We studied the effects of ASC-17D rat Sertoli cell-conditioned media (rSCCM) on the proliferation of the DU145 prostate cancer cells. rSCCM was prepared from ASC-17D cells cultured in DMEM/F-12 serum-free media at a nonpermissive temperature of $40^{\circ}C$, which is the condition for the high expression of c1usterin. We found that rSCCM could inhibit the proliferation of DU145 cells by arresting the cell cycle in the G1 phase in a dose-dependent manner. This growth arresting activity was abolished by boiling rSCCM for 5 min. The G1 growth-inhibiting activity of rSCCM was also detected in other prostate-originated cancer cells examined (i.e., LNCaP and PC-3) but not in other cells (ASC-17D, HepG2, SK-N-SH, and NIH3T3). Western blot analysis of partially purified growth inhibiting fractions with the clusterin antibody showed that the cytostatic factor in rSCCM was not c1usterin. This cytostatic factor was semi purified by DEAE-Sepharose, ammonium sulfate precipitation, and Phenyl-Sepharose column chromatography, and was estimated to have a molecular weight of 88 kDa by Sephacryl S-300 gel filtration.
An investigation was carried out to study the microbial colonization and degradation of five crop residues, viz., sago waste, rice straw, oil palm trunk shavings, untreated palm press fibre and palm press fibre teated with 3% ammonium hydroxide in the rumen of goats. Colonisation by rumen bacteria and fungi was already established on all the five crop residues 8 h after incubation. However, the extent of colonization varied among the crop residues. Microbial colonization was poor on palm press fibre (treated and untreated) but more extensive on sago waste, oil palm trunk shavings and rice straw. By 24 h, most of the soft-walled tissues in sago waste, rice straw and oil palm trunk shavings were degraded leaving the thick-walled tissues extensively colonized by bacteria and fungi. Degradation on palm press fibre was still limited. At 48 h, the thick-walled tissues of sago waste, oil palm trunk shavings and rice straw showed various degrees of degradation - from small erosion zones to large digested areas. Bacterial growth was similar to that at 24 h but fungal growth was less. On palm press fibre, microbial colonization was more extensive than at 24 h but degradation of the fibres was still limited. Degradation of all the five crop residues at 72 h was somewhat similar to that at 48 h. Overall, microbial colonization and degradation were the most extensive on sago waste, followed by rice straw and oil palm trunk shavings, and the least on palm press fibre (treated and untreated). Dry matter loss of the five crop residues at the various incubation periods also showed the same order of degradation.
Ling, Jessmi M.L.;Nathan, Sheila;Hin, Lee Kok;Mohamed, Rahmah
BMB Reports
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제34권6호
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pp.509-516
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2001
A genomic DNA fragment that contains the gene, which codes for a novel extracellular serine protease in Burkholderia pseudomallei, was cloned by using pQE40 as a vector. It was maintained in Escherichia coli JM109. The expression of the gene(s) resulted in the production of a 52 kDa protease. The recombinant protease was purified from the culture filtrate via ammonium sulfate fractionation, gel filtration, and anion-exchange chromatography. The purified protease had an optimum pH and temperature of pH 8.9 and $38^{\circ}C$, respectively. The protease activity was inhibited by EGTA, EDTA, and PMSF, but not 1,10-phenanthroline. The first 11 amino acid residues from the N-terminus of the purified protease were identified as LAPNDPYYYGY. PNDPYY was found to show homology to the Bacillus cereus microbial serine protease and B. subtilis PD498 serine protease. These results indicate that the protease that was purified in this study is an extracellular calcium-dependent serine protease. The purified protease was able to digest the human serum 19A, IgG, albumin, and transferrin, as well as bovine muscle actin and myosin. Furthermore, it was able to promote or cause dermonecrosis in experimental rabbits. These results propose the possible role of a novel B. pseudomallei extracellular calcium-dependent serine protease in the virulence of the pathogen.
R. sphaeroides K- 7에 의한 수소생성과 질소고정효소(nitrogenase)와의 연관성을 조사한 결과 수소생성은 질소고정효소에 의해 이루어지는 것으로 나타났다. 또한 수소생성은 수소효소(hydrogenase)와 무관하며 박테리오클로로필의 농도와도 무관한 것으로 나타났다. 글루타민산이 in vivo에서 질소고정효소의 활성도를 조절하는데 중요한 역할을 할 수 있는 것으로 나타났으며 질소개스를 이용해 키운 세균을 글루타민산 존재하로 옮겼을때 보다 큰 정도의 수소생성능 및 질소고정효소 활성도가 나타났다.
Mohan, Rahul;Shukla, Sunil Kumar;Anilkumar, N.;Sudhakar, M.;Prakash, Satya;Ramesh, R.
ALGAE
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제24권3호
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pp.139-147
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2009
Microalgae using a submersible fluorescence probe in water column (up to 100 m) were measured during the austral summer of 2006 (February) in Prydz Bay, East Antarctica (triangular-shaped embayment in the Indian sector of Southern Ocean). Concurrently, environmental parameters such as temperature, salinity and nitrogen (nitrate, ammonium, urea) uptake rates were measured. The concentration of phytoplankton is relatively high due to availability of high nutrients and low sea surface temperature. Phytoplankton community is dominated by diatoms whereas cryptophytes are in low concentration. The maximum concentration of total chlorophyll is 14.87 ${\mu}g\;L^{-1}$ and is attributed to upwelled subsurface winter water due to local wind forcing, availability of micro-nutrients and increased attenuation of photosynthetically available radiation (PAR). Concentration of blue-green algae is low compared to that of green algae because of low temperature. Comparatively high concentration of yellow substances is due to the influence of Antarctic melt-water whereas cryptophytes are low due to high salinity and mixed water column. Varied concentrations of phytoplankton at different times of Fluoroprobe measurements suggest that the coastal waters of Prydz Bay are influenced by changing sub-surface water temperature and salinity due to subsurface upwelling induced by local winds as also melting/freezing processes in late summer. The productivity is high in coastal water due to the input of macro as well as micro-nutrients.
딕카이트를 출발물질로 이용하여 이팔면체형 스멕타이트인 바이델라이트를 수열합성한 후, 바이델라이트의 층 내의 금속 양이온을 유기 양이온인 10-Carboxy-n-decyldimethylethyl-ammonium bromide와 교환 반응시켜 유기 [DEACOOH]-바이델라이트를 제조하였다. [DEACOOH]-바이델라이트는 고진공 상태 하에서 건조시킨 후 증류수, 메탄올, 에탄올, 아세톤, 에테르, 아세토니티릴 및 카프로락탐 등 상이한 팽윤용액과 반응시켜 팽윤거동에 대하여 연구하였다. 실험한 결과, 고진공하에서의 층간거리는 15.1 ${\AA}$이었고, 증류수, 메탄올, 에탄올, 아세톤, 에테르, 아세토니티릴, 카프로락탐에서 반응 후에는 각각 19.4, 29.9, 15.9, 16.8, 14.8, 26.5, 14.8 ${\AA}$층간거리가 얻어졌다. 또한 합성 바이델라이트와 자연산 몬모릴로나이트의 층간화합물 및 팽윤거동에 대하여 비교 분석하였다.
Sucrose 의 경우 저농도에서는 후반부로 갈수록 세포생장 속도는 현저히 감소하는데 비해 hGM-CSF 생산은 후반부에 급격히 증가함을 확인하였다. 고농도 sucrose를 사용하는 경우에는 lag phase가 길어지는 동안에 hGM-CSF의 생산이 증가하였다. 따라서 배양 초기에는 고농도 sucrose가, 배양 후반에는 저농도 sucrose로 존재하는 경우에 hGM-CSF를 많이 얻을 수 있었다. Nitrogen source의 농도는 60.52 mM과 121.04 mM일 때가 세포의 생장이나 hGM-CSF의 생산을 증가시켰으며, phosphate의 경우에는 4.96 mM 일 때가 대조구인 2.48 mM 일 때보다 hGM-CSF의 생산을 3 배 증가시켰다.
Jo, Seung-Hyun;Kwon, Suk-Yoon;Park, Doo-Sang;Yang, Kyoung-Sil;Kim, Jae-Whune;Lee, Ki-Teak;Kwak, Sang-Soo;Lee, Haeng-Soon
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제11권5호
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pp.442-448
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2006
Human lactoferrin (hLf) is an iron-binding glycoprotein that has been considered to play many biological roles in the human, including the stimulation of the immune system, antimicrobial and anti-inflammatory effects, and regulation of iron absorption. We generated transgenic Siberian ginseng (Acanthopanax senticosus) cell cultures producing a functional hLf protein using the signal peptide sequence from the endoplasmic reticulum and driven by an oxidative stress-inducible SWPA2 promoter which is highly expressed in plant cell cultures. The production of hLf increased proportionally to cell growth and showed a maximal level (up to 3.6% of total soluble protein) at the stationary phase in suspension cultures. Full-length hLf protein was identified by immunoblot analysis in transgenic cell cultures of Siberian ginseng. Recombinant hLf (rhLf) was purified from suspension cells of Siberian ginseng by ammonium sulfate precipitation, cation-exchange and gel filtration chromatography. N-terminal sequences of rhLf were identical to native hLf (nhLf). The overall monosaccharide composition of rhLf showed the presence of plant specific xylose while sialic acid is absent. Antibacterial activity of purified rhLf was higher than that of nhLf. Taken together, we anticipate that medicinal Siberian ginseng cultured cells, as demonstrated by this study, will be a biotechnologically useful source for commercial production of functional hLf not requiring further purification.
Acetyl xylan esterase was produced by E. coli HB101 harboring a recombinant plasmid pKMG6 which contained the estI gene of Bacillus stearothermophilus. The maximum production was observed when the E. coli strain was grown at 37$\circC for 12 hours in the medium containing 0.5% acetyl xylan, 1.0% tryptons, 1.0% sodium chloride, and 0.5% yeast extract. The esterase produced was purified to homogeneity using a combination of ammonium sulfate fractionation, DEAE Sepharose CL-6B ion exchange chromatography and Sephacryl S-200 gel filtration. The native enzyme had an apparent molecular mass of 60 kd and was composed of two identical subunits of 29 kd. The N-terminal amino acid sequence of the polypeptide was Ala-X-Leu-Gln- Ile-Gln-Phe-X-X-Gln. The acetyl esterase displayed a pH optimum of 6.5 and a temperature opti- mum of 45$\circC. The heavy metal ions such as Ag$^{++}$, Hg$^{++}$ and Cu$^{++}$ inhibited nearly completely the activity of the esterase, and no specific metal ion was found to be required for the enzyme activity. The enzyme readily cleaved MAS, $\beta$-D-glucose pentaacetate, $\alpha$-naphthyl acetate, $\rho$-nitrophenyl acetate as well as acetyl xylan, but had no activity on $\rho$-nitrophenyl propionate, $\beta$-nitrophenyl butyrate or $\beta$-nitrophenyl valerate. The Km and Vmax values for MAS were 2.87 mM and 11.55 $\mu$mole/min, respectively. Synergistic behavior was demonstrated with a combination of xylanase and esterase from B. stearothermophilus in hydrolyzing acetyl xylan.
A female Green iguana (Iguana iguana) was brought to the small animal clinic in Hannover Veterinary school because of anorexia and convulsion. Two months ago, the owner bought two iguanas, one female and one male and had to take a female to the one of local small animal clinic because she, born in 19931 didn't eat well and showed the tremor of the legs. The veterinarian suspected it to have a calcium deficiency and gave an injection of calcium and vitamin D3. But still during the last two months, the female iguana did only eat some lettuce while the other male ate lettuce, fruits and commercial cat-food ($Whiskas^{\circledR}$, Effem, Verden). It was not possible to evaluate the rations of these different "food-components". They are kept in the terrarium with water container. By palpation of the abdomen, hard thing like stone was palpated in the mid-region. The blood test wasn't carried out because of the difficulties of getting blood and because of her bad condition. It was firmly diagnosed as cystic calculus through radiography. Since the animal is in shock state already, the prognosis after surgery was bad. It was assumed to be too late to expect its surviving with the surgery carried out or without it. Cystotomy was performed in the cranial ventral paramedian incision in order to preserve the large ventral abdominal vein in the linen alba region. After two stay sutures ("holding suture" ) with 5-0 polyglactin 910 ($Vicryl^{\circledR}, Ethicon$) on the bladder, cystotomy was carried out and the stone inside was removed. Then, the bladder was closed in one-layer sutures. The abdomen was closed in simple interrupted suture with same material after the instillation of 10 ml saline solution into the abdominal cavity. The cystic calculus was in a size of $5.8{\times} 5.O{\times} 3.5 cm$. The analysis of the stone was carried out in two ways which are the infrared spectroscopy of the stone and quick analysis by $Merckognost^{\circledR}$(Diagnostica Merck, Merck). In the result of the infrared spectroscopy, the stone wee composed of 10% ammonium urate and 90% dihydrated uric acid. This iguana wasn't able to survive.n't able to survive.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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