생쥐 난자 및 초기 배아의 alkaline phosphatase의 기능을 알아보기 위하여 생화학적인 방법으로 배아의 발생 단계에 따른 효소의 활성도를 측정하였으며, 동 효소의 저해제로 알려진 levamisole이 난자의 성숙분열 및 초기 배아의 발생에 미치는 영향을 관찰하였다. 1. 동 효소의 활성도는 4세포기에서 뚜렷이 나타나며, 각 발생단계에 따른 현저한 변화는 없는 것으로 나타났다. 2. Blastocyst의 alkaline phosphatase의 활성도는 1 mM 및 10 mM의 levamisole에 의해서 각각 40%와 70% 이상 억제되었다. 3. Levamisole은 0.5 mM 이상의 농도에서 난자의 극체 형성을 완전히 억제하였으며, 동일한 농도에서 2세포기 배아 및 morula의 퇴화현상을 일으켰다.
Aspiration of lytic bone lesions is an excellent diagnostic test in the initial evaluation of primary bone tumor. However, cytologically, it can be difficult to differentiate osteosarcoma (OSA) from other bone neoplasms, including fibrosarcoma, chondrosarcoma, synovial cell sarcoma, malignant fibrous histiocytoma and malignant peripheral nerve sheath tumor. The purpose of this study is to introduce alkaline phosphatase (ALP) staining to differentiate OSA from other mesenchymal tumors. Tumors actively producing bone are specifically positive for ALP staining. Unstained, cytologic specimens were incubated for 10 minutes with nitroblue tetrazolium chloride/5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate toluidine salt-phosphatase substrate. Among 20 cases of cytology specimen, 14 were positive for ALP staining and histopathology, 6 were negative for ALP staining and histopathology. ALP staining was 100% sensitive and specificity for the diagnosis of OSA. Aspirate cytology with ALP staining was a simple, fast, safe and accurate diagnostic test for the evaluation of suspected OSA lesions in dogs.
저자는 白色레그혼의 種卵을 孵化시켜 얻은 鷄胎呼吸氣道의 alkaline phosphatase, RNA, PAS 陽性物質 및 燐肥質의 분포와 소장을 組織化學的으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. alkaline phosphatase는 軟骨形成에 앞서 氣道上皮 주위의 間充織에 고도의 活性을 나타냈으며 軟骨形成 後에는 反應은 감소되었고 胎生後期에는 phosphatase 活性은 上皮에만 관찰되었다. 2. RNA는 胎生초에 氣道上의 細胞質內에 陽性反應을 보였으며 軟骨形成에 앞서 上皮주위에 밀집하기 시작한 間充織에도 점차 陽性을 나타냈으나 軟骨形成후에는 이 反應은 감소하였고 鷄胎末期에 腺形成에 따라 腺上皮의 細胞質內에도 陽性 呈色反應을 보엿다. 3. PAS 陽性物質은 基底膜, 杯狀細胞 및 腺形成後에 腺內腔을 제외하고는 陰性反應을 나타냈으며 燐脂質은 發生期의 肺域내의 細氣管支上皮와 腺胞를 제외하고는 비교적 약한 呈色反應이나 陰性을 보였다.
The distribution and some properties of alkaline phosphatase (ALP) were investigated in the midgut of the earthworm, Eisenia andrei. The ALP activity appeared to be highly polarized toward the luminal side of epithelium, with minor ALP activity in chloragogue tissue. The epithelial and chloragogeneous tissues contained approximately 85 and 15% of total intestinal ALP activity, respectively. The optimal temperature was approximately 37$^{circ}C$ and isoelectricpoint was estimated to be 4. The treatment of neuraminidase and PtdIns-PLC failed to change the migration rate of ALPs. Also, these ALPs appeared to have a wide range of substrate specificity. The relationship between the properties and physiological significances of the midgut ALPs in Eisenia andrei was discussed.
생쥐의 정자가 부정소에서 성숙하는 동안 Phosphatase 활성도의 변화를 알아보기 위하여 본 연구를 실시하였다. 효소의 활성도는 Ernst(1975)의 방법을 변용하여 측정하였으며 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 부정소으 두부내 정자와 미부내 정자으 단백질 함량은 각각 59.1 $\pm$8.4(mg/10 9 sperm), 14.0$\pm$12.3(mg/10 9 sperm)으로 나타났다. 기본 반응액에서 나타난 두부내 정자의 효소 활성도를 100%로 할 때, 미부내 정자의 활성도는 ALPase가 29.2%, ALPase가 44.9% 그리고 ALPase가 53.8%였으며, 초음파로 정자를 분쇄하였을 경우에 ALPase는 16.5%, ALPase는 33.3% 그리고 ALPase는 38.7%였다. 따라서 미부내 정자의 phoshatase 활성도는 두부내 정자에 비하여 현저히 감소하였다. 그리고 부정소의 미부내 정자에서 K+ -dependent ALPase와 ALPase의 활성도는 두부내 정자에 비하여 유의하게 감소하였으며, 초음파로 정자를 분쇄하였을 때 $Ca^2$+ -dependent phoshatase의 활성도는 유의하게 증가하였다. 이상의 결과로 보아 생쥐의 정자가 부정소에서 성숙하는 동안 phoshatase의 활성도가 감소하는 것은 성숙과정에서 정자가 수정능력을 획득하는 데 어떤 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
Butyrate는 탄소사슬이 짧은 지방산 중 하나로 소화되지 않은 식이성 섬유의 혐기적 발효결과 포유동물의 위장관내에 millimolar 농도로 유지되며 대장의 상피세포에서 흡수되어 energy원으로 사용된다. 70%정도 confluent하게 자란 사람의 대장암세포주인 HT29 cell에 5mM sodium butyrate를 시간별로 처리하고 세포의 생존율, 암세포의 분화정도의 biomarker로 알려진 alkaline phosphatase 및 PLC-rl의 발현정도를 측정하였으며 sphingolipid의 생합성 및 ceramidase 활성도 측정하였다. Sodium butyrate 처리는 성장중인 HT29 cell의 부착을 저해하여 처리 1일째부터 세포수가 감소하였고 형질막 효소인 alkaline phosphatase의 발현을 증가시켰으며 PLC-${\gamma}$의 발현을 감소시켰다. 또한, 복합 sphingolipid들의 생합성을 측정한 결과, 세포성장의 저해와 함께 sphingomyelin은 2일째부터 감소하였으며, galactosyl ceramide는 1일째부터 급속히 감소하였다. 그러나 ceramide의 경우, 1일째는 처리하기 전보다 680dpm/mg protein정도 증가하였으며 2일째에는 다시 급속히 감소하였다. 또한 butyrate처리에 의하여 HT29 cell의 acid ceramidase와 neutral ceramidase활성이 저해됨을 관찰하였는데 그 결과 ceramide함량이 초기에 증가된 것으로 생각된다. 본 실험결과들로부터 HT29 cell의 sodium butyrate처리는 세포분화 또는 세포성장저해를 가져오는데 이와 함께 초기의 ceramide함량 및 alkaline phosphatase활성의 증가와 galactosylceramide함량 및 LC-rl 발현의 감소현상이 동반됨을 알 수 있다.
Fluoride (F), over a narrow concentration range, increases bone formation. Aluminum (Ai) too is biphasic in its action on bone, being mitogenic at very low levels and inhibitory at higher levels. Both F and Al are present in finished drinking water where the chemical interaction of these two agents is well characterized. F and AI, given individually, accumulate preferentially in bone. In addition. in vivo studies have shown that F causes the co-accumulation of Al in bone. Thus, it was necessary to determine the interactive effect of these two agents on bone mitogenesis. Calvaria were obtained from neonatal CD-1 mice and cultured with various concentrations of F (0.05~19 ppm) as NaF, Al (2 ppb~2 ppm) as $AlCl_3$ , or F and Al for 3 days at $37^{\circ}C$ on a rotating roller drum. Alkaline phosphatase activity in calvaria and $\beta$-glucuronidase activity in culture medium were determined as a measures of bone turnover. Alkaline phosphatase activity in calvaria was significantly increased by F (0.05~2 ppm) treatment and $\beta$-glucuronidase activity was slightly increased in the culture medium of calvaria treated with 0.3 ppm Al. The combination of 19 ppm F and 0.3 ppm Al increased alkaline phosphatase activity in calvaria, but did not affect $\beta$-glucuronidase activity, suggesting the interactive effect of fluoride and aluminum on bone turnover.
This study was undertaken to assess the effects of demethylchlortetracycline on bone growth of mandibular symphyseal region in rats. Demethylchlortetracycline at 30mg/kg body weight, respectively, were daily administered by mouth to the sewen female rats from 10th day of pregnancy to 13th day. Thirty six new-born rats from these experimental animals were used for histological examination at 1, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 days. All these new-born rats were killed by an overdose of ether. Mandibular bodies were removed and fixed in $10\%$ neutral formalin,. Carney and aceton. Specimens were embedded, sectioned and stained with H-E, Van Gieson, PAS and prepared for alkaline phosphatase. The results were as follows; 1. Until erupting of incisors, hyaline cartilage was located in relatively large symphyseal space, but bone trabeculae of ossifying area at incisal side were arranged irregularly in experimental group. 2. During this period, PAS reaction was moderately positive, but alkaline phosphatase reaction was slightly positive. 3. By erupting or incisors, symphyseal space appeared narrower like control group, but alkaline phosphatase reaction tended to slow down. 4. By erupting of molars, symphyseal space appeared muck narrower, and cartilane plate was reduced and aealed off like control group. Alkaline phosphatase reaction tended to slow down severely.
A cDNA coding alkaline phosphatase (AP) homologue was isolated from a cDNA library of Schizosaccharomyces pombe by colony hybridization. The nucleotide sequence of the cloned cDNA appeared to lack the N-terminal coding region. The genomic DNA encoding alkaline phosphatase homologue was isolated from S. pombe chromosomal DNA using PCR. The amplified DNA fragment was ligated into plasmid pRS315 to generate the recombinant plasmid pSW20. The DNA insert was subcloned as two smaller fragments for nucleotide sequencing. The sequence contains 2,789 by and encodes a protein of 532 amino acids with a molecular mass of 58,666 daltons. The S. pombe cells containing plasmid pSW20 showed much higher AP activity compared with the yeast cells with vector only This indicates that the cloned AP gene apparently encodes AP The predicted amino acid sequence of the S. pombe AP shares homology with those of other known APs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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