The genotypic (2n, 3n, 4n) response of watermelon in vitro shoot tip culture was evaluated. Different genotypes had similar response in terms of shoot formation and growth. Shoot formation was better at lower concentration of 0.3 mg/L BA and higher concentration of 5-10.0 mg/L 2iP and kinetin, but growth of newly formed shoot was inhibited. With further subculture, kinetin did not promote shoot formation Better shoot formation was observed at 0.3-0.5 mg/L BA. Combination of 0.3 mg/L BA and 0.3-0.5 mg/L BA was effective in shoot multiplication, growth and induction of more internodes. Varrying levels of light intensity and agar concentration did not affect the performance of tetraploid plants. Higher light intensity and agar concentrations decreased the number of shoot formed in triploid plane. Growth in both genotype, however was inhibited. Higher light intensity was found to promote leaf senescence in all genotypes. All growth inhibitors decreased the number of shoots formed and slowed plant growth there by prolonging duration of cultures. Growth inhibitors were to observed to decrease incidence of hyperhydricity in culture. No difference in shoot formation was observed in each of the concentrations used in Ancymidol, TIBA, CCC and PP333. Shoot formation and growth was more inhibited in ABA treatments. Leaf expansion and growth was poor in all treatments.
Using agar and gelatin as wall materials, onion oil was microencapsulated using the extrusion spraying technology. A sensitive methodology was developed for quantitative determination of the microencapsulation yield through ethyl acetate extraction and gas chromatographic analyses. Optimal conditions for the microencapsulation process consisting of the ratio of [core material, Cm] to [wall material, Wm] ($X_1$), temperature of dispersion fluid ($X_2$), detergent concentration in dispersion fluid ($X_3$), and concentration of emulsifier $(X_4)$ were determined using response surface methodology. The regression model equation for the yield of microencapsulation (Y, %) of onion oil could be predicted as $Y\;=\;97.028571-0.775000\;(X_1)-0.746726\;(X_1){\cdot}(X_1)\;-\;1.100000\;(X_3){\cdot}(X_2)$. The optimal conditions for the microencapsulation of the onion oil were determined as the ratio of [core material] to [wall material] of 4.5 : 5.5 (w/w), the temperature of dispersion fluid of $17.1^{\circ}C$ detergent concentration in dispersion fluid of 0.03%, and the concentration of emulsifier of 0.42%. Results revealed the most stable microcapsule of onion oil could be formed with the highest yield of microencapsulation (more than 95%) under optimal conditions.
Agar-gel Diffusion test (AGD), Counterimmunoelectrophoresis(CIEP) and Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA) were examined with the sera of skin test positives for paragonimiasis. The crude antigen (Paragcnimus whole worm extracts: protein concentration, 7.56mg/m1) and human sera were used in AGD and CIEP. And in ELISA test, diluted antigen with 1:40, 000 of crude antigen and diluted sera with 1:100, 1:200 were used in the test. The positive identical ratio between AGD and CIEP reactions is 985 and negative identical ratio is 100%. One or three precipitin bands are observed in AGD. One to seven precipitin bands are also revealed in CIEP. Especially, deeply stained bands are observed in CIEP than those of AGD. The positive identical ratios between AGD and ELISA tests are 96% in 1:100 diluted sera, and 94% in 1:200 diluted sera. But the negative identical ratios between AGD and ELISA tests are 97% and 99% respectively in 1:100 and 1:200 diluted sera. The positive identical ratios between CIEP and ELIEA tests are 98% and 96% respectively in 1:100 and 1:200 diluted sera, but also 97% and 99% in 1:100 and 1:200. Control sera, such as clonorchiasis, amoebiasis and toxoplasmcsis, revealed all negatives with Paragonimus antigen in AGD, CIEP and ELISA tests. By above results, ELISA was mcst sensitive, next CIEP and AGD, But AGD test apprars to be more useful when used to crude antigen without cross rfacticn with other parasitic infections. CIEP test is basically equal in terms of precipitin reaction, but CIEP is able to be detected more sensitively and rapidly though less simple in handiwork than AGD. Consequently, three methods for inlmunological tests of paragonimiasis have gccd correlations with one another. Also, each of these has both merits and demerits in iymunolcgical test for paragonimiasis. But the ELISA test was proved to be the most sensitive and convenient tool for mass screening test, especially in cacti of using purified antigen.
Molecular analysis using the internal transcribed spacer region sequences revealed that the strains used in this study, which were formerly identified as Panellus serotinus, are Panellus edullis. After Universal Fungal PCR Fingerprinting (UFPF) analysis, eight strains of P. edulis were divided into two groups. We conducted fundamental research on mycelial growth and sawdust cultivation to understand the cultural characteristics of eight wild P. edulis strains collected from Korean forests. All strains showed faster and denser mycelial growth on potato dextrose agar (PDA) than on other media (malt extract agar, Sabouraud dextrose agar). Optimal conditions for mycelial growth were: $20^{\circ}C$ on PDA, $25^{\circ}C$ on potato dextrose broth (PDB), and pH 5~8 on PDB at $25^{\circ}C$. Two strains (NIFoS 2407, 3993) were selected as excellent strains based on mycelial growth and density on PDA. NIFoS 2792 showed high cellulase activities on carboxymethyl cellulose (CMC) agar, and NIFoS 2387 and 2804 exhibited high laccase activities on ABTS-containing agar media. The mycelial growth of P. edulis was the fastest on Quercus acutissima and Q. mongolica sawdust media, and mycelial density was the highest on Quercus spp. sawdust-containing media. Sawdust cultivation of P. edulis was successful. The conditions were 80~85 days of cultivation period after spawn inoculation, 10~11 days for primordial formation at $17{\sim}18^{\circ}C$, and 15~20 days for fruiting growth. NIFoS 2804 and 3993 were selected as good strains in terms of cultivation period and mushroom production. These results could be useful for the artificial cultivation of P. edulis.
This research was carried out to improve the utilization of agar by evaluating the effect of agarooligosaccharides on the intestinal microflora. Medium containing 0.2% agarooligosaccharides remarkably enhanced the growth of Bifidobacterium infanits; however, agarooligosaccharides did not influence the growth of Clostridium perflingens. Agarooligosaccharides affected intestinal microflora to different extent by various pH and NaCl concentration. The growth of B. infantis enhanced over pH 4.5. Within 1% NaCl concentration, addition of agarooligosaccharides enhanced the growth of B. infantis. In contract, NaCl did not affect the growth of Cl. perflingens at all concentrations tested. Therefore, agarooligosacchariedes improved the benevolent intestinal microflora and depressed to the level of bacteria causing putrefaction and food poisoning.
A plant regeneration system was developed through shoot organogenesis from in vitro leaf explants of Chrysanthemum morifolium 'Ohblang'. The effects of different concentrations of plant growth regulators and AgNO3 on efficient shoot regeneration and inhibition of browning were evaluated in chrysanthemum. The explants were cultured on MS shoot induction medium supplemented with 12 combination treatments of 6-benzyladenine (BA) 0.5, 1.0 and 2.0 mg/L, and α-naphthaleneacetic acid (NAA) 0.2, 0.5, 1.0 and 2.0 mg/L in darkness for 6 weeks and cultured under a 16/8 h photoperiod for 6 weeks. The highest shoot regeneration was obtained from the explants cultured on the medium with 1.0 mg/L BA and 1.0 mg/L NAA. Based on this result, AgNO3 was added to a shoot induction medium containing MS salts, vitamins, 1.0 mg/L BA, 1.0 mg/L NAA, 30 g/L sucrose, and 6 g/L agar to reduce browning of chrysanthemum leaf explants. In the control treatment without AgNO3, leaf explants turned brown at the cut edge; however, browning was not observed in AgNO3 treatments. Shoot organogenesis was higher at low concentrations of AgNO3 and decreased with an increase in AgNO3 concentration. The explants cultured on shoot induction medium (MS salts, vitamins, 1.0 mg/L BA, 1.0 mg/L NAA) with 1 mg/L of AgNO3 produced the highest shoot regeneration with 2.6 shoots per explants and a browning index of 0.7. When the regenerated shoots were detached from the explants and cultured on MS medium, the shoots were elongated and rooted successfully.
The Photosynthetic bacterium, Rhodopseudomonas sphaeroides strain B6 was irnmobilized on agar gel. The optimum concentration of agar for hydrogen production was 2% (w/v). Maximum rates of hydrogen production by immobilized (300 ml of gel; 2.85 rng dry cells/ml) and free cells (1l culture; 0.87 mg dry cells/ml) were 47.5 and 48.0 ml/hr/culture, respectively. However, when both cultures were fed by 10 mmoles of lactate as limited electron donor at the later period of incubation, the activity of hydrogen production by free cells was significantly decreased but, immobilized cells continued hydrogen production with almost the same initial rate. Wc examined hydrogen production by immobilized cells of strain B6 under periodic illumination for 12 hr-intervals. When the culture was periodically fed by basal medium containing 9.3 rnmoles of DL-lactate and 1.86 mmoles of L-glutamate as consumed electron donor and nitrogen source, respectively, for every one liter of hydrogen produced, hydrogen was evolved continuously with the average rate of 510 ml/day/300 ml gel (2.9 rng dry cellslml) during the incubation time for 228 hr.
Embryogenic calli of Codonopsis lanceolata were cultured on MS agar medium containing various concentrations of sucrose as a carbon source. Upon transfer to MS basal medium, somatic embryos of cotyledonary stage converted to plantlets. When sucrose was added with greater than 4%, the number of shoots and roots regenerated from somatic embryo increased. However, the growth of shoots and roots was retarded in agar medium with more than 2% sucrose, but promoted in medium with lower concentration of sucrose. Saponin contents of shoots regenerated from somatic embryos, embryogenic calli, non-embryogenic calli, and native roots were determined by HPLC. Saponin contents of native root was variable, depending on regenerant, embryogenic calli, and cotyledonary embryos. The saponin contents of regenerated roots in medium with high sucrose was similar to native roots. Saponins content based on cell differentiation to shoot and root was dramatically decreased. This results could be effectively controlled for the production of useful secondary metabolites.
To investigate the possibility of using alkalophilic Bacillus sp. K-11 as a host for molecular cloning, plasmid pUB110 and pBD64 were introduced into alkalophilic Bacillus sp. K-17 by protoplast transformation system. Protoplasts of Bacillus sp. K-11 were prepared by treatment with 200 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ Iysozyme in SMM buffer containing 0.4M sucrose. Optimal temperature, pH and culture time for protoplast formation were 4$0^{\circ}C$, 7.0 and 4hrs, respectively. Cell wall was regenerated efficiently on DM3 medium containing 0.8% agar and 0.5M sodium succinate. Under these conditions for protoplast formation and regeneration, the highest transformation efficiency was obtained with cells incubated for 4hrs, and using 30%(V/V) of 40%(W/V) PEG6,000, In characteristics of transfer-mants, plasmid pUB110 was more stable than plasmid pBD64 in Bacillus sp. K-17. Maximum xylanase production of both transformants carrying pUB110 and pBD64, respectively was similar, but under the same conditions, enzyme secretion by transformant carrying pUB110 was earlier than that of transformant carrying pBD64.
A capillary method was used to evaluate the properties of mass transfer process and diffusion coefficients in the gel food. Amaranth dye was selected as a diffusant material to visualize the degree of diffusion procedure easily. After contacting cylinder containing agar gel with amaramth dye solution for some hours, the gel was cut to five segments by 0.5 cm in length. The diffusant concentration from the segments were measured by the spectrophotometer at 523 nm. Prediction models for the diffused quantities in gel food were established by the regression program of SPSS package program. Generally, diffusion coefficient can be calculated by Fick's second law, however, it will be determined by using numerical analysis method more easily. Finally the diffusion coefficients in this research were calculated by arithmetic mean of the measured values. As raising gel agent concentration, the mean diffusion coefficient tended to decrease because the obstruction effect came to become significant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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