Alpha-linolenic acid (ALA) is one of n-3 polyunsaturated fatty acids and found mainly in the chloroplasts. Many studies have been reported that intracellular reactive oxygen species (ROS) in mammalian oocytes were reduced by supplementation of ALA in in vitro maturation (IVM) medium. Based on these reports, we expected that ALA acts as an antioxidant during IVM of porcine oocytes. Therefore, the objective of this study was to investigate the antioxidant effect of ALA supplementation during IVM in porcine oocytes. The cumulus-oocyte complexes (COCs) were incubated in IVM medium containing $200{\mu}m$$H_2O_2$ or $H_2O_2$ with $50{\mu}m$ ALA for 44 h. Nuclear maturation stage of oocytes was evaluated using aceto-orcein method. For measurement of oxidative stress state, intracellular ROS and glutathione (GSH) levels were measured using carboxy-DCFDA and cell tracker red, respectively. In results, oocytes in metaphase-II (MII) stage development was significantly reduced in $H_2O_2$ group compared to non-treated control group $61.84{\pm}1.42%$ and 80.00%, respectively; p<0.05) and it was slightly recovered by treatment of ALA ($69.76{\pm}1.67%$; p<0.05). The intracellular GSH levels was decreased in $H_2O_2$ groups compared with control groups, but it was enhanced by ALA treatment (p<0.05). On the contrary, $H_2O_2$ treatment increased intracellular ROS level in oocytes and $H_2O_2$-induced ROS was decreased by treatment of ALA (p<0.05). Our findings suggested that ALA treatment under oxidative stress condition improve oocyte maturation via elevated GSH and reduced ROS levels in oocytes. Therefore, these results suggest that ALA have an antioxidative ability and it could be used as antioxidant in in vitro production system of porcine embryo.
Objective: The study was to investigate the effects of alanyl-glutamine (Ala-Gln) and glutamine (Gln) supplementation on the intestinal mucosa barrier in piglets. Methods: A total of 180 barrows with initial weight $10.01{\pm}0.03kg$ were randomly allocated to three treatments, and each treatment consisted of three pens and twenty pigs per pen. The piglets of three groups were fed with control diet [0.62% alanine (Ala)], Ala-Gln diet (0.5% Ala-Gln), Gln diet (0.34% Gln and 0.21% Ala), respectively. Results: The results showed that in comparison with control diet, dietary Ala-Gln supplementation increased the height of villi in duodenum and jejunum (p<0.05), Gln supplementation increased the villi height of jejunum (p<0.05), Ala-Gln supplementation up-regulated the mRNA expressions of epidermal growth factor receptor and insulin-like growth factor 1 receptor in jejunal mucosa (p<0.05), raised the mRNA expressions of Claudin-1, Occludin, zonula occludens protein-1 (ZO-1) and the protein levels of Occludin, ZO-1 in jejunal mucosa (p<0.05), Ala-Gln supplementation enlarged the number of goblet cells in duodenal and ileal epithelium (p<0.05), Gln increased the number of goblet cells in duodenal epithelium (p<0.05) and Ala-Gln supplementation improved the concentrations of secretory immunoglobulin A and immunoglobulin G in the jejunal mucosa (p<0.05). Conclusion: These results demonstrated that dietary Ala-Gln supplementation could maintain the integrity of small intestine and promote the functions of intestinal mucosa barriers in piglets.
The aim of this study was to evaluate effect of ${\alpha}$-linolenic acid (ALA) on viability, acrosome reaction and mitochondrial intact in frozen-thawed boar sperm. The boar semen was collected by gloved-hand method and cryopreserved in 20% egg yolk freezing extender containing ALA (0, 3, 5, and 10 ng/mL) with 0.05% ethanol. The frozen-boar spermatozoa were thawed at $37.5^{\circ}C$ for 45 sec in water-bath. The spermatozoa samples were evaluated the plasma membrane integrity, acrosome reaction, and mitochondrial integrity using flow cytometry. In results, population of live sperm with intact plasma membrane was significantly higher in control and 3 ng/mL ALA treatment group than ethanol group (p<0.05). In contract, dying sperms were higher in ethanol group than 3 ng/mL ALA treatment (p<0.05). Acrosomal membrane damage in all sperm population was reduced in 3 ng/mL ALA groups compared with ethanol treatment (p<0.05). However, acrosome damage in live sperm population was no significant difference among the all treatment groups. Mitochondrial integrity was not influenced by ALA treatments in both of live and all sperm population. In conclusion, this results show that supplement of ALA during the cryopreservation process could reduce the membrane damages including plasma and acrosomal membrane, whereas ALA did not influence to mitochondria in boar spermatozoa. Therefore, these results suggest that ALA can protect against the membrane damage derived cryo-stress, and cryopreservation efficiency of boar semen would be improved by use of ALA.
For elucidating the relationship between the biosynthetic pathways for polyhydroxyslkanoates (PHAs) and 5-aminolevulinic acid (ALA), culture conditions for the production of these two biomaterials by Rhodopseudomonas sp. KCTC 1437 were investigated. Of the carbon substrates tested, acetic acid was the best carbon source for cell growth and PHA biosynthesis. When succinic acid was added as a co-substrate into culture medium, cell growth and PHA production were greatly increased up to 2.5 g/ι and 73% of dry cell weight, respectively. The PHA obtained from the carbon substrates tested was homopolyester of 3-hydroxybutyrate, while valeric acid was only effective for the production of copolyester consisting of 3-hydroxybutyrate and 3-hydroxyvalerate. Anaerobic light culture condition was better for PHA production and cell growth than anaerobic dark or aerobic dark culture condition. The organism was capable of synthesizing ALA when glycine and succinic acid were added to the culture medium. ALA was produced to ca.400 mg/ι when levulinic acid, soccinic acid, and glycine were repeatedly added with a reductant (sodim thioglycolate). However, the presence of glycine, levulinic acid and sodium glycolate inhibited the cell growth and the conversion of carbon substrates to PHA. From these results it is apparent that the production yields of PHA and ALA could not be increased simultaneously because the optimal conditions for the production of PHA and ALA are opposed to each other.
Kim, Myung-Hwa;Kim, Hyun-Jeong;Lee, In-Seon;Kim, Kyung-Chan;Lee, Chang-Seop
KSBB Journal
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v.22
no.2
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pp.67-72
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2007
This study investigates the optimal method of administrating 5-aminolevulinic acid (5-ALA) in the context of fluorescence detection by analyzing protoporphyrin IX (PpIX) fluorescence in the cultured normal and cancer cells. 5-ALA was injected as a photosensitizer to the lung cancer cells (A549, NCI-H460) and normal lung cells (HeI299). Hel299, A549, and NCI-H460 cells were incubated with various concentrations of 5-ALA ($0\sim800{\mu}g/mL$). The accumulation of PpIX induced by 5-ALA was observed in A549, NCI-H460 and Hel299 cells. The cell viability was estimated by means of the MTT assay. Formation of PpIX was measured by fluorescence spectroscopy. Especially, formation of PpIX in cancer cells was higher than normal cells. This study suggests that the difference of PpIX induced in normal and cancer cells treated with 5-ALA may use by means of fluorescence diagnosis for cancer.
Burning mouth syndrome (BMS) is a chronic oral disorder of unknown etiology which presents therapeutic challenges. Alpha-lipoic acid (ALA) has been studied as a potential treatment for BMS. The objective of this systematic review and meta-analysis was to evaluate the effectiveness of ALA compared to that of placebo or other interventions in individuals with BMS. Randomized controlled trials (RCT) using ALA to treat BMS were identified from MEDLINE, Cochrane Library, EMBASE, and Web of Science up to February 3, 2021. The assessment of the risk of bias in the included studies was based on the Cochrane guidelines. The primary outcome evaluated was the visual analog scale (VAS) pain intensity. ALA was compared with placebo, clonazepam, gabapentin, pregabalin, ALA plus gabapentin, capsaicin, Biotène®, and laser therapy. Altogether, 137 records were scanned for inclusion/exclusion, and nine RCTs (two unclear and seven at high risk of bias) were included in the qualitative and quantitative analyses, with a total of 594 patients with BMS included in this review. All studies reported an improvement in VAS pain scores ranging from -0.72 to -2.77. Meta-analysis results showed a non-significant reduction in pain intensity for ALA (P = 0.616) compared to that of placebo on a VAS of 0-10. Patients taking ALA were 1.923 times more likely to show an improvement in self-reported BMS symptoms (P = 0.031) than those in the placebo group. Clonazepam and pregabalin showed a significant VAS pain reduction of 4.08 and 4.68 (P < 0.001), respectively, compared to that with ALA. Although ALA intervention provided a non-significant improvement in the pain score and was more likely to produce a reduction in BMS symptoms, the evidence was of low quality. Further research is needed to establish clear guidelines for the use of ALA for BMS treatment.
This study evaluates the improved effect of photodynamic therapy (PDT) by subjecting pathogenic bacteria to a combination of 630 nm light-emitting diode (LED) and 5-aminolevulinic acid (ALA). Bacterial suspensions of 1.5×104 cells/mL were diluted and exposed to ALA concentrations of 10, 5, 2.5, 1.25, and 0.625 mg/mL, incubated for 30 minutes, followed by irradiation with 630 nm LED (18 J/cm2 ). The non-irradiated P. aeruginosa group and the group administered only LED light averaged 415 and 245 colonies, respectively. Conversely, the PDT group showed an average of 109, 225, 297, and 285 colonies at concentrations of 10, 5, 2.5, and 1.25 mg/mL of ALA. Evaluating the effect on E. faecalis revealed an average of 8,750 and 8,000 colonies in the group that did not receive the control photosensitizer and the group exposed to light alone, respectively. However, an average of 0, 2350, 4825, and 7475 colonies at concentrations of 5, 2.5, 1.25, and 0.625 mg/mL ALA were determined for the PDT groups. In conclusion, better inhibitory effects were observed for E. faecalis than for P. aeruginosa. Moreover, our results validate the possibility of improved PDT efficacy using a combination of ALA and 630 nm LED.
Two ${\beta}$-1,4-glucanases (DI and DIII fractions) were purified to homogeneity from the culture filtrate of a cellulolytic bacteria, Cellulomonas sp. CS 1-1, which was classified as a novel species belonging to Cellulomonas uda based on chemotaxanomic and phylogenetic analyses. The molecular mass was estimated as 50,000 Da and 52,000 Da for DI and DIII, respectively. Moreover, DIII was identified as a glycoprotein with a pI of 3.8, and DI was identified as a non-glycoprotein with a pI of 5.3. When comparing the ratio of the CMC-saccharifying activity and CMC-liquefying activity, DI exhibited a steep slope, characteristic of an endoglucanase, whereas DIII exhibited a low slope, characteristic of an exoglucanase. The substrate specificity of the purified enzymes revealed that DI efficiently hydrolyzed CMC as well as xylan, whereas DIII exhibited a high activity on microcrystalline celluloses, such as Sigmacells. A comparison of the hydrolysis patterns for pNP-glucosides (DP 2-5) using an HPLC analysis demonstrated that the halosidic bond 3 from the nonreducing end was the preferential cleavage site for DI, whereas bond 2, from which the cellobiose unit is split off, was the preferential cleavage site for DIII. The partial N-terminal amino acid sequences for the purified enzymes were $^1Ala-Gly-Ser-Thr-Leu-Gln-Ala-Ala-Ala-Ser-Glu-Ser-Gly-Arg-Tyr^{15}$-for DI and $^1Ala-Asp-Ser-Asp-Phe-Asn-Leu-Tyr-Val-Ala-Glu-Asn-Ala-Met-Lys^{15}$-for DIII. The apparent sequences exhibited high sequence similarities with other bacterial ${\beta}$-1,4-glucanases as well as ${\beta}$-1,4-xylanases.
Park, Young Ji;Kwon, Gyu Hyeon;Kim, Jun Oh;Ryu, Woo Sang;Lee, Kyung Suk
Archives of Craniofacial Surgery
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v.20
no.6
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pp.382-387
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2019
Background: Defects of the nasal ala and tip have a complex three-dimensional structure that makes them challenging to reconstruct. Many reconstructive options have been described for nasal ala and tip defects, ranging from primary closure to local flaps and skin grafts. However, it is difficult to determine which method will yield the best cosmetic results in each individual case. Thus, the purpose of this study was to determine which surgical procedures for reconstructing defects of the nasal ala and tip have better cosmetic results. Methods: From 2008 to 2018, 111 patients underwent surgery to reconstruct skin defects after resection of skin cancer in the nasal ala or tip. Their charts were reviewed to obtain data on age, sex, surgical location, size of the defect, surgical method, and cosmetic results using a visual analog scale (VAS). Results: For nasal ala reconstruction, the most commonly used surgical technique was the nasolabial flap (n= 42). This method also had the highest VAS score (7/10). The most commonly selected surgical method for nasal tip reconstruction was the bilobed flap (n= 13), and bilobed flaps and primary closure had the highest VAS score (7/10). Conclusion: Nasolabial flaps showed excellent cosmetic results for the reconstruction of nasal ala defects, while primary closure and bilobed flaps yielded excellent cosmetic results for the reconstruction of nasal tip defects.
PURPOSE. The purpose of this study was to determine the average facial proportions and mandibular movement capacity of 316 first-year dental students who carefully recorded them on each other. MATERIALS AND METHODS. This early exacting clinical experience was closely supervised by the authors in Columbus, Ohio during 1969-70. Five vertical and six horizontal distances were measured on each subject's face. An ala-tragus line and an occlusal line were drawn on the left side of the face to determine if these two lines were parallel. Measurements of mandibular movements involved maximum normal and hinge opening at the incisors and maximum amounts of right, left lateral and protrusive excursions of the mandible. RESULTS. The ala width and distance between the tips of upper right and left canine cusps averaged (35.2 mm and 34.8 mm) but with very large individual variations. The distance between ala to occlusal plane lines was 29.9 mm at the tragus and 31.3 mm near the ala. The angle between orbitale and ala-tragus averaged 13.6 degrees. CONCLUSION. The upper lip length was the most variable and the distance between the pupils was the most stable of the eleven facial measurements. The ala-tragus line and the occlusal plane lines were for all practical purposes parallel. Maximum jaw opening averaged 51.2 mm which was 3.0 times larger than maximal hinge opening of 17.2 mm. The maximum right plus left side jaw excursions (9.2 and 9.4 mm) totaled 18.6 mm, 2.3 times more than the 8.0 mm mean maximum forward protrusion.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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