Seven genera and 15 species of fungi were isolated from 50 samples of then different steps of dried onion (5 samples of each step) collected from an onion factory in Sohag Governorate, Egypt, and grown on glucose-Czapek's agar (7 genera and 15 species) and 10% NaCl glucose-Czapek's (2 genera and 6 species). The average total counts of fungi were gradually decreased throughout the different steps of drying from 2090 to zero and 152 to zero colonies/g on glucose-Czapek's agar and 10% NaCl glucose-Czapek's agar media, respectively. Aspergillus was the most common genus on the two types of media used. The dominant species were Aspergillus niger, A. flavus, A. terreus, Penicillium chrysogenum and Fusarium of oxysporum on glucose-Czapek's agar and A. terreus and A. niger on 10% NaCl glucose-Czapek's agar. The chloroform extracts of different samples were tested for the presence of mycotoxins using thin layer chromatographic analysis. The results indicated that aflatoxin was present at concentrations decreased throughout the different steps of the drying from step No. 1, onion bulbs, $120\;{\mu}g/kg$; to step No. 8, standard A, $20\;{\mu}g/kg$ while step Nos. 9 & 10 (completely dry powdered onion) were free from aflatoxin. Citrinin was also present in the first three steps at concentrations gradually decreased from 30 to 10 mg/kg.
심장질환 등을 유발하는 콜레스테롤을 함유한 동물성 지방을 제조공정을 통하여 제거하고 conventional milk의 기호도와 유사한 cholesterol free 우유를 제조한 후 품질특성을 살펴보았다. 동물성 지방 함량은 대조구와 콜레스테롤을 제거한 실험구 간에 유의적인 차이를 보였으며 (p<0.05), 모든 시료는 알코올, 가수, 체세포수에서 안정성이 있는 품질 특성을 나타내었다. 콜레스테롤은 대조구의 7 mg/100 mL에 비해 실험구는 검출되지 않아 건강에 유익할 수 있는 결과가 나타났다. 모든 시료에서 미생물은 검출되지 않았고, 아플라톡신 $M_1$, 항생물질(7종) 및 합성항균제(15종) 잔류물질도 음성이어서 품질적 차이가 없었다. 색도와 관능검사 중 color는 대조구와 CFM1이 유의성(p<0.05)이 있었으나 CFM2는 차이가 크지 않았다. 결과적으로 본 연구는 실험구 중 CFM2가 보통 우유와 품질적으로 유사한 건강지향적인 cholesterol free 우유의 개발 가능성을 제시하였다.
토양미생물군인 Miraculous soil-Microorganisms (MS균) 제제를 음식폐기물에 처리 후 발효공정에 따른 아플라톡신의 잔존 유무 분석, 열량 아미노산 및 지방산 조성분석을 통해 양돈사료화를 위한 효율적 처리방법에 대한 자료를 얻고자 실시하였다. 음식폐기물의 MS균 발효 후 calorimeter를 이용한 열량측정 결과 건물 1g당 평균 7.599 Kcal D.M 정도의 높은 열량을 가지는 것으로 나타났으며, MS균 첨가 후 각 발효공정의 모든 시료에서 아플라톡신은 검출되지 않았다. 음식폐기물내 총 아미노산의 함량은 쌀겨 (10%) 및 어분 (5%) 첨가 후 MS균에 의한 3주간 혐기발효 하였을 때 $92.99\;mg{\cdot}g^{-1}$으로 저온 발효 후 보다 약 18.5%의 아미노산 함량이 증가되었다. MS균에 의한 최종 발효 후 필수아미노산 함량은 $34.43\;mg{\cdot}g^{-1}\;D.M$ 이었으며, leucine, phenylalanine, isoleucine 및 thereonine이 높은 구성비율을 보였다. 비필수아미노산 함량은 $58.66\;mg{\cdot}g^{-1}\;D.M$이었고 proline과 glutamic acid의 함량이 상대적으로 높았다. 지방산 조성에 있어서는 palmitic acid, oleic acid 및 palmitoleic acid의 함량이 상대적으로 높았으며, 지방산 함량 역시 혐기숙성 발효에 의해 증가되었다. 이상의 결과들은 음식폐기물을 MS균에 의해 발효처리하였을때 양돈사료로서의 충분한 열량을 함유하고 있으며, 아플라톡신으로부터 안전함을 보여주며, MS균에 의한 혐기발효를 통해 음식폐기물내 단백질 및 지방의 가수분해를 촉진시킬 수 있음을 잘 보여주었다.
$AFB_1$의 대사산물 중 하나인 $AFM_1$을 사람과 돼지의 뇨에서 cdELISA를 통해 분석함으로써 간접적으로 $AFB_1$의 위해성 평가를 수행하고자 하였다. 항 $AFM_1$ 항체와 ${AFB_1}-HRP$를 이용한 cdELISA에서 $AFM_1$의 검출한계는 10 pg/mL로 나타났다. 사람의 요에 $AFM_1$을 3-100 pg/mL 농도가 되게 첨가한 후 cdELISA로 분석하였을 때 그 회수율은 117-167%(평균 139${\pm}$19.1)의 범위로 나타났다. 사람의 뇨 중 $AFM_1$의 오염량을 cdELISA로 분석한 결과 전체 172개의 시료 중 165개의 시료에서 평균 2.74${\pm}$1.89 pg/mL 농도로 검출되었다. 뇨 중 $AFM_1$의 일일배출량은 평균 3.97 ng/day으로 나타났고, $AFB_1$의 섭취량은 체내전환율 5%로 가정하였을 때, 79.4 ng/day로 추정되었다. 따라서 사람의 일일섭취추정량 (PDI)은 1.28 ng/kg bw/day로 나타났으며 돼지의 PDI는 9.2 ng/kg bw/day로 나타났다. 한편 $AFB_1$ 섭취의 위해성 평가에서 사람의 PDI는, 일일섭취감내량(TDI, 0.15 ng/kg bw/day)보다 8.5배나 높은 값을 보였지만 외국의 연구결과와 비교하였을 때 대체로 비슷하게 나타났다.
아플라톡신 및 오크라톡신 A의 동시분석법을 확립하여 보다 신속하고 경제적인 분석을 통해 아플라톡신과 오크라톡신 A를 효율적으로 관리하고자 하였다. 시료의 전처리는 80% methanol로 추출하고 면역친화성 컬럼을 이용하여 정제한 다음 trifluoroacetic acid를 이용하여 유도체화 한 후 HPLC-FLD로 분석하였다. 컬럼은 Capcell pak-$C_{18}$($4.6mm{\times}150mm$, $5{\mu}m$)을 사용하였으며, 이동상은 water : acetonitrile : methanol (72 : 14 : 14) 용액과 acetonitrile : 0.1% phosphoric acid (50 : 50) 용액을 구배용매조성(gradient mode)으로 분석하였다. 형광검출기의 파장은 파장프로그램을 사용하여, 여기파장 360 nm, 검출파장 450 nm과 여기파장 330 nm, 검출파장 460 nm으로 분석하였다. 아플라톡신 $B_1$, $B_2$, $G_1$, $G_2$와 오크라톡신 A의 직선성을 검토한 결과 상관계수($R^2$) 0.9997~0.9998의 범위였고, 검출한계와 정량한계는 각각 0.05~0.18, $0.16{\sim}0.60{\mu}g/kg$이었다. 회수율은 아플라톡신 $B_1$, $G_1$, $B_2$, $G_2$, 오크라톡신 A 각각 78.4~101.5%, 73.3~102.1%, 81.7~106.7%, 67.0~104.6%, 78.7~120.8%이었다. 확립된 동시분석법을 통한 국내 유통식품을 대상으로 모니터링을 실시한 결과 총 151건 중 13건에서 아플라톡신 및 오크라톡신 A가 검출되었으며 검출 범위는 아플라톡신 $B_1$은 $0.32{\sim}1.80{\mu}g/kg$, 오크라톡신 A는 $0.97{\mu}g/kg$이었다. 이들 결과로부터 우리나라에서 유통 중인 조사한 식품 151건의 아플라톡신과 오크라톡신 A의 검출량은 모두 기준치 이하로 적합한 것으로 조사되었으며 안전한 수준임을 알 수 있었다.
Katsoulos, Panagiotis D.;Karatzia, Maria A.;Boscos, Constantinos;Wolf, Petra;Karatzias, Harilaos
Journal of Animal Science and Technology
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제58권7호
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pp.24.1-24.7
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2016
Background: Clinoptilolite is a natural zeolite with high adsorption capacity for polar mycotoxins such as aflatoxins. The efficacy of clinoptilolite in ameliorating the toxic effects of aflatoxicosis has been proven in monogastric animals, but there is no such evidence for ruminants. The aim of this study was to evaluate, under field conditions, whether the dietary administration of clinoptilolite in dairy cows could reduce the concentration of aflatoxin M1 ($AFM_1$) in bulk-tank milk, in farms with higher than or close to $0.05{\mu}g/kg$ of milk (European maximum allowed residual level). An objective of the present study was also to investigate the effect of particle size of clinoptilolite on aflatoxin binding. Methods: Fifteen commercial Greek dairy herds with AFM1 concentrations in bulk tank milk ${\geq}0.05{\mu}g/kg$ were selected. Bulk tank milk AFM1 was determined prior to the onset and on day 7 of the experiment. Clinoptilolite was added in the total mixed rations of all farms at the rate of 200 g per animal per day, throughout this period. Two different particle sizes of clinoptilolite were used; less than 0.15 mm in 9 farms (LC group) and less than 0.8 mm in 6 farms (HC group). Results: Clinoptilolite administration significantly reduced $AFM_1$ concentrations in milk in all farms tested at an average rate of 56.2 % (SD: 15.11). The mean milk $AFM_1$ concentration recorded on Day 7 was significantly (P < 0.001) lower compared to that of Day 0 ($0.036{\pm}0.0061$ vs. $0.078{\pm}0.0074{\mu}g/kg$). In LC group farms the reduction of milk $AFM_1$ concentration was significantly higher than HC group farms ($0.046{\pm}0.0074$ vs. $0.036{\pm}0.0061{\mu}g/kg$, P = 0.002). As indicated by the Pearson correlation, there was a significant and strong linear correlation among the milk $AFM_1$ concentrations on Days 0 and 7 (R = 0.95, P < 0.001). Conclusions: Dietary administration of clinoptilolite, especially of smallest particle size, at the rate of 200 g per cow per day can effectively reduce milk $AFM_1$ concentration in dairy cattle and can be used as a preventive measure for the amelioration of the risks associated with the presence of aflatoxins in the milk of dairy cows.
감잎 열수 추출물 및 감잎 탄닌의 항돌연변이 효과를 Ames test, spore rec assay 및 SOS chromotest 방법을 이용하여 검토하엿다. Salmonella typhimurium TA100에서 aflatoxin $B_{1}(AFB_{1})$, dimethyl-amino-biphenyl(DMAB)와 같은 간접 돌연변이워에 대해서 뿐만아니라 N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG), 4-nitroquinoline-1-oxide(4-NQO)와 같은 직접 돌연변이원에 대해서도 강력한 항돌연변이성을 관찰할 수 있었다. Bacillus subtilis H17($rec^{+}$)와 M45($rec^{-$)를 사용한 spore rec assay에서도 감잎 탄닌은 MNNG에 대한 강한 항돌연변이 효과를 나타내었고, Escherichia coli PQ37을 사용한 SOS chromotest에서도 4-NQO의 돌연변이성이 크게 저해되었다. 또한 감잎차 부터 탄닌을 추출하여 이미 그 효과가 알려진 녹차 탄닌과 함께 항돌연변이 효과를 살펴본 결과 시료의 농도에 비례해서 녹차탄니과 비슷한 수준으로 현저한 항돌연변이 효과를 나타내었다. 이들 항돌연변이 실험계에서 감잎 탄닌이 감잎 열수 추출물에 비해 활성이 크게 나타났다.
This study was designed to synthesize triglycerol monolaurate (TGML) with Lipozyme 435 as the catalyst, and explore its effects on the growth of Aspergillus parasiticus (A. parasiticus) and Aspergillus flavus (A. flavus) and the secretion of aflatoxin b1. The highest content of TGML (49.76%) was obtained at a molar ratio of triglycerol to lauric acid of 1.08, a reaction temperature of 84.93℃, a reaction time of 6 h and an enzyme dosage of 1.32%. After purification by molecular distillation combined with the washes with ethyl acetate and water, the purity of TGML reached 98.3%. Through characterization by electrospray-ionization mass spectrometry, infrared spectrum and nuclear magnetic resonance, the structure of TGML was identified as a linear triglycerol combined with lauroyl at the end. Finally, the inhibitory effects of TGML on the growths of A. parasiticus and A. flavus and the secretion of aflatoxin b1 were evaluated by measuring the colony diameter, the inhibition rate of mycelial growth and the content of mycotoxin in the media. The results indicated that TGML had a stronger inhibitory effects on colony growth and mycelial development of both toxic molds compared to sodium benzoate and potassium sorbate, and the secretions of toxins from A. parasiticus and A. flavus were completely suppressed when adding TGML at 10 and 5 mM, respectively. Based on the above results, TGML may be used as a substitute for traditional antifungal agents in the food industry.
아플라톡신 B$_1$과 4-NQO의 돌연변이 유발성에 미치는 녹황색 채소류의 메탄올 추출물과 쥬스들의 항돌연변이 효과를 검토하였다. Salmonella typhimurium TA98과 TA100을 이용한 Ames실험계를 사용하였는데 아플라톡신 B$_1$에 대해 채소류의 메탄올 추출물 중에는 들깻잎, 상치, 브로콜리, 쑥갓, 미나리, 들미나리, 붉은고추, 고추잎, 비름, 시금치, 무 등이 큰 항돌연변이성을 나타내었다 (p< 0.01). 이 경우 시험시료 중 약 50% 정도가 저해 효과를 나타내었지만, direct mutagen인 4-NQO에서는 실험 시료 27종중 25종류(93%)에서 항돌연변이성이 관찰되었다 (p<0.01, 0.05). 이중 60%이상 저해효과를 나타낸 시료는 양배추, 케일, 상치, 브로콜리, 갓, 풋고추, 피망, 시금치, 비름, 콩나물, 애호박이었다. 한편 쥬스로 부터 아플라톡신 B$_1$에 대해 항돌연변이 효과를 나타낸 채소류는 들깻잎, 들미나리, 시금치, 양배추로써 각각 용량 의존적으로 (50~500${\mu}\ell$/plate)농도의 증가에 따라 그 저해도가 크게 증가하였다. 한편 오이와 당근은 농도를 높여도 큰 저해효과는 관찰되지 않았다.
본 연구에서는 곰팡이 독소에 대한 노출을 확인하기 위한 목적으로 닭의 간, 신장 조직에서 곰팡이 독소 분석법을 확립하였다. 곰팡이 독소의 경우 닭에서 독성이 강하며, 본 실험에서는 가축의 사료에서 주로 확인되는 곰팡이 독소 6종(아플라톡신 $B_1{\cdot}M_1$, 오크라톡신 A, 푸모니신 $B_1$, 데옥시니발레놀, 제랄레논)을 선별하여 추출, 정제조건을 확립하고 LC-MS/MS를 이용하여 분석하였다. 확립된 분석조건에서 검량선은 $R^2$값이 0.99 이상으로 우수한 직선성을 나타내었다. QUECHERS법을 응용하여 닭 간, 신장 시료에서 곰팡이 독소를 추출, 정제하여 분석하였을 때 곰팡이 독소 4종(아플라톡신 $B_1$, 오크라톡신 A, 데옥시니발레놀, 제랄레논)의 평균 회수율은 80.94~98.10%이고, 상대표준편차도 14% 미만으로 조사되어 높은 정확도와 정밀도를 확인할 수 있었다. 검량선에 근거하였을 때 곰팡이 독소 6종에 대하여 닭 간 시료의 경우 검출한계는 $7.6{\sim}145.79{\mu}g/kg$, 정량한계는 $23.04{\sim}441.78{\mu}g/kg$이었다. 닭 신장의 경우 검출한계는 $6.07{\sim}197.20{\mu}g/kg$, 정량한계는 $18.40{\sim}597.59{\mu}g/kg$으로 나타났다. 본 연구의 결과 LC-MS/MS를 이용하여 닭의 간, 신장에서 곰팡이 독소 6종 동시 분석법을 확립하였으며, 이는 생체시료에서 효율적인 곰팡이 독소 동시 분석법으로 활용이 가능할 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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