• 제목/요약/키워드: Agrobacterium sp.

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Improved Production of Curdlan with Concentrated Cells of Agrobacterium sp.

  • Jung, Dae-Young;Cho, Young-Su;Chung, Chung-Han;Jung, Dai-Il;Kim, Kwang;Lee, Jin-Woo
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제6권2호
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    • pp.107-111
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    • 2001
  • The addition of a limited concentration of yeast extract to a minimal salt medium (MSM) enhanced cell growth and increased the production of curdlan whereas nitrogen-limitation was found to be essential for the higher production of curdlan by Agrobacterium sp. ATCC 31749. As the amount of the inoculum increased, the cell growth as well as the production of curdlan also increased in the MSM without a nitrogen source. The cell growth and production of curdlan increased as the initial pH of the medium decreased as low as 5.0. The conversion rate and concentration of curdlan from 2% (w/v) glucose in the MSM with concentrated cells under nitrogen deletion was 67% and 13.4 g/L, respectively. The highest conversion rate of curdlan under the conditions optimized in this study was 71% when the glucose concentrations was 1% (w/v).

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BcHSP17.6 유전자 도입에 의한 알팔파의 형질전환 (Transformation of Alfalfa by BcHSP17.6 Gene using Agrobacterium tumefaciens)

  • 김기용;성병렬;임용우;최기준;임영철;장요순;서성;윤세형;박근제;조진기
    • 한국초지조사료학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.151-156
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    • 2001
  • 내열성 유전자인 BcHSP17.6를 갖도록 제작한 발현벡터 pBKH4를 Agrobacterium tumefaciens LBA 4404에 도입후, Agrobacterium과 알팔파 캘러스의 공배양을 통해 감염시킨 캘러스를 $100{\mu}g/m{\ell}$의 kanamycin과 $500{\mu}g/m{\ell}$의 cefotaxim을 첨가한 SH-kc배지에서 배양하며 형질전환된 캘러스를 선발하였다. 식물체 재분화는 SH- nk-c, SH-sp-c, SH-11b-c, SH-1BA 배지에서 약 4개월간 배양하여 재분화를 완성하였으며, 재분화된 알팔파의 genomic DNA를 분리한 후, PCR 분석 및 Southern blot 분석을 실시하여 알팔파의 형질전환을 확인하였다.

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한국산 고감염 Agrobacterium spp의 분리 및 연초의 형질전환에 이용 (Isolation of Hypervirulent Agrobacterium spp from Korea and Application for Transformation of Tobacco)

  • 양덕춘;정재훈;이정명
    • 식물조직배양학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.207-217
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    • 1998
  • 한국에서 자생한 자연산 tumor 조직과 근권토양으로부터 형질전환율이 높은 hypervirulent Agrobacterium spp를 분리하기 위해서 Salix, Diospyros, Populus 및 Malus에서 형성된 tumor 조직과 근권토양을 채취하괴 Schroth 선택배지와 New and Kerr 배지를 이용하여 78 균주의 colony를 특성에 따라 분리하였다. 이중에서 48 균주가 당근 disc에서 tumor를 형성하였으며 tumor를 형성한 균주중 형성시기가 빠르며 크기가 커 hypervirulent 균주로 생각되는 A. tumefaciens SP101을 biotype 1, 그리고 A. tumefaciens SM042를 biotype 2로 동정하였다. 토양중에서 선발한 A. tumefaciens SM042와 disarmed A. tumefaciens PC2760에 kanamycin 저항성 유전자를 함유하고 있는 binary vector pGA643을 도입하여 conjugant인 A. tumefaciens SM643과 A. tumefaciens PC643을 kanamycin과 tetracycline이 함유된 최소배지에서 획득하였다. 연초의 형질전환을 위해서 conjugant Agrobacterium과 연초조직을 동시배양 후 2,4-D와 kanamycin이 함유된 선발배지에 치상하여 형질전환을 유도한 결과 A. tumefaciens SM643이 A. tumefaciens PC643보다 더 많은 캘러스가 형성되었다. 그러나 A. tumefaciens PC643을 사용한 형질전환 캘러스는 대부분 friable한 캘러스로 유도되었으며 정상적으로 식물체로 생장하였으나 A. tumefaciens SM643을 사용한 캘러스는 매우 딱딱하며 둥그런 형태의 캘러스와 friable한 캘러스가 혼재한 상태로 생장하였으며, 이중에서 friable한 캘러스는 정상적인 shoot가 형성되었으나 딱딱한 캘러스로 유도된 형질전환체는 식물체로 형성되지 않고 반구형 미색의 전형적인 tumor 캘러스로 생장하였다. 한편 형질전환시 캘러스를 유도하지 않고 직접 shoot를 형성시킨 결과 disarmed Ti-plasmid를 사용하지 않고 wild-type Ti-plasmid를 사용해도 정상적인 형질전환체를 획득할 수 있었다.

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Fermentation and Proteomic analysis of E. coli mutant FC which produced soluble glucan

  • Kim, Ji-Yong;Jin, Li-Hua;Kim, Jung-Kyu;Lee, Jung-Heon
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVII)
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    • pp.668-671
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    • 2005
  • In this study, the full gene of the putative ${\beta}-1,3-glucan$ synthase catalytic subunit(gi:40556679) in Agrobacteriujm sp. ATCC31750 was cloned into E. coli BL21(DE). We found that putative ${\beta}-1,3-glucan$ synthase catalytic subunit full gene mutant(E. coli mutant FC) produced soluble glucan.instead of curdlan(insoluble glucan).

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간척지토양(干拓地土壤)의 수도근권(水稻根圈)에서 협생질소고정(協生窒素固定)에 관(關)한 연구(硏究) -제(第) II 보(報). 혈청면역학적(血淸免疫學的) 방법(方法)에 의한 협생질소고정세균(協生窒素固定細菌)의 분리(分離) (Associated Nitrogen Fixation in the Rhizosphere of Rice in Saline and Reclaimed Saline Paddy Soil -II. Identification of associative heterotrophic nitrogen fixing bacteria in histosphere of grasses and rice)

  • 이상규;서장선;고재영
    • 한국토양비료학회지
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    • 제20권2호
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    • pp.193-197
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    • 1987
  • 우리나라 서남해(西南海) 간사지(干瀉地) 및 간척답토양(干拓沓土壤)에서 자생(自生)하는 벼과(科)(5종(種)), 석죽과(科)(2종(種)), 질경이과(科)(2종(種))식물(植物) 및 수도(水稻)(2품종(品種))의 뿌리에서 협생질소고정균(協生窒素固定菌)의 분리동정(分離同定) 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 수답(水沓) 및 자생식물(自生植物)뿌리에서 24종(種)의 질소고정능(窒素固定能)이 높은 협생질소고정균(協生窒素固定菌)을 분리(分離)하였으며 분리(分離)된 세균(細菌)은 8종(種)의 Azospirillum 속(屬), 11종(種)의 Pseudomonas 속(屬), 2종(種)의 Agrobacterium 속(屬) 그리고 2종(種)의 Klebsiella 속(屬)의 세균(細菌)으로서 대체(大體)로 Azospirillum 속(屬)과 Pseudomonas 속(屬)의 세균(細菌)이 많았다. 2. 각종식물별(各種植物別) 협생질소고정균(協生窒素固定菌)의 종류(種類)는 수도(水稻)와 큰 개미자리 뿌리에서 Azospirillum 속(屬), Pseudomonas 속(屬), Agrobacterium 속(屬) 그리고 Klebsiella 속(屬)의 세균(細菌)이 갯쇠보리, 창질경이, 털질경이, 각시미꾸리광이, 및 물억새 뿌리에서 Pseudomonas 속(屬), 그리고 갯잔디에서 Azospirillum 속(屬)의 세균(細菌)이 각각(各各) 분리(分離)되었는데 그중 수도(水稻)와 큰개미자리가 타식물(他植物)뿌리보다 협생질소고정균(協生窒素固定菌)의 종류(種類)가 많았다. 3. 간척지토양수도(干拓地土壤水稻) 및 식물(植物)뿌리에서 분리(分離)된 세균(細菌)의 혈청면역학적동정결과(血淸免疫學的同定結果) 이들 협생질소고정균(協生窒素固定菌은 Azospirillum lipoferum, Pseudomonas sp, Agrobacterium radiobader, 및 Klebsiella planticola 였다.

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마늘오일을 이용한 오이와 토마토 흰가루병 방제 (Control of Powdery Mildew by Garlic Oil in Cucumber and Tomato)

  • 서상태;이중섭;박종한;한경숙;장한익
    • 식물병연구
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    • 제12권1호
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    • pp.51-54
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    • 2006
  • 4종류의 식물 추출 오일(마늘, 생강, 계피, 레몬그라스)에 대한 실내 항균효과를 5종의 식물병원세균과 4종의 식물병원진균에 대해 조사하였다. 4종의 오일중 마늘오일과 계피오일의 항균효과가 우수하였다. 특히, 마늘오일은 식물병원세균인 Agrobacterium tumefaciens, Erwinia carotovora, Ralstonia solanacearum, Xanthomonas campestris와 식물병원진균인 Phytophthora infestans, Fusarium oxysporum, Collectotricum sp.에 대해 강한 항균력을 나타내었다. 그러나, Acidovorax avenae와 Pythium sp.에 대해서는 항균효과가 없었다. 마늘오일의 오이 흰가루병(Sphaerotheca fusca)과 토마토 흰가루병(Erysiphe cichoracearum)에 대한 포장 방제효과 실험결과 각각 70.0-74.6%와 71.2%의 방제가를 나타내었다.

The three proline residues (P25, P242, and P434) of Agrobacterium CP4 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase are crucial for the enzyme activity

  • Kang, Kyung-Su;Jin, Yong-Mei;Jeon, Hye-Sung;Park, Sang-Ryoung;Song, Dae-Geun;Lee, Joo-Young;Pan, Cheol-Ho;Kim, Min-Kyun
    • Plant Biotechnology Reports
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    • 제4권4호
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    • pp.329-334
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    • 2010
  • Multiple sequence alignments showed that the prolines at the 25th, 129th, 153rd, 242nd, 322nd, and 434th amino acids in 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS) from Agrobacterium sp. strain CP4 are strongly conserved in various prokaryotic EPSPS proteins. Single point mutations of the conserved prolines to alanine (P25A, P153A, P242A, P322A, and P434A) were introduced in the CP4 EPSPS in order to investigate the importance of the conserved prolines for the enzyme properties. The point mutations caused decreases in substrate binding affinity and catalytic efficiency as well as the glyphosate resistance, in general. Especially, the 25th and 242nd prolines located in the polypeptide hinges connecting top and bottom domains of CP4 EPSPS as well as the 434th proline at the C-terminus of the enzyme turned out to be crucial for the enzyme activity.

작물(作物)의 종류(種類)와 잔사(殘渣) 및 시비량(施肥量)이 토양미생물상(土壤微生物相), 이화학성(理化學性) 및 작물생육(作物生育)에 미치는 역할(役割) -I. 미생물상(微生物相) 변화(變化) (Role of Crops and Residues, and Fertilization to Changes of microbial Population, Soil chemical Properties and Plant Growth -I. Microbial Population in the Habitate)

  • 김승환;이상규
    • 한국토양비료학회지
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    • 제25권4호
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    • pp.370-377
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    • 1992
  • 작물재배기간중(作物栽培期間中) 재배작물(栽培作物)의 종류(種類), 잔사(殘渣)의 토양환원(土壤還元) 및 시비량(施肥량)을 달리 했을때 토양미생물(土壤微生物)의 종류(種類)와 수(數), 토양이화학성(土壤理化學性), 작물생육등(作物生育等)에 미치는 영향(影響)을 알고자 일연(一連)의 포장시험(圃場試驗) 및 실내시험결과(室內試驗結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 작물(作物)의 종류별(種類別) 미생물수(微生物數) 변화(變化)는 밭벼 재배토양(栽培土壤)에서 세균(細菌)과 방선균(放線菌) 수(數)가 많았으나 고추와 참깨재배토양(裁培土壤)에서 세균(細菌), 방선균(放線菌) 및 사상균수(絲狀菌數) 변화(變化)에는 크게 영향(影響)하지 않았다. 2. 생산된 작물잔사(作物殘渣)를 전양환원(全量還元)시 고추, 참깨, 대두(大豆) 및 밭벼토양(土壤) 모두 미생물수(微生物數) 증가(增加)를 보였으며 그 정도(程度)는 밭벼 재배시(栽培時) 세균(細菌)과 방선균(放線菌) 수(數)의 증가(增加)가 더욱 뚜렷하였다. 3. 시비량(施肥量)의 증가(增加)는 공시(供試)된 4개(個) 작물(作物)에서 모두 미생물수(微生物水)의 현저(顯著)한 감소(減少)를 보였으며 특(特)히 방선균(放線菌)의 감소(減少)가 더욱 현저(顯著)하였으며 수확후(收穫後) 미분해(未分解) 작물(作物) 잔사환원(殘渣還元)은 시비량증가(施肥量增加)로 인(因)한 미생물수(微生物數) 감소(減少)를 막아주는 완형작용(緩衡作用)의 기능(機能)을 보였다. 4. 공시토양(供試土壤)의 세균(細菌) 분리동정결과(分離同定結果) 바실러스속(屬)>리조비움속(屬)>아그로박테리움속(屬)>슈도모나스속(屬) 세균(細菌)의 순(順)으로 균수(菌數)가 많았으며 전체적(全體的)으로 볼때 그램양성균(陽性菌)이 그램음성균수(陰性菌數)보다 많았다. 5. 작물별(作物別) 세균(細菌)의 종난(種難)와 수(數)를 보면 바실러스속(屬) 세균(細菌)은 고추에서, 리조비움속(屬)은 대두(大豆)와 참깨에서, 아그로박테리움속(屬)은 대두(大豆) 및 참깨재배지(栽培地)에서 많은 수(數)를 보였다. 6. 미생물(微生物)의 서식지별(棲息地別) 수(數)는 근표면(根表面)이 토양(土壤)이나 근권(根圈)에 비해 수십배(數十培) 내지(乃至) 수백배(數百培) 이상(以上) 많았으며 다음은 근권(根圈)이었다. 바실러스속(屬), 리조비움속(屬) 및 슈도모나스속등(屬等)의 세균(細菌)은 근표면(根表面)에서 뚜렷이 많은 수(數)를 보였고 아그로박테리움속(屬) 세균(細菌)과 후사리움속(屬) 사상균(絲狀菌)은 근권(根圈)에서 많았다. 7. 작물재배지(作物栽培地) 토양(土壤)에서 미생물수변화(微生物數變化)에 미치는 영향(影響)은 기후(氣候)>작물(作物)>유기물(有機物)>시비양(施肥量)의 순(順)으로 컸다.

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버섯재배 후 탈병배지의 원예용 상토재료 이용성 검토 (Applicability of Spent Mushroom Media as Horticultural Nursery Media)

  • 이찬중;정종천;전창성;김승환
    • 한국토양비료학회지
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    • 제42권2호
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    • pp.117-122
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    • 2009
  • 본 연구는 팽이버섯과 큰느타리버섯 재배 후 탈병 배지를 대상으로 원예용 상토재료로서의 이용가능성을 검토하기 위하여 수행하였다. 탈병배지의 이화학성을 분석한 결과 팽이버섯 탈병배지에서 pH와 암모니아태 질소가 높았고, CEC는 느타리재배 탈병배지에서 높았다. 인산과 양이온 함량은 팽이버섯 탈병배지가 큰느타리 시료에 비해 상대적으로 높았다. 미생물 분포는 팽이버섯 탈병배지에서 Microbacterium, Rhodococcus, Agrobacterium, 큰느타리버섯은 Bacillus, Pseudomonas, Curtobacterium, Microbacterium, Plantibacte속 등이 우점하였다. 버섯재배 탈병배지를 퇴비화한 결과 시판용 상토원료보다 CEC는 낮았으나, 질소, 인산 및 양이온 함량은 오히려 높았다. 팽이와 큰느타리버섯 탈병배지를 퇴비화한 후 질석을 혼합하여 고추와 배추에 대한 발아율을 조사하였다. 팽이버섯 탈병배지는 질석 혼합 비율에 관계없이 고추와 배추의 발아율이 높았다. 그러나 큰느타리 탈병배지와 질석혼용시 질석 20% 이상 혼합시 고추의 발아율이 100%였으나, 10% 혼합의 경우는 발아가 전혀 되지 않았다. 특히 배추의 경우 질석 30%를 혼합하여도 10%의 발아율을 나타냄으로써 큰느타리재배 탈병배지는 배추재배용 상토원료로는 부적당할 것으로 판단되었다. 한편, 팽이버섯 탈병배지는 시판용 상토원료와 혼합할 경우 혼합비율에 관계없이 사용가능하다고 판단되나, 큰느타리 탈병배지의 경우는 시판용 상토원료와 20% 미만의 적은 양을 혼합할 경우 사용이 가능할 것으로 판단된다. 고추 유묘의 생육은 팽이버섯과 큰 느타리 탈병배지 모두 질석 혼합비율이 증가할수록 초장, 생체중 및 근중이 증가하였으며, 특히 큰느타리 탈병배지를 이용한 상토에서 고추 유묘의 생육촉진 효과가 뚜렷하였다.