil, while JJ-3F was isolated from plant stems. The antagonism rate of strain JT-2F was 86.75%, which was the highest value among the three strains. Additionally, the JT-2F strain also had the strongest antagonistic activity when the antagonistic activities were tested against seven plant pathogens. Strain JT-2F is able to produce proteases and cellulase to degrade the protein and cellulose components of cell walls of C. dematium, respectively. This results in mycelia damage which leads to inhibition of the growth of C. dematium. Strain JT-2F was identified as Streptomyces tsukiyonensis based on morphological traits and 16S rDNA sequence analysis.
Recently, the importance of management and cultivation of grasses has been increased in Korea. Among these cultural practices, the appropriate control of diseases is considered more important than other cultivation techniques such as fertilization and irrigation. The damages of brown patch and large patch caused by Rhizoctonia spp. and Pythium blight caused by Pythium spp. are serious in the major cultivation area of turfgrass in Korea. Since these diseases are difficult to control by agrochemicals, the damages are very serious if these are occured. The periodic spray of agrochemicals, to protect and control these diseases could make some problems of toxicity and environmental pollution as well as rising of non-target diseases. Therefore, the biological methods to control diseases have been required to decrease problems resulted from overuse of agrochemicals, to conserve natural ecosystem, and to control effectively diseases of grasses in the long period. The number of studies about biological control using antagonistic microorganisms have been increased for last half century. However, the application of biological control method has been very limited. In this study, thirteen isolates of R. cerealis, 8 isolates of R. solani and 3 isolates of Phthyn spp. have been isolated from diseased turfgrass in golf course and grass-culture area that have patch and wilting symptoms of zoysia grass and creeping bentgrass. Isolation frequency of R. cerealis and R. solani was high in especially zoysiagrass, while Pythym spp. was isolated from bent grass at low frequency but showed high pathogenicity. Totally, 205 isolates of soil microorganisms were isolated in this study as primary antagonistic microorganism by Herr's triple agar layer plate and dual culture method using rhizosphere of grasses, soil of crop field as the source of antagonistic microorganisms. Among the 205 isolates, 23 isolates were actinomycetes and 182 isolates were bacteria. All of the actinomycetes were isolated by Herr's method. Antagonistic effect of primary isolated microorganisms was tested for in vitro mycelial growth inhibition against pathogenic fungi isolated from grasses and for inhibition of disease occurrence in 24 well tissue culture plate and pot experiment. Then, four isolated of bacteria which are BG23, BG74, BG136 and BG171 were selected as antagonistic microorganisms against soil-born pathogenic fungi of bentgrass.
The white cottony stem rot pathogen Sclerotinia scierotiorum was subjected to 70 different isolates of actinomycetes indigenous to Jordan as biological control agents. Forty of them demonstrated chitinase activity on crab shell chitin agay (CCA) media and they were segregated into three groups: 14 highly active, 12 moderately active, and 14 with low activity, with average clearing zones of (4.7-8.3), (3.7-4.3), and (2.3-3.3) mm surrounding colonies on CCA, respectively. Further, these isolates were able to inhibit radial mycelium growth of the pathogen and were categorized into three antagonistic groups: 13 strong, 13 moderate, and 14 weak antagonists, with antibiosis inhibition Bones of (32.0-45.7), (22.7-31.3), and (3.7-22.3) mm, respectively. High levels of chitinase activity of the isolates Ma3 (8.3 mm), Jul (7.7 mm), and Sa8 (7.7 mm) with their antagonistic activity against mycelium growth of 45.7, 44.3, and 40.7 mm were observed, respectively. These isolates exhibited fungicidal activity against sclevotia of S. sclerotiorum. On the other hand, isolates Na5, Aj3, and Aj2 that produced no chitinase showed fungistatic effect only.
Seventy four microorganisms, which have antagonistic activity against to Fusarium culmorum, were tested for their inhibitory effect on colony development of obligate biotroph Erysiphe graminis f. sp. hordei Marchal, the causal agent of powdery mildew on barley plants. Of these, 13 actinomycetes isolates were shown to reduce the colony development of mildew completely by application of their 10% cell-free culture filtrates on barley leaves. An Isolate, A252, was the most powerful antagonist and its antifungal activity was further assessed. The colony development of mildew was significantly reduced by application of the 1% cell-free culture filtrate of isolate A252. In comparison to the control, the protective and curative application of 10% cell-free culture filtrate from A252 showed 88.5% and 96.1% reduction of colony numbers respectively. By the protective application, 68.3% of the inhibition was observed after 9 days of treatment, thus showed prolonged inhibitory effect. In vitro test, complete inhibition of the mycelial growth of Microdochium nivale was achieved by the treatment of 1% A252 culture filtrate and 80.2% of inhibition was observed by the 0.1% treatment.
Rusty root, the browning disease on ginseng, decreases quality and value. Recent studies indicated that endophytic bacteria could be a possible cause of rusty root. Actinomycetes antagonistic to the rusty-root-causing bacteria were isolated from soil. Twenty nine out of 932-isolates of Actinomycetes from soil showed antibacterial activity against Agrobacterium tumefaciens and Pseudomonas veronii an endophytic isolate in ginseng. The strongest antibacterial strain(ATO4O104) was classified based on 16S rDNA sequence. The Actinomycetes strain, ATO4O104, isolated in soil of USA volcano national park was identified as Streptomyces adephospholyticus. To test plant toxicity, radish seeds were sprouted with the culture of S. adephospholyticus and it did not show any harmful effect. The butanol partition out of n-hexane, ethyl acetate, butanol, and water partions showed the highest antibacterial activity.
Antibiotic and physico-chemical properties of an active compound from actinomycetes isolate G-37, of which the culture filtrate had an inhibitory effect against tobacco mosaic virus(W) infection, were examined. The active compound, which was purified by ethylacetate extraction, silica gel column chromatography, preparative thin layer chromatography, and high performance liquid chromatography, showed strong antibacterial activities especially against Gram-positive bacteria including Bacillus subtillis, Sarcina lutea and Staphylococcus aureus. From the IH-NMR, FAB/RfS, UV spectral data, and physicochemical properties, the active compound of G-37 appears to belong to a peptide antibiotic group. Among the known peptide antibiotics in the antibiotic group, No. 280, A-30912, and Taitomycin showed molecular weights and ultra violet spectrum similar to those of the active compound from G-37, but was not identical to the compound, which suggests that it may be a new peptide antibiotics.
Endophytic bacterial communities of tidal flat plants antagonistic to oomycete plant pathogens were studied by the isolation of 256 root colonizing endophytic bacteria from surface-disinfected root tissues of six plants ($Rosa$$rugosa$, $Suaeda$$maritima$, $Vitex$$rotundifolia$, $Carex$$scabrifolia$, $Glehnia$$littoralis$ and $Elymus$$mollis$) growing in a tidal flat area of Namhae Island, Korea. To understand the antagonistic potential, an $in$$vitro$ antagonistic assay was performed to characterize and identify strains that were antagonistic to the oomycete plant pathogens $Phytophthora$$capsici$ and $Pythium$$ultimum$ from the total population. Nine percent of the total number of isolated bacteria exhibited in vitro inhibitory activity against target plant pathogenic oomycetes. Taxonomic and phylogenetic placement of the antagonistic bacteria was investigated by analysis of the 16S rRNA gene sequences. The sequence analysis classified the antagonistic strains into four major classes of the domain bacteria ($Firmicutes$, ${\alpha}-Proteobacteria$, ${\gamma}-Proteobacteria$ and $Actinomycetes$) and 10 different genera. Further production of secondary metabolites, hydrolytic enzymes and plant growth promoting traits were determined for the putative new species of antagonistic endophytic bacteria. These new strains could not be identified as known species of ${\alpha}-Proteobacteria$, and so may represent novel bacterial taxa. The unexpected high antagonistic bacterial diversity associated with the tidal flat plants may be indicative of their importance in tidal flat plants as a promising source of novel antimicrobial compounds and biocontrol agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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