1993년 4월에서 6월 사이에 강원도 속초시, 경남 양산군 기장읍 대변 및 충무시 어시장에서 구입한 멸치의 anisakid 유충 감염상을 알아보고자 하였다. 각 지역에서 구입한 멸치들을 실험실로 운반한 후 체장을 계측하고 각 개체별로 기관을 분리하여 입체현미경하에서 유충을 분리 수집하였다. 수집한 유충들은 lactophenol로 투명화 한 다음 계측 및 동정하였으며 각 지역별, 멸치 개체별, 멸치 기관별 유충감염량을 산정하였다. 충체의 형태적인 분류 결과 Anisakis type I과 II, Contracaecum B와 C형의 4종이 기생하고 있음을 확인하였다. 멸치 2,180마리 중 양성이 150 마리로서 6.9%의 감염율을 나타내었으며 멸치의 크기에 따른 감염율의 차이는 없었다. 멸치의 각 장기별 nisihid 유충의 감염율은 근육에서 56.1%로 가장 높았고. 망 38.0%, 장 4.1%, 위 1.7% 및 고환 0.6%의 순으로 나타났다. 해안 지역별 anisakid 유충의 감염율은 대변 5.1%. 속초 8.0% 및 충무 9.2%의 양성율이었다. 이 성적에 의하면 멸치 생식을 함으로서 anisakid 유충 인체 감염이 가능할 것으로 예상된다.
Kim, Bong-Jin;Kim, Sun-Mi;Cho, Min-Kyung;Yu, Hak-Sun;Lee, Yong-Seok;Cha, Hee-Jae;Ock, Mee-Sun
Parasites, Hosts and Diseases
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제50권2호
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pp.165-171
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2012
Larval excretory-secretory products of Anisakis simplex are known to cause allergic reactions in humans. A cDNA library of A. simplex 3rd-stage larvae (L3) was immunoscreened with polyclonal rabbit serum raised against A. simplex L3 excretory-secretory products to identify an antigen that elicits the immune response. One cDNA clone, designated as ${\alpha}$-methylacyl CoA racemase (Amacr) contained a 1,412 bp cDNA transcript with a single open reading frame that encoded 418 amino acids. A. simplex Amacr showed a high degree of homology compared to Amacr orthologs from other species. Amacr mRNA was highly and constitutively expressed regardless of temperature (10-$40^{\circ}C$) and time (24-48 hr). Immunohistochemical analysis revealed that Amacr was expressed mainly in the ventriculus of A. simplex larvae. The Amacr protein produced in large quantities from the ventriculus is probably responsible for many functions in the development and growth of A. simplex larvae.
Kim, Jung;Jo, Jin-Ok;Cho, Seon-Hee;Cho, Min-Kyoung;Yu, Hak-Sun;Cha, Hee-Jae;Ock, Mee-Sun
Parasites, Hosts and Diseases
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제49권2호
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pp.139-144
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2011
The present study was performed to estimate the seroprevalence of larval Anisakis simplex infection among the residents health-examined in 3 hospitals in southern parts of Korea. A total of 498 serum samples (1 serum per person) were collected in 3 hospitals in Susan Metropolitan city, Masan city, and Geoje city in Gyeongsangnam-do (Province) and were examined by IgE-ELISA and IgE-western blotting with larval A. simplex crude extract and excretory-secretory products (ESP). The prevalence of antibody positivity was 5.0% and 6.6% with ELISA against crude extracts and ESP, respectively. It was also revealed that infection occurred throughout all age groups and higher in females than in males. A specific protein band of 130 kDa was detected from 10 patients with western blot analysis against crude extract and ESP among those who showed positive results by ELISA. Our study showed for the first time the seroprevalence of anisakiasis in Korea. The allergen of 130 kDa can be a candidate for serologic diagnosis of anisakiasis.
Antibody changes in experimental anisakiasis were observed by ELlSA and SDS-PAGE/EITB using various antigens : whole worm extract antigen(WWE), somatic antigen(SOM), excretory-secretory antign(ES), and hemoglobin antigen(HB) of Anisakis Type 1. The results obtained were as follows. l) Serum levels of IgG antibody by ELISA increased from 1st week of infection and reached their maximum titer at 5th week after infection, and decreased gradually thereafter. 2) The best result expressed as positive/negative ratio could be obtained when ES antigen was used. 3) Silver stained SDS-PAGE of each antigen showed at least 20 protein bands : In WWE, 286, 278, 262, 38, 18 Kd bands ; In SOM, 38 Kd band : In ES, 286, 65, 13 Kd bands ; In Hb, 61, 55, 38, 28, 26, 22, 20, 16, 15 Kd bands iepntibied as were major bands. 4) By EITB using WWE, Serum antibody recognized major protein with molecular weight of 86 Kd and 16 Kd. Using ES, 69, 59, 16 Kd bands were observed and using Hb, 28 Kd band was observed as specific band. In conclusion, excretory-secretory antigen(ES) of Anisakis larvae was most usable for ELISA.
The present study was performed to determine the infection status of anisakid larvae in marine fish collected from 3 sea areas of the Republic of Korea. Total 86 marine fish (8 species) collected from the East Sea (Goseong-gun, Gangwon-do), 171 fish (10 species) from the South Sea (Sacheon-si, Gyeongsangnam-do), and 92 fish (7 species) from the Yellow Sea (Incheon Metropolitan City) were examined by both naked eyes and artificial digestion method. Among the total of 349 fish examined, 213 (61.0%) were infected with 8 species of anisakid larvae, i.e., Anisakis simplex, 6 types of Contracaecum spp., and Raphidascaris sp., and the mean larval density was 13.8 per infected fish. Anisakid larvae were detected in 45 fish (52.3%) from the East Sea, 131 fish (76.6%) from the South Sea, and 37 fish (40.2%) from the Yellow Sea. The average numbers of larvae detected were 4.0, 16.6, and 15.9, respectively. Anisakis simplex larvae were detected in 149 fish (42.7%), and the mean larval density was 9.0 per infected fish. They were found in 26 fish (30.2%) collected from the East Sea, 96 fish (56.1%) from the South Sea, and 27 fish (29.3%) from the Yellow Sea. The average numbers of larvae detected were 2.9, 10.3, and 10.5, respectively. Conclusively, the present study suggests that the infection rate and density of anisakid larvae are more or less higher in the fish from the South Sea than those from the East Sea or the Yellow Sea.
The infection status of marine fish and cephalopods with Anisakis simplex third stage larva (L3) was studied over a period of 1 year. A total of 2,537 specimens, which consisted of 40 species of fish and 3 species of cephalopods, were purchased from the Cooperative Fish Market in Busan, Korea, from August 2006 to July 2007. They were examined for A. simplex L3 from the whole body cavity, viscera, and muscles. A. simplex L3 were confirmed by light microscopy. The overall infection rate reached 34.3%, and average 17.1 larvae were parasitized per infected fish. Fish that recorded the highest infection rate was Lophiomus setigerus (100%), followed by Liparis tessellates (90%), Pleurogrammus azonus (90%), and Scomber japonicus (88.7%). The intensity of infection was the highest in Gadus macrocephalus (117.7 larvae per fish), followed by S. japonicus (103.9 larvae) and L. setigerus (54.2 larvae). Although abundance of A. simplex L3 was not seasonal in most of the fish species, 10 of the 16 selected species showed the highest abundance in February and April. A positive correlation between the intensity of L3 infection and the fish length was obvious in S. japonicus and G. macrocephalus. It was likely that A. simplex L3 are more frequently infected during the spring season in some species of fish. Our study revealed that eating raw or undercooked fish or cephalopods could still be a source of human infection with A. simplex L3 in Korea.
해산 어류의 하나인 봉장어(Astroconger myriaster: 속칭 아나고)는 우리 나라에서 인체 바니사키스증의 중요한 감염원 역할을 하고 있을 것으로 추측되고 있으나 실제 붕장어의 아니사키스 유충 감염 상황에 대한 보고는 없었다. 이에 저자 등은 노량진 수산시장에서 붕장어 26마리를 구입한 후 어체 부위 (내장, 근육, 머리와 껍질)별로 인공소화시킨 다음 아니사키스 유충을 수집하고 부위별 감염 상황, 유충의 종류 등을 조사하였다. 조사 결과 붕장어 26마리 중 IS마리(57.5%)에서 바니사키스 유충 총 1,351마리가 회수되었고, 부위별로는 내장이 1,269마리로 가장 많았으나 근육에서도 66마리, 머리와 껍질에서도 16마리의 유충이 각각 회수되었다. 회수된 아니사키스 유충은 모두 7종류이 었으며,, Anisakis type I (Berland, 1961)이 564마리, Contracaecum type A 및 type D(Koyama et at., 1969)가 각각 409마리 및 5마리, Contracaecum type C'및 type D'(Chai et nt., 1986)가 각각 83마리 및 117마리, Contrntaecum type V(Yamaguti, 1935)가 1마리로 분류되었고, 나머지 172마리는 이미 보고된 유형과는 다른 것이어서 ◎ontracaecu산 type A'(new type)로 제안하였다. 이상과 같이 아니사키스 유충은 우리 나라 근해산 붕장어에 농후하게 감염되어 있으며, 내장은 물론 근육에도 일부 기생하고 있음이 확인되었고, 유충 종류별로는 인체 기생을 잘 일으키는 Anigakis type I이 가장 많은 것으로 나타났다.
인체아니사키스증은 우리나라에서도 드물지 않게 발생하나 과거에는 수술에 의한 충체의 확인만이 진단이자 치료이어서 진단에 많은 어려움을 겪었다. 그러나 위내시경이 진단과 치료에 이용되면서 많은 중례의 발견을 가져오게 되었다. 그러나 증상이 심하지 않을 경우나 위내시경의 삽입이 어려운 장(장) 아니사키중 또는 만성 아니사키스중을 진단하기 위해서는 혈청학적 방법이 필요하다. 이 연구는 아니사키스중의 혈청학적 진단연구를 위해 붕장어에서 채집한 유충을 토끼에 10마리섹 감염시키고 IsM, IgG 항체의 출현시기와 변화양상을 ELISA와 SDS-PAGE/immunoblot으로 관찰하였다. 그 결과는 다음과 같다. 1. ELISA에 의하여 측정한 19M 항체는 감염 6일부터 증가하여 11일째 최고치에 도달한 후 35일 이후에는 감 염 전의 수준으로 저하하였고 IgG 항체가는 감염 6일부터 증가하여 26일째 최고치에 도달한 후 95일까지 감소하는 양상을 보였다. 2. 7.5∼15% SDS-PAGE에서 아니사키스추출액은 최소 41개 이상의 단백분회 을 나타냈으며 195, 145, 110, 104, 73, 69, 49, 42.5, 40, 34, 30, 24, 20, 16, 14 kDa가 주 분획이었다. 3. Immunoblot에 의해 IgM 항체에 반응하는 주 band는 168, 95, 74, 64, 51, 47, 34 kDa의 5개 band이었다. 4. IgG 항체와 반응하는 항원 분획은 11개 이상 관찰되었고 그 중 168, 92, 85, 64, 58, 52, 42, 40 kDa가 강한 반응을 보였다. 5. 아니사키스추출액 항원과 다른 기생충성 질환자 혈청과의 교차반응은 관찰할 수 없었다.
우리나라 서해지방에서 잡힌 참조기 (Pseudesciaena manchurica)에서 아니사키스유충을 수집하여 형태학적으로 분류하였다. 참조기 30마리에서 총 1,068마리의 아니사키스유충이 검출되어 참조기 1마리당 평균 35.6마리의 유충감염을 보였다. 이들은 형태학적으로 Berland의 Anisakis I형 859마리 (80.4%), Koyama et al.의 Contracaecum A형 13마리(1.2%), 새로운 형인 Contracaecum C'형 55마리 (5.1%), Koyama et al.의 Contracaecum D형 18마리 (1.7%), 새로운 형인 Contracaecum D'형 77마리 (7.2%), Yamaguti의 Contracrfecnm V형 3마리(0.28%), Koyama et al.의 Raphidascaris sp. 1마리 (0.09%) 및 종류불명 42마리(3.9%)로 분류하였다. Contracaecum C'형과 D'형은:이미 ,알려진 종류와는 뚜렷한 차이를 보였으며 문헌상 새로운 형태로 생각되었다.
조피볼락, Sebastes schlegeli 소화관 주변에는 다수의 아니사키 스가 기생하고 있었으며, 몇몇 개체들은 간의 표면에 존재하고 있었다. 유전학적 결과 조피볼락에 기생한 아니사키스는 3종으로 분석되었으며, Hysterothylacium sp.가 가장 많이 분포하고 있었다. Hysterothylacium sp.는 Anisakis simplex보다 짧고 가늘었다. 두 종 모두 전방부분에는 lip, 입, 신경환, 분비공, 분비관이 관찰되었다. 두 종 모두 중간부분에는 식도, 위, 장이 존재하고 있었 지만, intestinal ceacum과 ventricular appendage는 Hysterothylacium sp.에서만 관찰되었다. Hysterothylacium sp.의 후방부분 끝에는 conical nodulose apex이 관찰되었지만, A. simplex의 후방부분 끝에는 spine이 관찰되었다. SEM으로 관찰한 결과 Hysterothylacium sp.의 입 주위에는 3개의 lip이 존재하고 있었는데, dorsal lip은 넓이 65 ${\mu}m$ 내외였고, 한쌍의 lateroventral lip은 넓이 60 ${\mu}m$ 내 외였다. Lip의 표면에는 넓이 8 ${\mu}m$ 내외의 유두돌기 한쌍이 존재하고 있었다. Hysterothylacium sp.와 A. simplex의 충체 넓이는 각각 480 ${\mu}m$와 900 ${\mu}m$ 내외로 측정되었다. Hysterothylacium sp. 의 lateral alae는 높이 7 ${\mu}m$ 내외였으며, cornical nodulose apex에 존재하는 돌기는 지름 약 3.3 ${\mu}m$였다. A. simplex의 후방부분 끝 에는 높이 약 20 ${\mu}m$의 spine이 관찰되었다. 조피볼락 장의 내강 에 존재하는 아니사키스들은 대부분 Hysterothylacium sp.였고, 점막주름 근처 혹은 점막하층에 기생하고 있었다. 아니사키스의 기생으로 인하여 숙주의 점막상피에는 다수의 점액세포가 증가하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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