LAB were isolated from makgeolli locally produced around Jinju, Gyeongnam, S. Korea during spring of 2011. Randomly selected 11 isolates from MRS agar plates were identified first by API CHL 50 kits and then 16S rRNA gene sequencing. All 11 isolates were identified as Lactobacillus plantarum. Among them, ST4 grew in MRS broth with ethanol up to 10%, showing the highest alcohol resistance. L. plantarum ST4 was moderately resistant against acid and bile salts. When cellular proteins of L. plantarum ST4 under ethanol stress were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis (2DE), the intensities of 6 spots increased, whereas 22 spots decreased at least 2-fold. Those 28 spots were identified by peptide mass fingerprinting (PMF). FusA2 (elongation factor G) increased 18.8-fold (6% ethanol) compared with control. Other proteins were AtpD (ATP synthase subunit beta), DnaK, GroEL, Tuf (elongation factor Tu), and Npr2 (NADH peroxidase), respectively. Among the 22 proteins decreased in intensities, lactate dehydrogenases (LdhD and LdhL1) were included.
Nanoparticles with unsaturated poly(hydroxyalkanoate)s (UPHAs) biosynthesized with Pseudo-monas oleovorans were prepared by spontaneous emulsification solvent diffusion method. The influence of nanoparticle formation was investigated with various experimental parameters such as sonication conditions, sol-vent, surfactant and polymer contents, etc. The physical and chemical properties of UPHAS and its nanoparticles were characterized using $^1$H- and $\^$13/C-nuclear magnetic resonance spectroscopies, attenuated total reflection infrared spectroscopy, differential scanning calorimetry and gel permeation chromatography. The morphology of particles was observed using scanning electron microscope and the size and distribution of nanoparticles were measured with electrophoretic light scattering spectrophotometer. The mean diameter of particles decreased with increasing sonication amplitude and time. The addition of ethanol into UPHAS chloroform solution decreased the particle size presumably due to increased solvent diffusion into water phase. The particle size increased with increased the concentration of UPHAS solution. Under the 2-4% poly(vinyl alcohol) (PVA) aqueous solution the minimum mean diameter of particles was shown. The higher degree of hydrolysis and degree of polymerization of PVA increased the mean diameter of particles.
Cytochrome P450 is an oxidase involved in oxidation of alcohol and is known to be an activator of carcinogen. The present study was perfomed to analyze the effect of diabetes and cold stress on the expression of Cytochrome P450 IIE1(CYPIIE1) in the liver and salivary glands in rats by an immunoblot analysis. Sixty three divided into 4 groups; 1) 20 rats belonging to group I were allowed diabetes (40mg/kg. I.V.) 2) 20 rats of group II were bathed in cold water for 30 seconds twice a day 3) 20 rats comprising group III were received diabetes and cold stress as described above 4) 3 rats of group IV were selected as a control. The rats were sacrificed at the end of the same day 1, 2, 3, 4 weeks experiment. The liver and parotid glands were removed and stored at $-70^{\circ}C$ until use. The stored organs were homogenized for 10 seconds and the supernatants were obtained by centrifugation. The proteins of the supernatants were separated by sodium dodecyl sulfate- polyacrylamide gel electrophoresis and subjected to Western blotting. The blotted membranes were incubated with polyclonal antibodies to CYPIIE1. And sepimens were observed with light microscope also under the Hematoxillin-Eosin staining. The obtained results were as follows : 1. In diabetes group, acini had changed to degeneration severely 1 week experiment, but repaired gradually in lapse of time. 2. In diabetes group, septal connective tissue had changed to degeneration little by little from 1 week after experiment, and progressed severely in lapse of time. 3. In stress group, acini had not changed remarkably, but slightly separated each other 3 weeks after experiment. 4. In diabetes and stress group, histological feature had changed remarkably campare with in the group of diabetes only. 5. In all experimental group, CTPIIE1 had expressed remarkably in the liver tissue, but not in the parotid gland tissues. 6. In diabetes and stress group, CYPIIE1 had expressed remarkably campare with in the group of diabetes only.
The Saccharomyces0 cerevisiae KNU5377 strain, which was isolated from spoilage in nature, has the ability to convert biomass to alcohol at high temperatures and it can resist against various stresses [18, 19]. In order to understand the defense mechanisms of the KNU5377 strain under menadione (MD) as oxidative stress, we used several techniques for study: peptide mass fingerprinting (PMF) by matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry (MS) followed by two-dimensional (2D) gel electrophoresis, liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI-MS/MS), and surface-enhanced laser desorption ionization-time of flight (SELDI-TOF) technology. Among the 35 proteins identified by MALDI-TOF MS, 19 proteins including Sod1p, Sod2p, Tsa1p, and Ahp1p were induced under stress condition, while 16 proteins were augmented under normal condition. In particular, five proteins, Sod1p, Sod2p, Ahp1p, Rib3p, Yaf9p, and Mnt1p, were induced in only stressed cells. By LC-ESI-MS/MS analysis, 37 proteins were identified in normal cells and 49 proteins were confirmed in the stressed cells. Among the identified proteins, 32 proteins were found in both cells. Five proteins including Yel047cp and Met6p were only upregulated in the normal cells, whereas 17 proteins including Abp1P and Sam1p were elevated in the stressed cells. It was interesting that highly hypothetical proteins such as Ynl281wp, Ygr279cp, Ypl273wp, Ykl133cp, and Ykr074wp were only expressed in the stressed cells. SELDI-TOF analysis using the SAX2 and WCX2 chips showed that highly multiple-specific protein patterns were reproducibly detected in ranges from 2.9 to 27.0 kDa both under normal and stress conditions. Therefore, induction of antioxidant proteins, hypothetical proteins, and low molecular weight proteins were revealed by different proteomic techniques. These results suggest that comparative analyses using proteomics might contribute to elucidate the defense mechanisms of KNU5377 under MD stress.
The fruits of Prunus davidiana were extracted with 80 % aqueous methanol at room temperature. The concentrated extract was partitioned as ethyl acetate (EtOAc), n-butyl alcohol, and water fractions. From the EtOAc fraction, three triterpenoids were isolated through the repeated silica gel ($SiO_2$) and octadecyl $SiO_2$ column chromatographies. Based on physico-chemical and spectroscopic data including nuclear magnetic resonance, mass spectrometry, and infrared, the compounds were identified to be ursolic acid (1), corosolic acid (2), and ${\alpha}-amyrin$ (3).
Singh, Ashish;Kohli, D.K.;Singh, Rashmi;Bhartiya, Sushmita;Singh, M.K.;Karnal, A.K.
Journal of Electrochemical Science and Technology
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v.12
no.2
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pp.204-211
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2021
We report, synthesis of high surface area composite carbon aerogel using additive based polymerization technique by incorporating graphitic porous carbon as additive. This additive was separately prepared using sol-gel polymerization of resorcinol-furfuraldehyde in iso-propyl alcohol medium at much above the routine gelation temperature to yield porous carbon (CA-IPA) having graphitic layered morphology. CA-IPA exhibited a unique combination of meso-pore dominated surface area (~ 700 m2/g) and good conductivity of ~ 300 S/m. The composite carbon aerogel (CCA) was synthesized by traditional aqueous medium based resorcinol-formaldehyde gelation with CA-IPA as additive. The presence of CA-IPA favored enhanced meso-porosity as well as contributed to improvement in bulk conductivity. Based on the surface area characteristics, CCA-8 composition having 8% additive was found to be optimum. It showed specific surface area of ~ 2056 m2/g, mesopore area of 827 m2/g and electrical conductivity of 180 S/m. The electrode formed with CCA-8 showed improved electrochemical behavior, with specific capacitance of 148 F/g & ESR < 1 Ω, making it a better choice as super capacitor for energy storage applications.
Nuruk is the Korean traditional Koji that contains various microorganisms and has been used to make the traditional fermented foods including alcoholic beverages. Rhizopus oryzae KSD-815 was isolated from the alcohol-fermenting Nuruk used for manufacturing traditional alcohol. In this study, the authors reported the isolation and identification of four lipids from the Nuruk (Rhizopus oryzae KSD-815) that inoculated wheat with Rhizopus oryzae KSD-815. The dried and powdered Nuruk (Rhizopus oryzae KSD-815) were extracted three times at room temperature with 80% aqueous MeOH. The extracts were partitioned with EtOAc, n-BuOH, and water, successively. The EtOAc extract was suspended in 80% MeOH and partitioned repeatedly with n-hexane. From the n-hexane fraction, four lipids were isolated through the repeated silica gel and ODS column chromatographies. According to the results of physico-chemical data including NMR, GC and MS, the chemical structures of the compounds were determined as linolenic acid methyl ester (1), palmitic acid methyl ester (2), linoleic acid (3), palmitic acid (4). Cytotoxicity was evaluated in huamn breast cancer cells, MDA-MB-231 and human hepatocarcinoma, SK-HEP-1 cells using MTT assay. Exposure of compounds 1 and 3 led to a dose-dependent inhibition of cell viability in both cancer cell lines. In addition, treatment of RAW264.7 cells with compound 3 caused inhibition of lipopolysaccharide/interferon-${\gamma}$-induced nitric oxide production.
Kim, Kwang-Ho;Koh, Hee-Jong;Lee, Jang-Hoon;Park, Sun-Zik;Heu, Mun-Hue
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.38
no.3
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pp.264-274
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1993
This study was carried out to assess the agronomic characters and physicochemical properties of floury and chalky-endosperm mutant lines induced by chemical mutagen treatment to rice varieties, Hwacheongbyeo and IR24. Linkage analysis of a floury-endosperm gene was carried out using linkage testers. The grain size of brown rice of the mutants was smaller than that of the original varieties. The l, 000-grain and 1$\ell$ weight were lighter in the mutants compared with those in the original varieties. The compound starch granules in the endosperm cell of the mutants showed a loosely-packed crystalline structure. Amylose contents in mutants ranged from 16.9 to 28.5%. Crude protein contents of the mutants were not significantly different from the original rice variety, Hwacheongbyeo, but white core mutant(line 47106) derived from IR24 showed higher protein(l1.32%) compared with IR24(8.30%). The mutants showed slightly harder gel characteristics, and much lower viscosity in Amylograph than original varieties. Steamed rice-cakes from mutant lines showed greater volume than those from original varieties. During the process of alcohol fermentation, Brix in the mutants(especially floury mutants) decreased faster and the alcohol production after 10-day fermentation was much greater in the mutants than in the original varieties. Three different gene loci for floury endosperm characteristics were identified from the allelism test among mutant lines, and the genes were tentatively symbolized as flo-a, flo-b and flo-c, respectively. A floury gene, flo-a, was linked with lg(liguleless) gene in the linkage group N, with R.V. 5.76$\pm$1.72%.
Cho, Nam-Seok;Choi, Tae-Ho;Cho, Hee-Yeon;Leonowicz, Andrzej
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.32
no.5
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pp.51-58
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2004
This study was performed to investigate compositions of inorganic elements, amino acids and glycoprotein fractions as biological substances in fruit body of Sarcodon aspratus. The fruit body of Sarcodon aspratus contained Ca, Mg, Zn, Mn, Fe, Cu, and Pb, in particular high Ca and Na. Hot water extracts consisted of 54% of polysaccharide fraction and 32.6% of protein. In amino acids composition, fourteen free amino acids were detected, mainly glutamic acid, alanine and arginine. Fifteen kinds of total amino acids were contained with major components of glutamic acid, aspartic acid, serine and threonine. Concerned to glycoprotein extraction, 95% ethyl alcohol concentration gave the highest yields with 70.6% sugar fraction, 332% glycoprotein. Different ethyl alcohol concentration resulted in different protein precipitations, and lower concentration ethyl alcohol in the range of 30 to 70% gave more than 92% of higher sugar fraction. Crude glycoprotein (GP) was fractionated by P fraction of more than MW 300,000, P-1 fraction unadsorbed by DEAE-Sephadex, P-2 fractionated from P-1 by Sepharose 2B gel chromatography and P-3 fraction adsorbed by DEAE-Sephadex. Total sugars were increased and protein contents decreased during fractionation. GP and P-3 contained glucose, galactose, mannose and fucose. GP had high glucose with high contents of glutamic acid, serine, alanine and glycine. P-3 fraction contained high mannose with aspartic acid, glutamic acid, and glycine. P-2 fraction was 700,000 MW with high glucose and fucose, and low protein of 1.1%, high amounts of aspartic acid, glutamic acid and alanine, but no mannose and no cysteine.
Laccase produced by Trametes hirsuta S1 isolated from Korea was partially purified and characterized using ultrafiltration, anion exchange chromatography and affinity chromatography. The laccase was produced as the predominant extracellular enzyme during primary metabolism. Neither lignin peroxidase nor veratryl alcohol oxidase (VAO) were detected in the culture fluid. Addition of 2,5-xylidine enhanced 4-fold laccase production. Purified laccase was a single polypeptide having a molecular mass of approximately 66 kDa, as determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, and carbohydrate content of 12%. $K_{m}\;and\;V_{max}$ values for laccase with ABTS [2,2-azinobis (3-ethylbenzthiazoline 6-sulfonic acid)] as a substrate (Lineweaver-Burk plot) was determined to $51.2\;{\mu}M\;and\;56.8\;{\mu}mole$, respectively. The optimal pH for laccase activity was found to be 3.0. The enzyme was very stable for 1 hour at $50^{\circ}C$. Half-life ($t_{1/2}$) of the enzyme was about 20 min at $70^{\circ}C$. Spectroscopic analysis of purified enzyme indicated that the enzyme was typical of copper-containing protein. Substrate specificity and inhibitor studies for laccase also indicated to be a typical fungal laccase. The N-terminal amino acid sequence of the T. hirsuta S1 laccase showed 100% of homology to those of laccase from C. hirsutus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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