Although much research has focused on various bioactive substances in starfish, research on microorganisms isolated from starfish is lacking as compared with other natural products. In this study, we investigated bacterial communities in the gut of red starfish (Certonardoa semiregularis) in Jeju Island. In total, 103 bacterial strains were isolated using marine agar and R2A medium. The isolated strains were analyzed and identified using the 16S rRNA gene sequence. Based on an analysis of this gene sequence, the 103 isolated bacteria were classified into four major groups: Proteobacteria (93%: Alpha-proteobacteria, 24.8%; Beta-proteobacteria, 4%; Gammaproteobacteria, 65%) Bacteroidetes (4%), Actinobacteria (2%), and Firmicutes (1%). In addition, the isolates were divided into seven classes (Actinobacteria, Flavobacteria, Bacilli, Sphingobacteria, Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, and Gammaproteobacteria), 15 orders, 19 families, and 24 genera. A phylogenetic analysis revealed two strains, Lysobacter sp. and Pedobacter sp., with similarity of 97.55% and 97.58%, respectively. As the similarity in the 16S rRNA gene sequence was 98% or less compared to previously identified bacteria, the two strains may possibly be classified as a new genus or species. We suggest that additional studies, including biochemical and morphological tests, should be performed to identify the new candidate strains.
Culture-independent microscopic observations and 16S rDNA analyses were applied to describe the bacterial community inherent to the biofilm structure of the RABC (Rotating Activated Bacillus Contactors) process for swine butchery wastewater treatment. The ratios of Gram-positive bacterial counts to total bacterial counts of the RABC process were significantly increased in the last aeration tank as well as returned sludge, while those of the existing A2O (Anaerobic-Anoxic-Oxic) process maintained constant from aeration tanks to returned sludge. Totally nine phyla were recovered by 16S rDNA analysis, two of which were major groups: the Proteobacteria (64.1%) and the Actinobacteria (18.4%). The third major group was the endospore-forming Firmicutes (5.4%). The remaining six minor groups are the Bacteroidetes (3.3%), the Chlorobi (2.2%), the Nitrospirae (1.1%), the Chlorofleix (1.1%), the Acidobacteria (1.1%), and the Fusobacteria (1.1%). The ratio of endospore-forming bacteria was 19.4%, which was composed of the members of the Firmicutes phylum (5.4%) and the Intrasporangiaceae family (14.0%) of the Actinobacteria phylum. Nitrifying and denitrifying related- and phosphorus accumulating related-sequences were composed of 6.5% and 5.4% of total community, respectively, these could mean the high capacity of the RABC process to remove odor compounds and reduce eutrophication by efficient removing inorganic nutrients.
Kim, Ji-Hyun;Park, So-Hyun;Moon, Kyung-Mi;Kim, Dong-Hwi;Heo, Moon-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.46
no.2
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pp.127-134
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2018
In this study, 79 bacterial isolates were collected from the surface of marine algae Umbraulva japonica. As a result of analysis of 16s rRNA gene sequence, the 79 isolated bacteria were divided into 4 major groups: [Proteobacteria (74.69%), Actinobacteria (2.53%), Fimicutes (2.53%), and Bacteroidetes (20.25%)] - 7 classes (Actinobacteria, Flavobacteria, Sphingobacteria, Baciili, Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, and Gammaproteobacteria), 12 orders, 17 families and 31 genera. The newly isolated 3 strains could be novel species because of less than 97% similarity in 16s rRNA sequence. Therefore, it is considered that additional experiments should be conducted together with the standard strain. Analysis of 79 bacterial antibacterial activity against human and fish pathogens, such as Edwardsiella tarda, Vibrio harveyi, Streptococcus iniae, Steptococcus parauberis, Escherichia coli, Steptococcus mutans, Listeria monocytogenes and Vibrio vulnificus, was performed by using the supernatant liquid and pellet. As a result, pellet of UJT9, UJT20 and UJR17 showed antibacterial activity against V. vulnificus, UJR17 also showed antibacterial activity against S. parauberis. UJT7 and UJT20, UJR17 have been identified as Bacillus sp. and Pseudomonas sp. and it may be safely assented that it's beneficial to carry out additional experiments for various applications.
The aim of this study was to investigate the possible impact of Bt Chinese cabbage on the soil microbial community. Microbial communities were isolated from the rhizosphere of one Bt Chinese cabbage variety and four varieties of conventional ones and were subjected to be analyzed using both culture-dependent and molecular methods. The total counts of bacteria, fungi, and actinomycetes in the rhizosphere of transgenic and conventional Chinese cabbages were observed to have an insignificant difference. Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) analysis of PCR-amplified 16S rRNA genes revealed that the bacterial community structures were very similar to each other and this genetic stability of microbial communities was maintained throughout the culture periods. Analysis of dominant isolates in the rhizosphere of transgenic and conventional Chinese cabbages showed that the dominant isolates from the soil of transgenic Chinese cabbage belonged to the Bacilli and Alphaproteobacteria, while the dominant isolates from the soil of conventional cabbage belonged to the Holophagae and Planctomycetacia, respectively. These results indicate that the Bt transgenic cabbage has no significant impact on the soil microbial communities.
Hwang, Yeoung Min;Kim, Dae Kuk;Lee, Ji Hee;Baik, Keun Sik;Park, Chul;Seong, Chi Nam
Journal of Life Science
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v.24
no.4
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pp.393-402
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2014
Culture-dependent and culture-independent denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) analyses were employed to investigate the bacterial community associated with a natural dye wastewater treatment facility. A total of 104 (influent water, 48 strains; aeration tank, 25; settling tank, 31) bacterial strains were isolated. Based on the 16S rRNA gene sequences comparison analysis, the isolates belonged to four phyla: Proteobacteria, Actinobacteria, Firmicutes, and Bacteriodetes. Seventeen DGGE bands representing dominant taxa in each sample were cloned and partially sequenced. The same four phyla were detected by DGGE fingerprinting. The most dominant taxon retrieved by both methods was the member of the phylum Proteobacteria with Alphaproteobacteria as the predominant class. The bacterial community associated with the natural dye wastewater treatment facility is composed of parasites of animals and plants, decomposers of polysaccharides and dyes, and producers of extracellular polysaccharides.
T-RFLP analysis and clone sequencing analysis based on bacterial 16S rDNA were conducted to assess bacterial community structure and diversity in Zoysia japonica soil treated with liquid fertilizer containing amino acids(LFcAA) after spray with herbicide. The results of T-RFLP (terminal restriction fragment length poly-morphism) analysis using restriction enzyme Hae III showed that the T-RFs of various size appeared evenly in the 32 clones of KD3 and 38 clones of KD4 respectively that had been treated with liquid fertilizer containing amino acid(LFcAA) compared to 23 clones of KD2 hat had not been treated with LFcAA. The microbial com- munity structure in KD2 appeared less diverse than those in KD3 and KD4. Analysis of partial sequences for 110 clones from KDI (control), KD2 (non-treated), KD3 (LFcAA 1X), KD4 (LFcAA 2X), respectively, revealed that most bacteria were related with uncultured bacteria in a 16S rDNA sequence similarity range of 91-99% through blast search. Otherwise, the other clones were members of proteobacteria, Acidobacteria, Act-inobacteria, Sphingobacteria and Planctomyces groups. Especially in KD4, members of Alpha Proteobacteria, Rhizobiales, Sphigomonadales, Caulobacterales, Gamma Proteobacteria, the genus Pseudomonas, Betapro-teobacteria, Nitrosomonadales and genus Nitrosospira appeared to be dominant. In addition, Acidobacteria group, Actinobacteria group, Planctomycetacia and Sphingobacteria were also shown. The microbial com-munity structure in Z. japonica soil sprayed with herbicide was affected by LFcAA.
Kim, Kiyoon;Um, Yurry;Jeong, Dae Hui;Kim, Hyun-Jun;Kim, Mahn Jo;Jeon, Kwon Seok
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2019.10a
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pp.84-84
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2019
본 연구는 전국 임의의 산양삼 재배지를 선정하여 재배지 내의 토양 특성 및 토양세균군집을 분석하고, 토양 특성, 세균군집 및 산양삼 생육특성 간의 상관관계를 구명하기 위하여 수행되었다. 토양 이화학성 분석은 농촌진흥청의 종합분석실 매뉴얼에 따라 분석하였고, 토양세균군집 분석은 pyrosequencing analysis (Illumina platform)를 이용하였다. 토양세균군집과 생육특성 간의 상관관계는 Spearman's rank correlation을 이용하여 분석하였다. 전국 8개 산양삼 재배지로부터 분리한 토양세균군집은 2개의 cluster로 군집화를 이루는 것을 확인하였다. 모든 토양 샘플에서 Proteobacteria와 Alphaproteobacteria가 각각 평균 상대적 빈도수가 35.4%, 24.4%로 우점종으로 나타났다. 나타났다. 두 개의 cluster 간 토양세균군집의 상대적 빈도수를 비교 분석한 결과, 먼저 Proteobacteria (p = 0.03), Actinobacteria (p = 0.02), Ahlpaproteobacteria (p = 0.029), Betaproteobacteria (p = 0.021)는 cluster 1에서 cluster 2에 비해 상대적 빈도수가 유의적으로 높았고, Fimicutes (p = 0.004), Cyanobacteria (p = 0.004), Acidobacteriia (p = 0.041), Ktedonobacteria (p = 0.019), Gammaproteobacteria (p = 0.034), Bacilli (p = 0.009)은 cluster 2에서 유의적으로 상대적 빈도수가 높은 것으로 나타났다. 토양세균군집 cluster 간 산양삼의 생육특성을 비교 분석한 결과, cluster 2 재배지에서 수집한 산양삼 시료의 지하부 생중량은 cluster 1 재배지에서 수집한 산양삼 시료에 비해 cluster 2에서 유의적 (p = 0.04)으로 높았다. 산양삼 생육특성과 토양세균군집 간의 상관관계를 분석한 결과, 산양삼의 생육은 토양 pH가 낮고 Acidobacteria의 상대적 빈도수가 높은 토양에서 증가하였으며, Acidobacteriia와 Koribacteraceae의 상대적 빈도수는 산양삼의 생육과 유의적인 정의 상관관계를 보이는 것으로 나타났다. 본 연구 결과는 토양미생물군집과 산양삼 생육 간의 상관관계를 구명하는 중요한 자료가 될 것으로 생각되고, 나아가 산양삼 재배적지를 선정하는데 있어 보다 명확한 정보를 제공할 수 있을 것으로 사료된다.
DNA methylation is involved in diverse processes in bacteria, including maintenance of genome integrity and regulation of gene expression. CcrM, the DNA methyltransferase conserved in Alphaproteobacterial species, carries out $N^6$-adenine or $N^4$-cytosine methyltransferase activities using S-adenosyl methionine as a co-substrate. Celeribacter marinus IMCC12053 from the Alphaproteobacterial group was isolated from a marine environment. Single molecule real-time sequencing method (SMRT) was used to detect the methylation patterns of C. marinus IMCC12053. Gibbs motif sampler program was used to observe the conversion of adenosine of 5'-GANTC-3' to $N^6$-methyladenosine and conversion of $N^4$-cytosine of 5'-GpC-3' to $N^4$-methylcytosine. Exocyclic DNA methyltransferase from the genome of strain IMCC12053 was chosen using phylogenetic analysis and $N^4$-cytosine methyltransferase was cloned. IPTG inducer was used to confirm the methylation activity of DNA methylase, and cloned into a pQE30 vector using dam-/dcm- E. coli as the expression host. The genomic DNA and the plasmid carrying methylase-encoding sequences were extracted and cleaved with restriction enzymes that were sensitive to methylation, to confirm the methylation activity. These methylases protected the restriction enzyme site once IPTG-induced methylases methylated the chromosome and plasmid, harboring the DNA methylase. In this study, cloned exocyclic DNA methylases were investigated for potential use as a novel type of GpC methylase for molecular biology and epigenetics.
BACKGROUND: The aim of this study was to investigate the soil chemical properties and soil bacterial community of the cropping system for Cnidium officinale Makino. METHODS AND RESULTS: The bacterial community was analyzed for the relative abundance and principal coordinated analysis (PCoA analysis) by using by Illumina Miseq sequencing. The correlation analysis between soil chemical properties and soil bacterial community were analyzed by Spearman's rank correlation and DISTLM analysis. Soil bacterial community (phylum and class) showed two distinct clusters consisting of cluster 1 (first cropping) and cluster 2 (continuous cropping) from 2 different cultivation methods of Cnidium officinale Makino. PCoA and DISTLM analyses showed that soil pH and Ca significantly affected soil bacterial community in cultivation area of Cnidium officinale Makino. In addition, Spearman's rank correlation showed significant correlation between relative abundance (Acidobacteria and Actinobacteria) and soil factors (soil pH and Ca). CONCLUSION: The results of this study were considered to be important for determining the correlation between soil properties and soil bacterial community of the cropping method for Cnidium officinale Makino. Furthermore, the results will be helpful to investigate the cause of continuous cropping injury of the Cnidium officinale Makino by examining the changes of soil properties and soil bacterial communities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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